10厦门-乙型肝炎病毒e抗原( HBeAg ) 东莞常平医院
免疫实验室
文件编号:
DGCPH-IMN-SOP-01-10
乙型肝炎病毒e抗原( HBeAg )
版序:2005-1
页码:第1 页,共2 页
[前言]
HBeAg是乙肝病毒核心颗粒中的一种可溶性蛋白质。
[原理]
本试剂盒用夹心法原理检测人血清或血浆中的HBeAg。具有简便、准确、灵敏度高、特异性强等优点。
[试剂盒组成]
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东莞常平医院
免疫实验室
文件编号:
DGCPH-IMN-SOP-01-10
乙型肝炎病毒e抗原( HBeAg )
版序:2005-1
页码:第1 页,共2 页
[前言]
HBeAg是乙肝病毒核心颗粒中的一种可溶性蛋白质。
[原理]
本试剂盒用夹心法原理检测人血清或血浆中的HBeAg。具有简便、准确、灵敏度高、特异性强等优点。
[试剂盒组成]
1、包被板条
6、底物液A
2、阴性对照血清
7、底物液B
3、阳性对照血清
8、终止液
4、酶标记物溶液
9、浓缩洗涤液 (用蒸馏水1:19稀释后使用)
[试剂厂家]
厦门英科新创科技有限公司
[试剂的稳定性与贮存]
试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内稳定。
[标本的收集与处理]
标本为无溶血血清。
[操作步骤]
1、加样:设空白对照1孔,阴、阳性对照各2孔。分别加阴、阳性对照血清各1滴(50ul)和50ul待测样本于相应孔内。
2、加酶:除空白对照孔外,每孔加1滴酶标记物,轻轻振荡封板后,置37℃水浴60分钟。
3、洗涤:扣去孔内液体,用洗涤液注满各孔,静置20秒,扣去洗涤液,重复4次后在吸水纸上拍干。
4、显色:每孔加底物液A 、B 各1滴,轻轻振荡封板后,置37℃水浴15分钟。
[结果判定]
1、目测:在白色背景下观察各孔颜色,呈明显兰色判为阳性,无色或极淡兰色判为阴性。
2、酶标仪检测(选波长450nm):每孔加终止液1滴后,用空白孔校零,测定各孔OD值。
临界值(C.O.)=2.1×阴性对照平均OD值;
东莞常平医院
免疫实验室
文件编号:
DGCPH-IMN-SOP-01-10
乙型肝炎病毒e抗原( HBeAg )
版序:2005-1
页码:第2 页,共2 页
样本OD值S/C.O.≥1者为HBeAg阳性。(即S≥临界值)
样本OD值S/C.O.<1者为HBeAg阴性。(即S<临界值)
注:阴性对照孔OD值小于0.05时,按0.05计算;大于0.05时,按实际值计算。
[质量控制]
每批检测同步进行标准和质控品测定,绘制室内质控图 。其它按室内质量控制管理规定进行。
[参考范围]
酶联免疫吸附试验(ELISA):阴性
[临床意义]
(1)HBeAg增高说明患有乙型肝炎具有较强的传染性,它的出现往往是乙型肝炎的早期或者是活动期。
(2)如HBeAg阳性持续时间大于10周以上或更长时间,病人可能进展为慢性持续性感染,肝组织常有较严重的损害,急性乙型肝炎容易演变成慢性肝炎或肝硬化。
(3)HBeAg阳性孕妇有垂直传染性,9%以上的新生儿将受乙型肝炎病素感染,HBeAg也为阳性。
[注意事项]
1、不同批号的试剂不可混用。
2、试剂用前先平衡至室温。含血球的标本易出现假阳性,应避免使用。
3、未用完的板条应及时封存于易封袋中。
4、滴加试剂前,应将滴瓶翻转数次混匀。滴加时瓶身应保持垂直。
5、若浓缩洗涤液出现结晶,可于37℃放置至溶解。洗涤要充分,各孔均须注满,防止孔口内含有游离酶不能洗净。
6、本试剂盒应视为有传染性物质,请按传染病实验室规程操作。
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