临床医学毕业论文猫豆非左旋多巴组分镇静催眠作用研究

临床医学毕业论文猫豆非左旋多巴组分镇静催眠作用研究 X X 大学 毕业论文 猫豆非左旋多巴组分镇静催眠作用研究 姓 名:__________ 2014年6月25日 猫豆非左旋多巴组分镇静催眠作用研究 作者:黄增琼，许小林，赖术，韦健全，黄健，潘勇 【摘要】 目的 研究猫豆中的非左旋多巴组分镇静催眠和抗惊厥作用， 为猫豆的综合利用奠定基础。 采用小鼠自主活动法、戊巴比妥钠阈下剂量 催眠实验法、延长戊巴比妥钠睡眠时间法和抗硝酸士的宁致惊厥实验法，观察猫 豆中非左旋多巴组分的镇静催眠和抗惊厥作用。结果 猫豆非左旋多巴组分在 750mg/kg和1 000mg/kg剂量能减少小鼠活动路程(P,0.01或P0.05);1 000mg/kg 和1 250mg/kg能增加阈下剂量戊巴比妥钠入睡小鼠只数(P,0.05)，延长戊巴比 妥钠睡眠时间(P,0.05或P0.01);1 250mg/kg能延长小鼠发生惊厥的潜伏期和死 亡时间(P,0.05)。结论 猫豆中非左旋多巴组分具有一定的镇静催眠和抗惊厥作 用。 【关键词】 猫豆;非左旋多巴组分;催眠药和镇静药 Abstract: Objective The goal of this work is to research the sedative-hypnotic and anti-convulsion effects of non-levodopa component extract from the seed of Stizolobium Cochinchinensis, and to provide baseline for its comprehensive utilization. Methods The method of autonomic activities in mice, the sleep time-prolonging test with threshold dosage and sub-threshold dosage of pentobarbital sodium were applied for sedative-hypnotic tests, the convulsion induced by strychnine nitrate were adopted to study the anti-convulsion effects of non-levodopa component extract from the seed of Stizolobium Cochinchinensis, respectively. Results The results showed that the distance traveled could be obviously reduced when ig non-levodopa component extract 750mg/kg and 1000mg/kg in mice (P0.01 or P0.05). Both 1000mg/kg and 1250mg/kg non-levodopa component extract could increase the number of sleepy mice induced by sub-threshold hypnotic dosage of pentobarbital sodium (P,0.05), and prolong pentobarbital sodium-induced sleep time (P,0.05 or P0.01). 1250mg/kg could prolong latent period and death time of strychnine nitrate-induced convulsion (P, 0.05). Conclusion The non-levodopa component extract from the seed of Stizolobium Cochinchinensis possesses certain sedative-hypnotic and anti-convulsion effects. Key words: the seed of Stizolobium Cochinchinensis; non-levodopa component; hypnotics and sedatives 猫豆又名猫爪豆、狗爪豆、白藜豆，是豆科藜豆属植物龙爪藜豆 ,Stizolobium cochinchinensis (Lour). Tang et Wang,的种子,1,，为药食两用资源植物。猫豆中富含左旋多巴，是提取左旋多巴最主要的原料药材。直接食用猫豆可出现呕吐、头晕、昏迷等中毒症状;提取左旋多巴后的猫豆渣喂猪后表现出一定的镇静催眠作用，提示猫豆中可能含有引起镇静催眠的物质。文献报道，该物质是左旋多巴,2,，也有报道称引起中毒催眠的物质为猫豆毒苷,3,。目前对该物质为何种成分并无统一观点，也没有确凿的药理学理论依据。为此，研究者采用经典的药理学实验方法，对猫豆中的非左旋多巴组分开展镇静催眠和抗惊厥作用研究，为阐明猫豆的药理活性提供可靠的实验依据。 1 实验材料 1.1 药品及试药制备 猫豆采自百色市田东县，经右江民族医学院附属医院刘春荣副主任中药师 鉴定。猫豆干燥后粉碎，用盐酸渗漉提取，过滤，过,717强碱性阴离子树脂柱 去除左旋多巴，氨水洗脱，收集洗脱液，减压浓缩至干，得到非左旋多巴组分样品。经HPLC，样品不含左旋多巴。化学鉴别实验结果表明该组分为生物碱类化合物。样品临用前用蒸馏水配制，并调节pH至中性。戊巴比妥钠:东京化 成工业株式会社出品;地西泮片:上海医药集团有限公司信宜制药总厂出品;硝 酸士的宁注射液:上海禾丰制药有限公司出品。 1.2 动物 清洁级昆明种小鼠，体重18,22g，雌雄各半。由广西医科大学实验动物中心提供。实验动物许可证号:SYKG桂2003,0005。 1.3 仪器 DigBehv-CPP动物行为系统,条件性位置偏爱视频分析系统，上海吉量软件科技有限公司。 2 方法 2.1 对小鼠自主活动的影响,4, 取小鼠50只，随机分成5组，即空白对照组(蒸馏水10ml/kg)，阳性对照组(安定1mg/kg)，非左旋多巴组分大、中、小剂量组(1 250、1 000、750mg/kg)。给药前把各小鼠投入动物行为分析系统活动箱中适应5min，记录2min的小鼠活动路程和穿梭次数。后各组小鼠分别灌胃给药1次。给药60min后，同法测定小鼠活动路程和穿梭次数。 2.2 对戊巴比妥钠阈下催眠剂量小鼠入睡率的影响,5, 动物分组及给药同2.1项。给药30min后，各组小鼠分别腹腔注射30mg/kg戊巴比妥钠，以注射戊巴比妥钠后15min内小鼠翻正反射消失达1min以上为入睡指标，记录各组入睡小鼠的只数及睡眠时间。 2.3 延长戊巴比妥钠睡眠时间的作用,5, 动物分组及给药同2.1项。给药60min后，各组小鼠分别腹腔注射戊巴比妥钠40mg/kg，以注射戊巴比妥钠后15 min内小鼠翻正反射消失为睡眠潜伏期，以动物翻正反射消失至恢复为睡眠持续时间，观察并记录各组小鼠睡眠潜伏期和睡眠持续时间。 2.4 对硝酸士的宁致小鼠惊厥作用的影响,5, 取小鼠60只，分组及给药同2.1项。给药60min后，各组小鼠分别皮下注射硝酸士的宁1.5mg/kg，记录惊厥反应的时间、鼠数和死亡时间。 2.5 统计学处理 计量数据采用t检验。计数数据用χ2检验统计分析。 3 结果 3.1 猫豆非左旋多巴组分对小鼠自主活动的影响 见表1。表1 猫豆非左旋多巴组分对小鼠自主活动的影响(略) 表1显示，猫豆非左旋多巴组分小剂量、中剂量可减少小鼠活动路程，与空白对照组比较差异有高度显著性(P,0.01或P,0.05);也能减少小鼠穿梭次数，但与空白对照组比较差异无显著性。表明小剂量和中剂量的非左旋多巴组分对小鼠具有一定镇静作用，其作用较安定组弱。大剂量组与空白对照组比较差异无显著性(P,0.05)。 3.2 猫豆非左旋多巴组分对戊巴比妥钠阈下催眠剂量小鼠入睡率的影响 见表2。表2 猫豆非左旋多巴组分对小鼠戊巴比妥钠阈下催眠剂量的影 响(略) 表2结果表明，猫豆非左旋多巴组分中剂量和大剂量可增加入睡小鼠只数，与空白对照组比较差异有显著性(P均,0.05)，表明中剂量和大剂量非左旋多巴组分对小鼠具有催眠作用。小剂量组与空白对照组比较，差异无显著性。 3.3 猫豆非左旋多巴组分延长戊巴比妥钠睡眠时间的作用 见表3。 表3结果表明，猫豆非左旋多巴组分大剂量组可缩短小鼠入睡潜伏期，中、大剂量组能延长小鼠戊巴比妥钠睡眠时间，与空白对照组比较差异有显著性(P,0.05或P,0.01)，表明非左旋多巴组分中、大剂量有一定催眠作用。表3 猫豆非左旋多巴组分延长小鼠戊巴比妥钠睡眠时间的作用(略) 3.4 猫豆非左旋多巴组分对硝酸士的宁致小鼠惊厥作用的影响 见表4。表4 猫豆非左旋多巴组分对硝酸士的宁致惊厥作用的影响 (略) 表4结果表明，安定组及猫豆非左旋多巴组分各剂量组均不能减少惊厥鼠数，但大剂量非左旋多巴组分可延长小鼠出现惊厥反应的时间和死亡时间，与空白对照组比较差异有显著性(P均,0.05)，与安定组比较差异无显著性。表明非左旋多巴组分大剂量可延缓硝酸士的宁致惊厥发作作用。 4 讨论 猫豆为广西特色药食两用资源植物，其主要药效成分为左旋多巴。从猫豆中提取左旋多巴已经在广西实现工业化生产。为拓展猫豆的用途，综合利用猫豆资源，笔者对猫豆中的非左旋多巴组分进行了镇静催眠和抗惊厥作用的药理活性研究。研究结果表明，猫豆非左旋多巴组分在中、小剂量时，能抑制小鼠自主活动，大剂量作用不如小剂量显著，其产生原因需通过进一步实验，测定相关中枢 神经递质含量才能阐明。增大给药剂量时，该组分能协同戊巴比妥钠的镇静催眠作用;大剂量时不能减少硝酸士的宁致小鼠惊厥的动物数和死亡动物数，但可延长惊厥反应发生的时间和死亡时间。 综上所述，猫豆中含具有镇静催眠作用的化学成分，其镇静催眠和抗惊厥活性较弱，该成分为何种物质需进一步分离和活性追踪才能确定。因此，猫豆的化学成分、药理活性及其镇静催眠作用机制有待进一步深入研究。 【参考文献】 ,1,江苏新医学院.中药大辞典,M,.上海:上海科学技术出版社,1977:1423. ,2,王慧忠,何翠屏.狗爪豆脱毒后作为高蛋白饲料的价值分析,J,.饲料研究,2003(3):27-29. ,3,方克美,杨大明,常俊.急性中毒治疗学,M,.南京:江苏科学技术出版社,2002:301-302. ,4,石世德,周民伟,李建军,等.安可梦口服液镇静催眠作用的实验研究,J,.广东药学院学报,2004,20(6):654-656. ,5,徐淑云,卞如濂,陈修.药理实验方法学,M,.3版.北京:人民卫生出版社,2002:801-814.