肾脏纤维化检查正常值

标本采集： 空腹安静状态采血 单独一管（促凝管）4ml-5ml 参考值： 1.血清β2-MG（β2微球蛋白） 0-3mg/L（0.8-2.0）是反映肾小球滤过功能的较好指标 肾小球滤过率（GFR）及肾血流量降低，则血清β2-MG升高。 尿液β2-MG（β2微球蛋白）↑1、是反映近端小管受损的非常灵敏和特异性的指标；2、鉴别上下尿路感染：上尿路感染时，β2-MG明显增高，而下尿路感染则正常。 2.血清hsCRP（C反应蛋白(CRP) ）0-3mg/L是反应炎症的敏感指标 3.血清Cys C （半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白C）肾移植术后肾功能的检测、监测化疗药物对肾功能的损害、诊断肾脏纤维化判断纤维化程度的一个重要指标 1-14岁      0.51-0.95mg/L 14-50岁  男0.63-1.25mg/L 女0.54-1.15mg/L 50岁以上    0.60-1.55mg/L 4.血清HA （血清透明质酸）  0-110ng/ml血清HA浓度的变化 ,对鉴别急、慢性肾病及对肾病综合征与单部位损害的部位和程度 ,反映肾脏的病情变化有重要意义 ,对肾脏疾病诊断具有重要意义 5.血清LN（层粘连蛋白）        0-95ng/ml肝纤维化、肿瘤转移的最新指标 6.血清PCⅢ（血清Ⅲ型前胶原）    0-90ng/ml联合检测血清Ⅲ型前胶元（ＰＣⅢ）、透明质酸（ＨＡ）、层粘连蛋白（ＬＮ）三项指标升高与肝纤维组织增生呈同步性，显示出良好的正相关（Ｐ＜０．０１）结论三项指标的联合检测可极大增加临床诊断 7.血清C-Ⅳ（血清Ⅳ型胶原）       0-85 ng/ml 8.血清TIMP-1（血清组织金属蛋白酶抑制物-1） 53-153pg/ml血清TIMP-1水平反映了慢性肝病肝内炎症和纤维化的一些重要特征，在目前情况下是一种较好的肝脏纤维化无创诊断和随访指标。 肾小管三项，包括尿β2-MG、尿NAG、尿GGT/尿Cr 肾纤维化标记物至少包括ECM成分及其裂解物、ECM代谢相关的酶、纤维化相关细胞因子和其他相关检测等四大类。但实际上，目前尚无真正含义上的血清肾脏纤维化标记物，国内外研究较多的有以下几种，可用作肾脏纤维化的辅助诊断。 ?　1.血清β2-MG ?　2.血清hsCRP ?　3.血清Cys C ?　4.血清HA ?　5.血清LN ?　6.血清PCⅢ ?　7.血清C-lV ?　8.血清TIMP-1 另外，在阻断肾纤维化的过程中，TGF-β，PDGF两项化验指标也是精确了解肾脏纤维化受损程度的重要指标。正常达时能抑制炎症和细胞增生、调节细胞的生长、分化和免疫功能而起正面作用；PDGF能诱导系膜细胞增生(系膜细胞既可产生PDGF，又可被PDGF作用)和肾小管间质纤维化。 血清组织金属蛋白酶抑制物-1（tissueinhibitors of metalloproteinases-I,TIMP-1) 1.血清β2-MG ，2.血清hsCRP，3.血清Cys C ，4.血清HA，5.血清LN，6.血清PCⅢ，7.血清C-lV ，8.血清TIMP-1 及TGF-β（转化生长因子）、PDGF（血小板原性生长因子）、补体等相关检查。该几项检查是针对对肾脏纤维化进展程度的特异性检查项目，一般医疗机构尚未开展。显示患者仍有保守治疗的意义。 血清：层粘连蛋白（LN） Ⅳ型胶原（Ⅳ．C） 甘胆酸（CG） 透明质酸（HA） 脯氨酸肽酶（PLD） 血清Ⅲ型前胶元（ＰＣⅢ）、透明质酸（ＨＡ）、层粘连蛋白（ＬＮ） 人血清层粘蛋白（LN）ELISA定量检测 1. 试剂：（包被板和品需-20℃保存）；其余4℃保存。 ① LN包被板(内有保护液，使用前洗涤2次，剩余-20℃保存！！！) 8孔×12 ② LN标准品：LNstandard (2000ng/ml) 1管 ③ 标准品稀释液：Standard diluents 1瓶 ④ LN酶结合物： LNEnzyme tracer (1.1 ml) 1管 ⑤ 洗涤缓冲液：（10ml），用蒸馏水20倍稀释 1瓶 ⑥ 显色液A / 显色液B（6 ml） 各1瓶 ⑦ 终止液 1瓶     2.操作程序： 步骤内容 操 作 步 骤 条件、时间 ★（试剂配制） 按试剂组成说明操作 ① 加样 标准曲线 H1~A1加【标准品稀释液】 100ul，取【LN标准品】100ul 自H1→B1依次倍比稀释。A1为空白孔（只含稀释液，不加酶！）。 加10 u lLN酶结合物 充分混匀！ 37℃，45min 待测血清 100ul 待测血清 （洗板） PBS（每孔加400ul，摔干） 5次 ②（TMB底物） 显色液A 、显色液B各1滴（或各55ul），振荡混匀。注意：勿显色过重，最高标准品的OD值低于2.5为佳。 室温，5～10min ③（终止反应） 终止液50ul或1滴 20min内测定完毕           3.结果判断：酶标仪A450nm测定。酶标仪定量（设立程序）或电脑软件定量（公司提供软件）。定量范围：15.0—1000.0 ng/ml，小于15.0时按15.0。 4.正常参考值：115.7±17.3ng/ml 5.注意事项：A 包被板在使用前在室温溶解，洗涤2次扣干洗液使用，剩余者于-20℃保存，下次直接使用。 B 为保证检测质量，标准品若不能在1月内使用完，请直接保存在-20℃，反复冻融对不影响实验结果。 C自用户收到试剂开始，酶结合物在4℃保存2月内质量稳定，使用周期长者可于-20℃分装保存。 6.临床意义：肝纤维化、肿瘤转移的最新指标——层粘连蛋白（LN）            o    层粘连蛋白（laminin, LN）是细胞外间质（ECM）中的非胶原糖蛋白，广泛分布于基底膜的透明层，紧贴细胞基底部，与IV型胶原结合形成基底膜的骨架，影响细胞的粘附、运动，调节细胞的生长和分化，并与肝纤维化发生、肿瘤的浸润、转移等有关。肝纤维化时，LN基因过度表达，窦周间质细胞及胆管上皮细胞中的mRNA增加3倍左右，Disse间隙中LN含量增加10倍。因此血清LN含量是反应肝脏纤维组织增生的良好指标。此外，LN合成和沉积大大增加，形成特殊改变“肝窦毛细血管化”，与慢性肝病门脉高压发生有关。癌症转移首先要突破基底膜，因而LN与肿瘤浸润转移有关。 o    正常人血清LN为115.7±17.3微克/毫升，慢肝（中度）＞140微克/毫升，肝硬化＞160微克/毫升。正常人血清中LN浓度较低，肝纤维化时，血清中LN浓度明显升高。其升高程度与慢性肝病肝纤维化程度一致，同时它也反映了肝窦毛细血管化的程度。因为在正常肝组织中，肝窦无LN，但在肝纤维化时，LN和IV型胶原相结合，陈招灾Disse间隙，形成内皮基底膜，从而使肝窦毛细血管化，此既妨碍了肝细胞与肝窦间各种营养物质的交换，又产生门脉高压。所以血清中LN升高程度与门静脉高压程度也是一致的。 o    综上所述，LN血清浓度升高程度不同，反映了肝纤维化的不同程度，当其显著增高时，常提示肝硬化的形成和门脉高压的存在。但血清层粘连蛋白在其他非肝纤维化病人亦有升高，如肝癌、胰腺癌、肾病、糖尿病等，时应引起重视。 肝纤维化四项定量 (ELISA一步法)： 人血清透明质酸（HA） 人血清三型前胶原（PcIII） 人血清四型胶原（IV.C） 人血清层粘蛋白（LN） CKD的分期： 分期 GFR ml·(min· 1．73m2 ) -1 症状 Ⅰ期 正常;GFR≥90,伴有其他慢性肾功能损伤的证据 出现高血压危险性增加 Ⅱ期 轻度异常; GFR 60~89 ,伴有其他慢性肾损伤证据 通常有高血压;甲状旁腺素(PTH)轻度升高 Ⅲ期 中度异常;GFR 30~59 常见高血压,钙吸收减少,磷排出少, 甲状旁腺素升高更显著,脂蛋白代谢发生改变,自发性蛋白摄入减少,肾性贫血,左心室肥厚 Ⅳ期 重度异常; GFR 15~29 述症状更为显著,并出现代谢性酸中毒,高血钾,性欲减退 Ⅴ期 已确定有肾功能衰竭;GFR ＜15或正在接受透析 出现上述所有症状(更加严重),并出现因显著心功能衰竭导致的水钠潴留,食欲减退,呕吐,皮肤瘙痒(没有皮肤病而出现瘙痒)       肾小管三项，包括尿β2-MG、尿NAG、尿GGT/尿Cr 尿β2-MG、 尿液β2-MG（β2微球蛋白）↑1、是反映近端小管受损的非常灵敏和特异性的指标；2、鉴别上下尿路感染：上尿路感染时，β2-MG明显增高，而下尿路感染则正常。 尿NAG 尿路感染进行N—乙酰—B—D—氨基葡萄糖苷酶(NAG)值的测定,上尿路感染的临床符合率为88％,下尿路感染的临床符合率为90％,认为尿NAG酶可作为上、下尿路感染定位诊断的一项指标。尿路感染的诊断,单凭临床症状及中段尿培养细菌计数每毫升尿在10万以上,只能说明是尿路感染,但不能说明是上尿路感染(肾盂肾炎),还是下尿路感染(膀胱炎)。 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.30，N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG)是一种位于溶酶体内的酸性水解酶，相对分子量约有140000。存在于所有组织中，以前列腺和肾近曲小管溶酶体含量最高。NAG有多种同工酶，大多数组织有A和B型同工酶，少数组织含有微量的I、S、P型同工酶[1]。按等电点由大到小的顺序依次为B、I、P、A和S型同工酶。肾组织有A、B、I等3种同工酶，肾组织损伤时主要是尿NAG-B同工酶升高。NAG同工酶由2种亚基组成，α和β。NAG-S由2个α亚基构成，NAG-A由α和β亚基组成，而NAG-B、I、P都只含有β亚基[2～4]。尿中NAG主要来源于肾脏本身，而不是来自血液。 糖尿病患者由于存在持续高血糖使非酶糖酰化速率加快，导致组织缺氧，血液粘滞度增高［1］，同时内皮细胞释放内皮素、P-选择素等血管活性物质［2］，使肾小球毛细血管张力变化，引起肾血流动力学改变，使肾小球处于高滤过状态引起肾损害。本文通过定量检测尿中微量蛋白［包括白蛋白(mAlb),IgG］,N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)，探讨其在糖尿病肾损害中的临床价值。 1 材料与 1.1 检测对象 (1)临床确诊的糖尿病患者152例，其中男85例，女67例，平均年龄43.2±15.5岁。(2)对照组65例，健康献血员。 1.2 尿微量蛋白测定尿微量白蛋白及IgG采用酶免疫法(ELISA)测定，NAG采用终点比色法，试剂盒均由福建太阳生物技术公司提供，严格按说明书操作，各组间采用t检验统计结果。 尿中两种微量蛋白及NAG含量正常参考值上限为:mA1b<19 mg/L,IgG<5.0 mg/L,NAG<18.5 U/L,测定结果高于参考值上限者判断为阳性。 继续阅读