药物对肝药酶的诱导作用实验报告

药物对肝药酶的诱导作用实验报告 肝药酶诱导剂对药物作用的影响 肝药酶诱导剂对药物作用的影响 【目的】 以在苯巴比妥钠处理过的小鼠身上戊巴比妥钠的作用显著减弱为例，了解肝药酶诱导剂对某些药物作用的影响。 【原理】 苯巴比妥钠为肝药酶诱导剂，连续使用可使肝药酶数量增加或者活性增强，从而使戊巴比妥钠的代谢速度加快而作用减慢。 【材料】 1. 动物 昆明种小鼠16只，体重18-22g 2. 药品 生理盐水 5mg/ml苯巴比妥钠溶液 3mg/ml戊巴比妥钠溶液 3. 器材:天平，注射器 【方法】 1. 将12只小鼠随机分为甲乙两组，实验前3天，每24h给甲组小鼠腹腔注射苯巴比妥钠0.1ml/10g(50mg/kg),连续三次，乙组注射等量生理盐水。 2. 实验时两组分别腹腔注射戊巴比妥钠0.12ml/10g，观察小鼠反应 【实验结果】 1. 计算各组小鼠催眠潜伏期及睡眠时间的平均值和偏差，并进行组间对照，t检验; 2. 根据实验结果说明苯巴比妥钠对肝药酶的诱导作用 3. 记录每组内动物翻正时间的分别，看其是否符合正态分布规律 实验发现，给予0.33mg/10g体重的无巴比妥药物时，其麻醉效果不好，剂量偏小。故以后可以调整为40mg/kg体重，效果应该可以的。 篇二:药理学实验 针对药理学有关知识内容与实验课的要求，拟开设以下几个方面的实验: 实验一:药理学实验的基本知识及基本技能训练(4学时) 实验目的与要求:通过实验使学生掌握药理实验有关的动物选择、应用、捉 拿、给药、采血等基本知识及基本技能的训练。 要点: 一、常用动物捉持方法 ? 小鼠捉持 ?家兔捉持 二、常用动物给药方法 ? 小鼠灌胃——;皮下注射——;腹腔注射——;肌肉注射——; 尾静脉注射——; ?家兔灌胃——;耳缘静脉给药——; 三、常用动物取血方法 ? 小鼠后眼眶静脉丛取血——用拇指和食,中指捏住鼠颈部,利用捏紧的压力,使静脉丛淤血.将一特制硬玻璃吸管(约长15cm,前端拉成管壁略厚的毛细管),从内眼角插入眼睑和眼球之间,轻轻香 眼底方向移动，并略加捻转，血即自然顺便玻璃管流出。 ? 眼眶动脉、静脉取血——左手抓住小鼠，拇指和食指尽量将头部皮肤捏紧，使眼球突出，用无钩弯镊将眼球摘除，将鼠倒置，血即流出 1. 小鼠捉持法 以右手捉小鼠尾，将小鼠放于粗糙面上，向后轻拉小鼠尾部，使小鼠固定 于粗糙面上。用左手的拇指、食指和中指捏住小鼠两耳及头部皮肤，无名指、小 指和掌心夹住背部皮肤和尾部，使头部朝上，颈部拉直但不宜过紧，以免窒息(见 图1—1)。 另一种捉持方法是只用左手，先用食指和拇指抓住小鼠尾巴，后用手掌及 小指和无名指夹住其尾部，再以拇指及食指抓住两耳和头部皮肤(见图1—2)。 前者易学，后者便与快速捉拿给药。 图1—1 小鼠的捉拿方法1 图1—2 小鼠的捉拿方法2 2. 小鼠灌胃 以左手捉持小鼠，头部朝上，使其头颈充分拉直。右手拿起装有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，再从舌面紧沿上腭进入食道(见图1—3)如插入正确，灌胃针头容易进入，如遇阻力， 可能插入气管，应退出再插。灌胃液最多不超过0.1ml。 图1—3 小鼠的灌胃法 图1—4 小鼠的皮下注射法 3. 小鼠皮下注射 将小鼠至于铁丝网上，左手抓住小鼠，以拇指扣食指捏起背部皮肤，右手持注射器刺入背部皮下注射药液。(见图1—4)。另一种方法可由两人合作，一 人左手抓住小鼠头部皮肤，右手拉住尾巴，另一人左手捏起背部皮肤，右手持注射器(针头不宜过粗，选用5号或6号针头)将针头刺入背部皮下。旋转注射器出针，否则药液将会从针眼处漏出。 4.小鼠肌肉注射 左手拇指和食指抓住小鼠头部皮肤，小指、无名指和手掌夹住鼠尾及一侧后肢，将针头刺入后肢外侧部肌肉。如两人合作，一人左手抓住小鼠头部皮肤，右手拉住尾巴，另一人持注射器(选用4号或5号针头)。注射量:每腿不宜超过0.2ml。 5(小鼠腹腔注射 左手持小鼠(方法同灌胃)，腹部朝上，头部下斜，右手持注射器(选5号或6号针头)，以10?角从下腹左侧或右侧(避开膀胱)朝头部方向首先刺入皮下，然后再以45?角刺入腹腔，注射药液(见图1—5)。两次进镇，防止漏液:针头与富强的角度不宜太小，否则易进入皮下;正腹部进针，以刺破膀胱;穿刺部委不宜太深或太近于上腹部，避免刺破内脏。常用注射量为0.5ml， 不宜超过1.0ml。 图1—5 小鼠的腹腔注射法 6(小鼠尾静脉注射 将小鼠置特制的铁皮固定器内，露出尾巴，涂搽75%乙醇，使血管扩张。将鼠尾拉直，选择一条扩张最明显的血管，用拇指及中指拉住尾尖，使之压迫尾根保持血管充血扩张，用4号注射针头以约,,,?角(几乎平行)刺入尾静脉内，缓缓将药液注入(见图1—6)。如针头没有插入静脉内，推入药液有阻力多，而且局部辩白。此为注入皮下的表现，应重新穿刺。因此，为静脉注射时，必须从近尾端静脉开始，这样可以重复注射数次，以便失败后可在第一次穿刺点的上方重新进行，小鼠尾静脉注射的药液量一般为0.2,1.0ml。 图1—6 小鼠的尾静脉注射法 家兔的捉持和给药方法 1、捉持 一手抓紧背部皮肤，轻轻将兔提起，另一手托住臀部，使兔成坐位姿势(见图1—7)。 图1—7 兔捉持方法 1、2、3均为不正确的捉兔方法，1可损伤两肾脏;2可造成皮下内出血;3可损伤两耳; 4、5均为正确的捉持方法，颈后部皮较厚，可以抓，并用手托住兔体。 将兔仰卧，一手抓住颈部皮肤，另一手顺其腹部摸至膝关节。 另一人用绳带捆绑兔的四肢试图腹部向上固定在土手术台上。头部则用兔头固定夹固定。 2、灌胃 将兔固定于兔箱内，用木制开口器由齿列间插入口内，并向内上方转动直至兔舌被淹压出为止，然后将导尿管从开口器中的小孔插入沿上腭后壁轻轻地送 入食道，约15,20cm左右，已达胃部(见图1—8)。注意不能插入气管，可将导尿管的外端侵入水内，观察有无气泡放出。无气泡方能注入药液，药液推完后再注入4,5ml水或少许空气，以便将导尿管中的药液全部推至胃中。而后将导尿管迅速拔出，否则水可由导尿管中滴至气管内。 图1—8 家兔的灌胃法 3、静脉注射 将兔头固定于兔箱内，先拔去耳背面外侧静脉处的毛(便于认清静脉)，然后用左手拇指和中指捏住耳尖部，食指点在兔耳注射处下面。右手持注射器(选用6号针头)，先耳尖端开始注射，约以5?角刺入，刺入后用左手拇指、食指及中指捏住针头接头处及兔耳加以固定，以防突然挣扎时针尖脱出血管(见图1—9)。注射时，注意不能有气泡注入，否则兔将立即死亡。常用注射量为10ml以上)，应缓缓注射药液。如插入血管，药液推入容易，如插在血管外，则有丘状突起，应拔出针头，在近心端重新注射。针头拔出时必须用棉球压住注射部位以防出血。 篇三:大学药理学实验(附答案) 实验题目: 小鼠腹腔注射筒箭毒碱ED50的测定 Determination of Cl-Tubocurarine's Median Effective Dose (ED50) 【实验目的】 了解ED50的测定方法、原理、计算过程与意义。 【相关理论】 1(关于量反应，质反应: 量反应是指个体上反应的强度并以数量的分级来表示;例如:血压、尿量等。 质反应是指群体中所观察到的某一效应的出现;如:生死、有效或无效。以阳性反应的出现频率或百分数来表示(全或无，阳性率)。 2(关于ED50，LD50，以及治疗指数: 能使群体中有半数个体出现某一效应的剂量，称为半数效应量，若此效应为有效，则为半数有效量ED50，ED50是质反应的参数。若此效应为死亡时，则为半数致死量LD50。 治疗指数= LD50/ ED50=TI，该值越大越好，说明药物越安全. 可用机率单位正规法或点斜法求出LD1 ，ED99 ;LD5 ，ED95。 3(肌松药分为去极化型和非去极化型两种。 去极化型肌松药的代表为琥珀酰胆碱，其肌松作用不能被抗胆碱酯酶药新斯的明拮抗，反而会加重。 非去极化型肌松药的代表为筒箭毒碱，其肌松作用能被新斯的 明解救。 4(测定ED50，LD50的意义 可计算治疗指数TI(LD50/ ED50)，为临床安全用药提供指导。 【实验动物】 小鼠(昆明种KM)，雌雄各半。 【实验器材】 铁丝网，铁架台，天平，注射器等。 【实验方法】 应用点斜法测定ED50。 应用该方法测定ED50时，实验设计必须符合以下5点要求: 1)动物以5~8组为宜; 2)每组动物数须一致; 3)各组给药剂量应呈现等比数列; 4)各组给药剂量的公比r = 1.1~1.6; 5)最大剂量(Dmax)组的阳性反应率须?80%，最小剂量(Dmin)组的阳性反应率须?20% 【实验方法】 1(预实验:目的是为了找出符合上述点斜法要求5)的Dmax和Dmin。阳性反应判定标准:20min内小鼠落下3次(注意排除因互相拥挤而落下所造成的假阳性)。 2(确定组数(n)后，根据Dmax和Dmin，计算各组应给予的剂量，Dmax= rn?D min。注意公比r应在上述要求的范围内，即 = 1.1 ~ 1.6。 分别计算出各组应注射的剂量，见下表: Group No. 1 2 3 4 5 6... Dose Dmin r?Dmin r2?Dmin r3?Dmin r4?Dmin Dmax = r5?Dmin … 3(正式实验: a( 筛选小鼠:将小鼠放在铁丝网上，观察10分钟，不掉下来为合格，可以参与实验。此步的目的在于排除假阳性; b( 称重、标记; c( 给药观察:腹腔注射ip筒箭毒碱。每组分别给予相应的剂量。 d( 计算阳性率:阳性反应标准:给药后20分钟内自铁丝网上掉下来3次者 为阳性。 【计算】 小鼠ip筒箭毒碱的ED50是多少,其95%可信区间是多少, 1) lg ED50=Xm-i(?P-0.5) 其中，Xm = lg Dmax ，i =lg r ，?P:阳性率之和 因此，ED50 =lg-1 [Xm-i(?P-0.5)] 2) ED50的95%可信区间 = lg-1 [lg ED50?1.96Sx50]， 其中，Sx50为ED50的标准误:Sx50 = i (?P - ?P2)1/2/(n - 1)，n为各组动物数。 【作图】 对阳性率 - 对数剂量作图。 【思考题】 质反应的量效曲线与量反应的量效曲线有何不同, 答案:如以药物的效应为纵坐标，药物的剂量或浓度为横坐标作图，则得到直方双曲线;如将药物浓度或剂量改用对数值作图，则呈典型的S形曲线，这就是通常所说的量效曲线(图-1)。定量阐明药物的剂量(浓度)与效应之间的关系，有助于了解药物作用的性质，为临床用药提供参考。药理效应是连续增减的量变，可用具体数量或最大反应的百分数表示的，称为量反应，如血压、心率、血糖浓度等，其研究对象为单一的生物单位。如果药理效应表现为反应性质的变化，而不是随着药物剂量或浓度的增减呈连续性量的变化，则称为质反应，其反应只能用全或无、阳性或阴性表示，如存活与死亡、惊厥与不惊厥等，其研究对象为一个群体。如果用累加阳性率与对数剂量(或浓度)作图，也呈典型的对称S形量效曲 线 (图-2)。 附: 1、记录表格示例1(每组用) No. Weight of body (g) Volume of injection (ml) Time: injection Time:end of observation Times of falling down +/-2、记录表格示例2(合计): 注:N:每组动物数;P%:阳性反应率。 实验题目: 苯巴比妥钠和放线菌素D对小鼠肝脏细胞色素P450含量的影响 Influence of Phenobarbital Sodium and Actimycin D on the Hepatic Cytochrome P-450 Content in Mice