维生素B2检验SOP

GMP管理文件 目 维生素B2检验操作规程 制 定   审 核   批 准   制定日期   审核日期   批准日期   颁发部门   颁发数量   生效日期   分发部门   文件编码   共 3 页 第 1 页             一、目    的：建立维生素B2检验的标准操作规程，保证正确操作。 二、依    据：《中国兽药典》（2005版） 。 三、适用范围：适用于维生素B2的检验。 四、责 任 者：QC检验员 五、正    文： 1．质量标准：（见维生素B2质量标准）。 2．试剂： 2.01  酚酞指示液                  2.02  氢氧化钠滴定液（0.01mol/L） 2.03  冰醋酸                      2.04 1.4％醋酸钠溶 3．仪器与用具 3.01  电子天平                     3.02  干燥器 3.03紫外分光光度计                3.04  电热恒温干燥箱   4．操作步骤： 4.1  性状 本品为橙黄色结晶性粉末；微臭，味微苦；溶液易变质，在碱性溶液中或通光变质更快。 本品在水、乙醇、三氯甲烷或乙醚中几乎不溶；在稀氢氧化钠溶液中溶解。 比旋度  避光操作。取本品，精密称定，加无碳酸盐的氢氧化钾溶液（取氢 氧化钾20g，加无醛乙醇制成20％的溶液，放置过夜后，吸取上清液，加无醛乙醇稀释成0.1mol/L，经标定后，再精密量取18ml，加新沸过的冷水至100ml，摇匀）溶解并定量稀释制成每1ml中约含5mg的溶液，依法测定（见旋光度检查法标准操作规程），并严格控制温度，比旋度为-120°至-140°。 4.3  鉴别： 4.3.1  取本品约1mg，加水100ml溶解后，溶液在透射光下显淡黄绿色并有强 题 目 维生素 B2检验标准操作规程 共 3 页 第 2 页       烈的黄绿色荧光；分成二份；一份中加无机酸或碱溶液，荧光即消失；另一份中加连二亚硫酸钠 结晶少许，摇匀后，黄色即消褪，荧光亦消失。 4.3.2取含量测定项下的溶液，照紫外-可见分光光度法（见紫外分光光度检查法标准操作规程）测定，在267nm、375nm与444nm的波长处有最大吸收。375nm波长处的吸光度与267nm波长处的吸光度的比值应为0.31～0.33；444nm波长处的吸光度与267nm波长处的吸光度的比值应为0.36～0.39。 4.3.3本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。 4.3.4结果判定：上述三项均呈正反应，则判定该项合格。 4.4  检查 4.4.1酸碱度 取本品0.50g，加水25ml，煮沸2分钟，放冷，滤过，取滤液10ml，加酚酞指示液0.05ml与氢氧化钠滴定液（0.01mol/L）0.4ml，显橙色，再加盐酸滴定液（0.01mol/L）0.5ml，显黄色，再加甲基红溶液（取甲基红50mg，加0.1mol/L氢氧化钠溶液1.86ml与乙醇50ml的混合液溶解，加水稀释至100ml，即得）0.15ml，显橙色（见PH值测定法标准操作规程）。 4.4.2感光黄素 取本品25mg，加无乙醇三氯甲烷10ml，振摇5分钟，滤过，滤液照紫外-可见分光光度法（见紫外分光光度检查法标准操作规程），在440nm的波长处测定．吸光度不得过0.016。 4.4.3干燥失重 取本品0.5g，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过1.0％（见干燥失重检查法标准操作规程）。 如下: 干燥失重%=(W1－W2)/(W1－W0)×100% 式中：W1为称量瓶与供试品的重量（g）；  W2为称量瓶与供试品恒重的重量（g）； W0为称量瓶恒重的重量（g）。 4.4.4炽灼残渣 不得过0.2％（见炽灼残渣检查法标准操作规程）。 计算公式： 炽灼残渣%=(W1－W2)/(W1－W0)×100% 式中  W2：炽灼后坩埚与残渣的重量（g） Wo：坩锅的重量（g） 题 目 维生素 B2检验标准操作规程 共 3 页 第 3 页       W1：供试品与坩埚的重量（g） 4.5含量测定: 避光操作。取本品约75mg，精密称定，置烧杯中，加冰醋酸1ml与水75ml，加热溶解后，加水稀释，放冷、移置500ml量瓶中，再加水稀释至刻度， 摇匀；精密量取10ml，置100ml量瓶中，加1.4％醋酸钠溶液7ml，并用水稀释至刻度。摇匀，照紫外-可见分光光度法（见紫外分光光度法检查标准操作规程）,在444nm的波长处测定吸光度，按C17H20N4O6的吸收系数（E1%1cm）为323计算，即得。 计算公式： 供试品含量（%）=    A样×M对×对照品的含量×样品的稀释倍数        ×100% A对×M样×（1-干燥失重）×对照品的稀释倍数 相对偏差= 结果判定：按干燥品计算，含C17H20N4O6应为98.0％～102.0％。相对偏差不超过0.3％，则判定该项合格。