线辣椒、小麦间套对线辣椒受光和病毒病感病株率的影响

体外牙胚培养在造牙本质细胞分化研究中的应用 体外牙胚培养在造牙本质细胞分化研究中 的应用 造成许多出血的血管沟道,从这些沟道中移行 的胚细胞可演变为成纤维细胞和软骨细胞.2 月后这些细胞可增生并覆盖骨创.据膝关节的 内窥镜观察,3月后暴露的骨面已玻纤维软骨 重新覆盖口.当然,就TMJ来讲.这些仅是初 步报告,经治病例尚少,其确切疗效尚待进一步 研究证实. 综上可知,TMJ内窥镜已不单纯是一种检 查诊断手段,它已发展成为一种效果良好的治 疗手段口.比起开放性的关节切开术,它具有 创伤小,不暴露切开关节腔,基率不破坏关节的 整体构筑,面部不留切口癜痕等优点.患者更易 接受,它使TMJ关节手术治疗发生了一场革 命.尽管就现有的条件和经验看,它还不能代替 TMJ关节开放性囊内手术治疗某些严重的 TMJ关节病.然而可以预见,随着器械的不断 改进和完善以及治疗技术方法的简化与成熟, 它必将在临床得到更加广泛而有效地应用. 4参考文献 1AmericanAsfscchfion00andM~illofac?hiSur- gcom|AdJscu~aionofl~endficeraofazubxo- sc0psurgeryofthetemporommdibularjointt1991 2NitzanD,DNwkkMF.HeftM.JOzMaxJliofe~ Surg.i990I48f7)I798 3S日nd岫B.0ML,dllofacSurgCOnNoahAm. , /7 4Ohai~M.JJp.1Soc删.1989I1(1)l1 5Ild哪?(hdsuOnaMedPathe1.1986}62 (4)l361 6IsradH,Roser&JOzalMaxillof=SmX.1989l47 (5)|570- 7LudreaanotJMImllofec&q.19891I47(4)I 439 8PiperM,ChuongR.(a~act)JOralMaxlJlo~c Surg?1987I45(1)t143 9Ga~erM.G~eneC,r_啪E,eteL.JCraniomand DisFacbJOralPsin,1989}3(2)Ii91 10OhmshlM.OralMaxillo~cSurgClinNm-thAm. i989’1(1);154 11krH.JOza]MaxiJlofacSurg,1989’47f3)I311 12TaroA.JMaxiliofacSurg.1989j47(3)l353 13TaroA.JMaxili~acSurg.1994I52(3)l362 14MccnJP.PodrmkyAE,zabiegkiNA.JOral MuMSurg-1998l50f5)I568 15OhnL~M,Anhr.6copy,1991I7f2)’212 16MosesJ.PokerI.JOzalMaxlilof~Surg.1989t47 C6)I674 17Montgccne~”M?v趿SkdsJ,HarmsS.鼬-JOral Max~[ofacSurg,i989I47(12)I1263 i8BhustdnD?Hef|髓LOralSurgOza]MedOza] Pa出d,1988I65(2)t135 19lsace~ouG.吨A.J0IIan蜘AS.JOzal MmdltofscSung-1986l44(7);771 20QulnnJH-JOzalM结果午方面对这一模型加以综迷,同时讨论了与曼育中造牙奉质细胞分化相关的细 胞外基质,生长日子和基赢膜午日素. 关键词嚣官培养造牙本质细胞分化 在牙胚的发育过程中,中胚层与外胚层的 相互作用,首先形成牙板,经过营状期,帽状期, 钟状期,硬组织形成期,最后萌出.承担咀嚼功 能.在这一系列的发育过程中,中胚层和外胚层 口 的相互作用.使中胚层的牙乳头细胞分化成造 牙本质细胞.因此体外培养牙胚为研究体外造 牙本质细胞分化提供了非常理想的实验模型. 国外在这一领域的研究已非常深入,不仅成功 地在体外培养了多种动物的牙胚],而且分别 培养了牙乳头细胞和牙囊细胞0].本文就体外 牙胚培养在造牙本质细胞分化研究中的应用作 一 简要综述. 1牙胚发育阶段的确定 为了能够观察中胚层牙乳共细胞分化的关 键过程,确定各种动物牙胚发育时序是牙胚培 养的首要工作.目前小鼠,太鼠,豚鼠,兔子和人 等的牙胚发育时序已比较明确[“. 11小鼠牙胚发育时序[1] 怀孕切牙第一磨牙第二磨牙第三磨牙 天数上颌I下颔上颌I下颌上颔下颌上颔I下颌 10 ll I 122DL DL 13 BB14 15_ Bs l6Bs l “.i_. B l8lOB ;—’OIBs? 19:Bd 20.:.lOBS,_? 21. l—doB? 22. E +D:—o 23_ E+ D一 Pd —? ? E+.卫_? E 附田小鼠牙胚发育时序 DL:牙板}B蕾状期’Bs钟状期}0造牙车质蛔胞’ A连釉虹胞}Pd:前期牙车质{E:牙釉质1D:牙本质 小鼠牙胚发育时序见附状期 18周乳牙造牙本质细胞分泌牙本质基质 造釉器出现功能性造釉细胞 32周恒牙造牙本质细胞分泌牙本质基质 造釉器出现功能性造釉细胞 2体外培养的条件 目前牙胚培养常采用Trowell型培养支 架[】叫.即将微孔滤膜(Millipore)置于不锈钢 金属网架上.牙胚器官在滤膜上培养,培养渡渡 面与滤膜平齐或略微超出,但以不浸没牙胚为 宜.这样使牙胚获得较高的氧分压. 2.1培养液 培养液组成主要有培养基,血清和维生索 等.培养基包括MEM,BGJb.DMEM,PRMI 1640,鸡胚浸渡.血清为1O,2O胎牛血清 (FCS),维生素为50,lSOug/mlVitC. Thelseffc”发现小鼠牙胚在培养渡I(含 MEM,10FCS.Vitc)的培养液中细胞的分 化较培养渡l(含B(;Jb,20FCS,10鸡胚浸 液.Vitc)快.如造釉细胞前体在培养渡I中培 养,l周后出现极化,而在培养渡I中需2周. 培养环境多数学者主张用高氧压的混合气 体(50O:,5CO:,45N:),此环境下有利于 牙胚的发育和分化. 2.2培养方法] 将动物浸入75酒精10s消毒表面,断头 处死,分开上下颁骨,挑破牙胚上方的粘膜,分 离牙胚,太鼠的牙胚约有1/3小水粒大小.体视 显微镜下完整的牙胚呈梨形,外表可见丰富的 血管.若需分离外胚层.则用0.5,l%胰酶 消化20~30m[n,机械分离.培养过程中每2, 3d换液一次. 3培养结果 Thelseff等认为造牙本质细胞的分化主 要与细胞外基质,生长因子和基底膜等因素有 关由于基底膜主要起支架作用细胞外基质和 生长因子附着于基底膜,本文主要讨论细咆外 基质和生长因子及其受体与造牙本质细胞分化 的关系. 3.1细胞外基质与造牙本质细胞分化的关系 细胞刿,基质主要包括糖蛋白,蛋白多糖和 胶原等,细胞外基质与细胞之问的密不可分的 关系,决定了细胞外基质在牙胚的组织细胞分 化中的重要作用. 3.1.1糖蛋白的合成及表达 Thesleff等0在体外培养的17d小鼠下颌 第一磨牙牙胚中可见大量的纤维粘连蛋白 (Fn)沉积在外中胚层交界处,牙乳头细胞Fn 为阳性,而造釉器则为阴性.随后作者又将牙乳 头细胞分离培养,发现单一的乳头细胞可合成 Fn,但并不沉积Fn,认为可能是分泌的Fn与 细胞和基质结合的区域分子构象改变,或是分 泌的蛋白酶将其降解所致. 3.1.2蛋白多糖的合成及表达 Tziafas等观察了氨基多糖对体外培养 的l8,19d胎鼠第一磨牙牙胚的影晌,发现经 过2,4d的培养,完全培养液中加入透明质酸 酶和硫酸软骨素(0.1,0.2mg/m1)可以观察 到体积增大和极化的造牙本质细胞显示有合成 能力,H一胸昔放射自显影证实在开始培养时, 这些细胞已进入了分裂后期,由于没有发现功 能性的造牙本质细胞和造釉细胞,结果提示 细胞基质(HA和ChS)的混合物在低浓度时可 维持造牙本质细胞处于极化状态. Sato等用15d的胎鼠牙胚做体外培养 实验.培养6d后,肝素组中胚层细胞没有进入 分化阶段,而古硫酸软骨紊.硫酸角质酸,透明 质酸及用肝紊亲和层析处理过的血清各组均可 使中胚层细胞分化成造牙本质细胞,并同时分 泌前期牙本质.培养12d时,肝素组的部分细 胞才出现分化,并分泌前期牙本质.免疫组化实 验证明外源性肝素并不能阻止?型胶原,层粘 连蛋白和Fn在基底膜和细胞外的沉积.以上 结果提示外源性肝素延迟造牙本质细胞的分 化. 3.2生长因子及其受体与牙胚发育和造牙本 质细胞分化的荧_柰 目前发现许多生长因子家族在牙胚的发育 和分化中起着重要作用.这些生长因子有转化 生长因子家族,成纤维细胞生长因子(FGF)家 族,血小板源性生长因子(PDGF)家族,胰岛紊 样生长固子(IGF)家旅等. Chai等cioj观察了PDGF—A及PDGF受体 在胎鼠(E1o,42~44体节)下颌骨发育的效应及 表达.牙齿形成的早期阶段,PDGF—A定位于牙 板,PDGF受体则位于其周围致密的中胚层.进 入蕾状期后,PDGF—A不仅在造釉器而且在周 围致密的中胚层有表达,PL~GF受体仅出现在 中胚曙,培养9d后,PDGF—A的阳性已极弱, 而PDGF受体的阳性强度保持不变.此外,外 源性的PDGF—A(20ng/m1)可使牙胚的体积增 大,并且较对照组(营状期)提前进入帽状期.以 上结果提示:内源性PDGF—A和PDGF受体能 够调节牙齿发育的大小和速度.外源性的 aFGF的实验结果与PDGF-A相似..,aFGF (20ng/m1)也可调节牙齿发育.而表皮生长因 子(20ng/m1)和TGT—均明显使牙胚发育的 体积减小. ? 口 Young等[“对16d胎鼠牙胚在半固体无 血清RPMI(]D有维生素C和视黄酸)培养基上 培养.发现胎牛血清可启动牙胚细胞的分化,而 IGF—I则可使分化加强. 4参考文献 1deA-Dea~tinandm_mUSAICRC? lac,1984#47 2neefII,Panan,mAM,Kuur,~ap.eta1.JD岫t R.l987I66(6)I1107 3WiseGE,u?F,Fe,aArchOralBid,1992I37 (6)I’7l 4Navi=JM,SI|jdC,Pumyasmgh.na1.ArchoralBi— ol?1984’Z9(11)t911 5Br?d’BAIJJ,Itervoe~ThJM,Wok.gemJHM. ,?-27 ArchOralBid..1982’27}831 6LScam~JDentR#,l976#34#353 7T1.P=~Az=zzAM.V?&JokG DBld.l991’l】I229 8h_山D,AmacS,$taubl【A,nlLOralB. 1988I33(1O)I735 9&xtoE,X叫哟哪Y.M?ed_.et.ArchOralBld, ]993l38(2)}145 10ChY,RobbwK,SJavldaHC.JDel~tRes,1994I 73(1)1]79 l1MayoML,B血目P,ChertLJR,札JD吼tRes, 1993’72(1)I110 12MayoML,A”N?ShImIL,c【.JRe=, l994’73(1)#]79 l3Y.ungW,RuchJ,M,etJR#. 1994I73(1)#179 牙臼于彩f『,匝搜 髓室内漂白致牙颈部外吸收的防治 ]f 上海第二医科大学口腔医学院韦曦综述王晓仪审校’ 6/A V摘髓室内漂白可眚巴导致牙颈部外吸幢.有多种防治方法可阻崔} 外吸幢.奉文蟑述了6种防治方法. 包括饿基防渗漏,用过置化矗代用品漂白,过置化直酶分解过置化直. 改变局部pH值,牙颈部拳层和联 合治疗. 关键词牙漂白牙颈部外吸收过置化矗 无髓牙变色的治疗是一个棘手的问题,髓 室内漂白为临床应用较多的一种治疗方法.最 常用的漂白剂是3O过氧化氢液和过硼酸钠, 常用的漂白方法是热催化和诊问漂白(walking bleaching). 自Harrington和Natkin口首次报道髓室内 漂白导致牙颈部外吸收以来相继又有不步报 道0].病因研究认为:漂白时,具有腐蚀性的 30%过氧化氢液,可通过牙本质小管渗漏至颈 部牙周膜,从而引起局部炎症反应.导致外吸 收[];l-,a~O等[提出,约有10的牙齿在釉牙 骨质界(cEJ)处牙釉质和牙骨质不相接,导致 牙本质暴露.漂白剂可使暴露的牙本质变性,并 作为异物而引起局部免疫反应;Kchoe~在体外 实验中发现,髓室内放置漂白剂后,颈部pH值 下降至6.5,而酸性环境将增强破骨细胞的活 动.故认为pH值的变化亦为可能的病因. 随着研究的深入,近年来多数学者提出了 防治外吸收的方法,其中一些防治措施临床证 明有效,另一些方法尚持临床检验. 1做基防渗漏 是否要做保护基目前尚有争议.迄今为止. 在发生外吸收的病例报道中”],漂白前均未 在根管口做基.Lado等口首次提出漂白前应在 相当于龈附着水平上方的根管内做基?Abou— Rass口则相信牙胶尖足以防止漂白剂渗漏.并 要求将牙胶降至唇侧龈附着水平根方2,3 mm以保证牙颈部的漂白.Warren口等将染色 牙做基后漂白.发现无论保护基做于CEJ或其