微生物及植物病原学思考题答案

第一章绪论部分（对照思考，不同要点以句号分开，AB示同一问题中的两部分）：A：微生物是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。B：个体小，体积大。吸收多，转化快。生长繁殖快。适应性强，变异频繁。分布广，种类多。真菌（卵虫、根肿菌、黏菌）、原核生物（细菌、支原体、螺原体）、病毒类病毒、线虫、寄生性种子植物、原生动物等。在每个被检查的患病生物上必须存在疑似病原物。这种疑似病原物必须能从寄主上分离得到，并能被纯培养。当把纯培养的疑似病原物接种到健康的感病寄主上以后，寄主必须再次出现病害。在接种和发病的寄主上必须能重新得到相同病原物。列文虎克（1676年荷兰人列文虎克用自制的显微镜观察到了细菌，从而揭示出一个过去从未有人知晓的微生物世界）米奇里（1729年，出版发表了《植物新种属》，人们将这一年作为真菌学的诞生）路易·巴斯德（近代微生物学奠基人，巴斯德始创并首先应用疫苗接种以预防狂犬病、炭疽病等，发明了巴氏消毒法）亚历山大·弗莱明（1928年发现了青霉素）德巴利（植物病理学之父）罗伯特·柯赫（病原细菌学的奠基人）迈耶（1886年证实烟草花叶病病株的汁液具有传染性）伊凡诺夫斯基（1892年，证实烟草花叶病病株的汁液经细菌滤器过滤后仍具有传染性，从而开始了人们对病毒的深入研究）Needham（1743发现了小麦粒线虫这是植物寄生线虫的首次记录）无胞生物域、原核生物域、真核生物域。第二章真菌部分课后题现代真菌涉及生物的那几界？原生动物界、假菌界（藻物界）、真菌界什么是真菌鞭毛的“9+2结构”？在电镜下观察，每根鞭毛的外面有一层膜，膜内有11根纤丝，其中9根较大的周围纤丝包围着2根较细的中心纤丝，每根周围纤丝有2-3根附纤丝，每根中心纤丝有2根附纤丝。真菌营养体有哪些变态？各有什么作用？A、吸器，菌丝产生的一种短小分枝，由活体寄生菌从寄主细胞中吸取养分。B、附着胞，植物病原真菌孢子萌发形成的芽管或菌丝顶端的膨大部分，分泌粘性物质，其下方产生侵染钉穿透寄主角质层和细胞壁。C、匍匐菌丝和假根，假根是根霉属的匍匐茎与基质接触处分化出来的根状结构。伸入基质内吸取养分并固着菌体。D、菌网和菌环（收缩环），捕食性真菌的一些菌丝分枝成具有小环形的网状菌丝，用于捕捉线虫获取养料。真菌的菌组织有哪些类型？各有哪些作用？菌核，菌核是真核的休眠结构。萌发产生菌丝体或从上面形成产孢结构。菌索，寻找、运输和利用营养；抵抗不良条件；休眠；侵入结构。子座，由菌丝体形成，或由菌丝体与寄主组织结合而成的垫状结构，常在其中或上面长出各种无性和有性繁殖结构。真菌无性孢子和有性孢子及产孢结构有哪些？（1）无性孢子：游动孢子、孢囊孢子、分生孢子、厚垣孢子分生孢子的产孢结构：分生孢子梗、分生孢子座、分生孢子盘、分生孢子器（2）有性孢子：卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担孢子真菌的生长有何特点？真菌生长表现为顶端生长；真菌生长于菌丝顶端聚集的泡囊有关。何为同宗配合和异宗配合？同宗配合：单个菌体自身的雌雄器官可以结合，不需要其它菌体就能完成有性生殖。异宗配合：每个菌体都是自交不育的，不管它是否为雌雄同体的，必须有两个不同交配型的菌株交配才能完成有性生殖。真菌和卵菌的主要区别有哪些？区别特征卵菌真菌有性生殖异型配子囊；藏卵器与来自雄器的核配合形成卵孢子有性生殖产生接合孢子、子囊孢子和担孢子营养体的细胞核双倍体单倍体或双核体细胞壁组成β葡聚糖，纤维素几丁质，极少纤维素游动孢子鞭毛类型1根茸鞭：朝前1根尾鞭：向后如果有鞭毛，通常只有1种：向后的尾鞭线粒体管状脊扁平脊准性生殖与有性生殖的主要区别是什么？有性生殖准性生殖核融合在特殊的结构中核融合在营养细胞中，机会很少，难于识别结合子常常只能存在一个核周期结合子的存在可以经过多次有丝分裂借减数分裂而重组，能在所有染色体配对间进行交换，染色体减半借偶尔发生的有丝分裂而重组减数分裂的产物易于识别和分离在营养细胞里发生的重组体，只有用适当的遗传标记才能识别环境条件对真菌的生长和繁殖有哪些影响？温度。根据真菌与温度的关系，分为三类：嗜冷菌、适温菌、嗜热菌光照。可见光对菌丝生长一般影响不大，但可以激发和抑制繁殖结构和孢子的形成；对孢子形成有重要意义；近紫外光（320-400nm）对诱导孢子形成非常有效。水。真菌一般在95%~100%相对湿度条件下生长良好，但在淹没培养中不能形成孢子；孢子的萌发需要水的存在。pH。多数真菌在pH3-9都能生长；植物病原真菌最适为5-6.5；皮肤真菌pH4-10。营养。基本营养：碳源、氮源、矿质元素、生物素、水。一般来说，丰富的营养有利于菌丝体的生长但不利于有性器官的形成。真菌在有性生殖期间所需要的碳源并不一致，比如用双糖或多糖作为碳源比用单糖对生殖更有利；氮源浓度过高抑制孢子形成；一般认为，生殖器官的形成需要高浓度的矿质元素和维生素。植物病原真菌种以下的单元有哪些？如何表示？植物病原菌的种下又划分为变种variety（var）、专化型formaspecialis（f.sp.）和生理小种race及营养体亲和群（vegetativecompatibilitygroup，VCG）。真菌鉴定的主要依据有哪些？形态学鉴定主要依据有：孢子形态（有性孢子和无性孢子的大小、形状、颜色）、产孢结构（孢子梗、子囊壳、担子等产孢结构的大小、形状、颜色等）、菌落形态分子生物鉴定鉴定依据：根据一些保守基因的序列，设计特异性引物，进行PCR扩增和序列分析；依据DNA的多态性，获得分子标记。植物病原真菌的侵染器官是什么？真菌可通过哪些途径侵入植物？侵染器官：（1）附着胞、侵染钉：是主要侵染器官，由孢子萌发产生，可直接侵入；（2）菌丝：自然空口或伤口侵入。侵入途径：（1）直接侵入：直接穿透植物角质层和细胞壁；（2）自然孔口入侵：气孔、皮孔、水孔、柱头、蜜腺等；（3）通过伤口入侵：各类伤口卵菌及主要植病原物卵菌代表属的基本特征、引致病害的特点卵菌基本特征：菌丝体：无隔、二倍体细胞壁：含有纤维素和β-葡聚糖；无性繁殖：产生具双鞭毛的游动孢子，具有茸鞭和尾鞭；有性生殖：产生卵孢子。减数分裂发生在配子产生阶段；生态：多数水生，少数陆生。A、腐霉属基本特征：菌丝无隔，孢子囊形态多样，丝状、裂瓣状、球形或近球形等。孢囊梗无分化。孢子囊顶生、间生或侧生。每一藏卵器上有一个或数个雄器，形成一个卵孢子。引致病害：引起幼苗猝倒、种子腐烂、根茎和瓜果腐烂等。B、疫霉属基本特征：无隔菌丝，游动孢子囊具乳突或无，近球形、梨形、椭圆形。游动孢子从孢子囊中释放。藏卵器内有一个卵孢子。引致病害：可以导致1年生和多年生植物幼苗和观赏植物、多年生果树和林木的不同类型的毁灭性病害。C.霜霉属基本特征：孢囊梗有主轴，顶部2~10次二叉状锐角分枝，末端多尖细。孢子囊卵圆形、无色或淡黄色。卵孢子球形。引致病害：引起多种植物的霜霉病。单轴霉属基本特征：孢囊梗分枝与主枝多呈直角。引致病害：葡萄霜霉病。假霜霉属主要特征：孢囊梗主干单轴分枝，然后作2-3回不完全对称的二叉状锐角分枝，末端尖细。引致病害：古巴假霜霉引起瓜类霜霉病。白锈菌主要特征：孢子囊串生。引致病害：白锈菌引起十字花科植物白锈病。结合菌及主要代表性植物病原属的基本特征、引致病害的特点结合菌主要特征：A、菌丝体：发达、多数无隔多核，少数高等类型有隔B、无性孢子：孢囊孢子，不游动C、有性孢子：接合孢子D、绝大多数为腐生，少数为弱寄生菌根霉属主要特征：菌丝分化出匍匐茎和假根。孢囊梗单生或丛生，与假根对生，顶端着生孢子囊。引致病害：面包霉变和果蔬腐烂等。毛霉属主要特征：菌丝体分化出直立、不分枝或有分枝的孢囊梗，不形成匍匐菌丝和假根。引致病害：引起果实及贮藏器官的腐烂。子囊菌的基本特征有哪些？基本特征：菌丝体：发达、有隔（酵母除外）、单倍体无性孢子：分生孢子有性孢子：典型的一个子囊中有8个子囊孢子腐生、寄生，少部分为美味食用菌植物病原子囊菌代表属的基本特征、引致病害的特点？外囊菌属基本特征：菌丝细胞有2个核。这些细胞可发育成子囊，平行排列在寄主表面，内含8个单核的子囊孢子。子囊孢子在子囊内或外面以芽殖方式产生分生孢子。寄生菌。引致病害：引起核果和林木的叶、花、果实变形。担子菌的基本特征有哪些？菌丝体：发达。具桶孔隔膜、单倍体。有3种类型：（1）初生菌丝（n）：单核担孢子萌发产生次生菌丝（n+n）：两个单核细胞结合，通过锁状联合增加细胞个数。三生菌丝（n+n）：次生菌丝特化后再形成子实体。无性繁殖：不发达。通过芽殖和菌丝断裂的方式产生芽孢子、粉孢子或分生孢子。有性生殖：多数为异宗配合。产生担孢子。担子是完成核配和减数分裂的细胞，从担子上长出担孢子。植物病原担子菌主要代表属的基本特征、引致病害的特点A、柄锈菌属主要特征：冬孢子有柄，双细胞，深褐色，椭圆，棒状至柱状；单生寄生或转主寄生。引致病害：多寄生于禾本科、莎草科及菊科植物。B、胶锈菌属主要特征：冬孢子双细胞，有一长且能胶化的柄。锈孢子器长管状，锈孢子串生，球形，壁有疣。转主寄生，大多缺夏孢子阶段。引致病害：此属锈菌0、I阶段大都侵染蔷薇科仁果类果树和树木，锈孢子侵染圆柏属植物。C、黑粉菌属主要特征：冬孢子堆黑褐色至黑色，成熟时呈粉状。冬孢子散生，表面光滑或有花纹。冬孢子萌发产生有隔膜的先菌丝，其上侧生担孢子或不产生担孢子。引致病害：引起禾本科植物的黑粉病。D、腥黑粉菌属主要特征：冬孢子堆常生于寄主子房内，少数生在营养器官上。植物病原丝分孢子真菌主要代表属的基本特征、引致病害的特点A、青霉属主要特征：分生孢子梗直立，顶端一至多次分枝呈扫帚状，分枝顶端产生瓶状小梗，小梗顶端产生成串的分生孢子，球形。引致病害：引起果实的青霉病。B、曲霉属主要特征：分生孢子梗直立，顶端膨大成圆形或椭圆形，上面着生1~2层放射状分布的瓶状小梗，分生孢子球形，无色或淡色，串生，聚集在梗的顶端呈头状。引致病害：多腐生。引起粮食、食品等的霉变。C、梨孢属主要特征：分生孢子梗无色，细长，不分枝，顶端合轴式产生分生孢子，呈屈膝状。分生孢子梨形，2-3个细胞。引致病害：稻梨孢侵染水稻和多种禾谷类作物和杂草。D、炭疽菌属主要特征：分生孢子盘生于寄主表皮下，盘上有时产生褐色刚毛。孢子梗无色至褐色，具分隔。孢子无色，单胞，长椭圆形或新月形，萌发后产生附着胞。引致病害：引起多种植物炭疽病。E、轮枝孢属主要特征：分生孢子梗直立，分枝，在主轴上有多层轮生、对生或互生的分枝；分枝末端及主枝顶端有瓶状产孢细胞。分生孢子无色或淡色，常聚集成球。引致病害：侵染植物维管束，引起萎蔫病。F、木霉属主要特征：分生孢子梗对生或互生，分枝再形成2级和3级分枝，分枝角度为锐角或近直角，分枝末端轮生或对生瓶状小梗。分生孢子单胞，球形，聚集为孢子球。引致病害：对食用菌生产危害大，污染培养料。作为植物病原菌的生防菌，用于土传病害的生物防治。G、葡萄孢属主要特征：分生孢子梗褐色，有分枝，末端形成膨大的产孢瓶体。分生孢子无色或灰色，单胞，常产生黑色菌核。引致病害：侵染植物的花、叶、果实及贮藏器官，引起坏死和腐烂，称为灰霉病。有益真菌在农业上有哪些利用？（1）、利用真菌的寄生性防治植物病害、虫害、农田杂草；（2）、利用真菌的代谢产物制作杀菌剂、杀虫剂、杀线剂、植物生长调节剂等；（3）、利用共生真菌——菌根菌用于植树造林。第三章细菌部分（对照思考题，不同要点以句号分开，AB表示同一问题中的两部分）：1.A：杆状、球状、螺旋状。B：对细菌进行革兰氏染色。A：革兰氏染色是1884年丹麦医生Gram创建的一种方便细菌染色的方法。B：利用草酸铵结晶紫初染，碘液媒染，95%乙醇脱色，再以沙黄等红色染料进行复染。被染成蓝紫色的细菌称革兰氏阳性菌G+，染成浅红色的称革兰氏阴性菌G-。阳性：细胞壁厚、90%肽聚糖、磷壁酸（协助肽聚糖加厚细胞壁。提高膜结合酶的活力。贮藏磷元素。调节细胞壁的增长。形成革兰氏阳性菌特有的表面抗原。构成噬菌体特有的受体位点。）、分支菌酸、M蛋白、葡萄球菌A蛋白等特殊成分。阴性：细胞壁薄（由外膜和内壁层两层）、脂多糖（是革兰氏阴性菌制毒物质内毒素的物质基础。具有控制某些物质进出细胞的选择性功能。具有较强的负电荷，提高细胞壁的稳定性。作为重要的抗原因子决定了革兰氏阴性菌表面抗原决定簇的多样性。是许多噬菌体吸附的受体。）A:一般结构：细胞壁（固定细胞外形和提高机械强度，保护细菌免受机械损伤和渗透压破坏。屏障保护功能，可阻挡溶菌酶、消化酶等。保障细菌的生长、分裂和鞭毛的着生和运动。决定细菌特定抗原性、致病性和对抗生素及噬菌体的敏感性。）、细胞质膜（选择性控制细胞内外物质的运输。维持细胞正常的渗透压。是原核细胞产生能量的主要场所。鞭毛基体的着生部位。传递信息。）、内膜系统（与真核细胞相比，没有线粒体、叶绿体，但有间体、载色体和羧酶体等内膜系统，提供某些功能所需的更大的表面积。）、细胞质及内含物（是细菌的基本代谢场所，且细胞质是不流动的。）、核区及质粒（是细菌遗传物质的载体。）B：特殊结构：鞭毛（推动细菌的运动）、菌毛（促进细菌的粘附。促使某些细菌缠集在一起在液体表面形成菌膜以获得充足养分。菌毛抗原是许多革兰氏阴性菌的抗原。）、性丝（是革兰氏阴性菌遗传物质接合转移的物质基础。抗药性和毒力因子也可以通过它进行转移。有些致病菌可通过性丝吸附在人体组织上。）、糖被（保护细菌外界物质的侵害。致病作用，使人体等受其侵害。贮藏养料。）、芽孢伴胞晶体及其他(抗热，抗化学药物)原生质体（人为用溶菌酶在等渗溶液中消解细菌细胞壁或用青霉素抑制细胞壁形成所得到的无壁敏感细胞，一般由革兰氏阴性菌组成）、L型细菌（指在实验室或宿主细胞内通过自发突变而形成的遗传性稳定的无壁细菌）、支原体（在长期进化中形成的、适应自然环境的无细胞壁且细胞很小的一类原核生物。）A：菌落（在固体培养基上以母细胞为中心的一团肉眼可见、有一定形态结构特征的子细胞集团）B：放线菌菌落不同于其他菌落的特征（菌落表面致密、呈丝绒状或有皱褶、干燥、不透明、覆有不同颜色的干粉。菌落正反面的颜色常因基内菌丝孢子所产生色素不同而不同。菌落基内菌丝伸入培养基而与培养基紧结合在一起。）A:接合（通过细菌间的接触）、转化（通过裸露的DNA）、转导（需要噬菌体作为媒介）B：接合（性菌毛）、转化（无特殊结构）、转导（无特殊结构参与）A：代表生物16SrRNA或18SrRNA核苷酸序列的同源性。B：古细菌的16SrRNA缺乏作为细菌特征的序列。细胞壁没有胞壁酸。有醚健分支链的膜脂。tRNA的T或TC臂没有胸腺嘧啶。特殊的RNA聚合酶。核糖体的组成和形状也不同。A：深入研究它的形态特征、生理生化特征、遗传特性以及分子生物学特征。B：伯杰氏鉴定细菌手册。伯杰氏系统细菌学手册。国际系统和进化微生物学杂志。形态学特征（大多数植物病原细菌呈杆状）、生态和传播（大多数植物病原细菌在寄主植物上以寄生方式生存。在植物表面上附生生存。在植物残体或土壤中以腐生生存。）、病原细菌在植物上引起的症状（坏死。腐烂。萎焉。畸形。变色。）、植物病原细菌的鉴定（症状识别。室内镜检。分离培养。致病性检测。细菌学性状。分子鉴定技术。）A:Pathovar(致病变种)和Race(小种)依据病原菌在特定植物寄主上的致病表现型而划分。B：Pathovar（当一株或几株细菌能侵染某种植物，而其他同一种类型的菌株不能侵染该植物时，这些具有侵染性的菌株就构成了该类型菌株下的一个致病变种。）Race(指能侵染同一植物的病原物品种，该品种可能不是同一类型。)A：坏死、腐烂、萎焉、畸形、变色。B:坏死（Xanthomonassp.）、腐烂（Erwiniaspp.）、萎焉（Ralstoniaspp.）、畸形（Phytoplasmasp.）、变色（Pseudomonassp.）A：假单胞菌属。罗尔斯通氏菌属。螺原体属。韧皮部细菌属B：支原体属。A:罗尔斯通氏属。韧皮部杆菌属。B：罗（细菌侵入寄主植物的木质部导管，并在里面繁殖移动。干扰水分和营养运输，导致植物上部低垂萎焉以致死亡。）、韧（栖息于植物韧皮部的筛管细胞中，造成寄主植物叶部黄化、萎焉和畸形，有些表现为芽的过度生长和分枝，以及使花器变绿。）微生物农药（微生物杀虫剂。微生物杀菌剂）、微生物肥料（根瘤菌肥料。磷细菌肥料。钾细菌肥料）、元素循环第四章病毒部分病毒：①体型微小，缺乏细胞结构；②基因组只含一中核酸（DNA或RNA）；③依靠自身的核酸进行复制；④缺乏完整的酶和能量系统；⑤严格寄生性的细胞内专性寄生物。类病毒：是一类侵染植物的小的单连环状RNA分子，通常由246-475个核苷酸组成，没有衣壳包被，具有高度的二级结构和自身稳定性，不编码蛋白质和多肽，能够进行自我复制，是最小的具有侵染性的病原物。病毒粒体的形态：球状、杆状、卵圆形、砖形、弹状、丝状、线状等。植物病毒粒体的形态：球形、弹状、丝状、杆状、线状等。病毒主要组分：核衣壳（基本构造）：核酸（RNA,DNA）、衣壳（蛋白质）；包膜（非基本构造）：脂类或脂蛋白构成。类病毒、朊病毒、病毒卫星（卫星病毒与卫星核酸）。植物DNA病毒：单链DNA(ssDNA)、双链DNA(dsDNA);植物RNA病毒：正义RNA、负义RNA、双义RNA和双链RNA。①多聚蛋白策略：病毒整个基因组或部分片段作为一个大的可读框，翻译产生一个大分子量的多聚蛋白，随后多聚蛋白通过病毒自身编码的一个或数个蛋白酶在特异位点上切割产生多个最终的功能蛋白。举例：马铃薯Y病毒属成员，整个基因组编码一个可读框，翻译表达一个约340kDa的多聚蛋白，随后此多聚蛋白被病毒编码的3个蛋白酶切割成10个功能蛋白；②亚基因组RNA（sgRNA）策略：大多数植物病毒采用此策略表达位于正链基因组3’端的基因。sgRNA是在病毒的复制过程中产生的含有一个可读框的RNA分子，与基因组RNA具有共同的3’末端，5’端短于基因组RNA，使得原来在基因组下游的可读框变为位于5’端的可读框而得以表达。当基因组的3’端有几个基因存在时，可能会产生一系列具有共同3’末端的sgRNA。举例：雀麦花叶病毒（BMV）的CP由RNA3通过sgRNA策略表达；③多分体基因组策略：多分体病毒的基因组由2条或多条核酸链组成，每条链编码1-2个蛋白。对于正义ssRNA病毒而言，该策略把基因放在每一个RNA片段的5’端，可以被寄主的蛋白翻译系统表达。举例：呼肠病毒科和双分病毒科；④通读蛋白策略：5’末端基因的终止密码子有可能是渗漏性的，当核糖体翻译5’端ORF（mRNA上第一个开放读框）到其终止密码子时，有一定比例的核糖体继续翻译至下游的另一个终止密码子而产生第二个较长的融合蛋白，这种现象称为“通读”或“终止密码子抑制”，通读形成的蛋白质的N端部分与上游ORF编码的蛋白质序列相同，而C端部分为通读部分；⑤移码策略：从同一个5’端AUG开始产生两个蛋白质的另一个机制是通过在5’端ORF的终止密码子之前发生移码，向5’端或3’端方向移动一个碱基位点，从而继续翻译到下一个终止密码子。①结构蛋白：主要是外壳蛋白：负责包装核酸形成的病毒粒子，此外还参与一些其他功能；②复制酶或参与核酸合成的酶：催化转录、解旋等；③移动蛋白：直接或间接与植物细胞胞间连丝作用，扩大胞间连丝的排阻限，使病毒粒体或基因组进入临近细胞；④蛋白酶：对病毒基因组翻译的多聚蛋白进行切割和加工；⑤与介体传播有关的蛋白：⑥基因沉默抑制子：克服寄主的基因沉默防御反应；⑦其他蛋白。突变、重组、重排、基因重复。①胞内移动；②胞间移动；③长距离移动。①非介体传播：花粉及种子传播、无性繁殖（组培）传播、嫁接传播、机械传播、流水及土壤传播等；②介体传播：昆虫介体、线虫介体、真菌介体10.昆虫、螨类、线虫、真菌、寄生性植物（如菟丝子等）。11.变色、环斑、畸形、坏死、萎蔫。12.①生物学测定：通过测定病毒的寄主范围、侵染寄主后的症状表现及传播方式等生物学特性对病毒进行鉴定；②电子显微镜技术：借助电子显微镜对病毒粒子的形态、大小和表面特征，病毒侵染寄主植物后所引起的细胞超微病理变化特别是产生的内含体的形态结构进行直接的观察鉴定；③血清学鉴定：利用抗体和抗原的特异性反应对病毒进行检测鉴定；④分子生物学技术：在核酸水平上对病毒基因组核酸的类型、结构（单链、双链、线状、环状）、序列进行检测鉴定，常用方法有双链RNA技术、PCR技术、核酸杂交、基因芯片等。13.①正单链RNA病毒：直接作为mRNA；②负单链RNA病毒：以负单链RNA基因组为模板转录产生正单链RNA；③双链RNA病毒：使用病毒粒体内携带的RNA转录酶以基因组dsRNA的负链为模板转录出mRNA；④DNA病毒：由位于寄主细胞核内的依赖于DNA的RNA聚合酶Ⅱ合成，没有病毒编码的复制酶的参与。14.生产疫苗、进行生物防治、提供转基因植物所用的控制元件、作为基因的载体、用于植物功能基因组研究。15.①清除或避开侵染源（毒源）；②控制或避免介体；③保护植物以避免系统性病毒病害的发生。第五章线虫部分（对照思考题，不同要点以句号分开，AB表示同一问中的两部分）：线虫是动物界中仅次于昆虫的第二大类群，约10万至100万种，其中约2万已有鉴定记录。线虫作为模式生物是研究生命现象的重要材料。线虫是动植物的重要病原物。线虫在生态系统中起重要作用。A：体壁和体腔（体壁、角质层、下皮层、肌肉层、体腔）、虫体部分（头部、体部、尾部）、内部结构（消化系统：口腔、食道、肠、直肠、肛门；排泄系统；生殖系统；神经系统）B：植物线虫危害农业作物，成为制约农业生产的重要因素，而腐生线虫可以自由生活。卵、幼虫、成虫3个阶段。外寄生、内寄生、半内寄生3种。A：温度、土壤湿度、渗透压、PH、O2、CO2；B：温度（对线虫有致死低温、适宜温度、致死高温，在致死低温和高温中线虫不能存活，在非致死高温和低温中线虫可存活，但生长发育和繁殖受到抑制。因此，可利用致死高温和低温来防治植物线虫）、土壤湿度（线虫生命活动离不开水，且不同的线虫对失水和饱和水的耐性差异很大。但过于潮湿和干燥的环境对多数线虫不利。因此，可利用潮湿和干燥环境来防治植物线虫）、渗透压（多数植物线虫生活在土壤中，线虫体液渗透势和土壤溶液渗透势之间存在压力势，多数只能忍受近10个大气压下的渗透压，因此，可利用高渗透压使虫体内水分外渗，防止植物线虫）、O2（氧气是植物线虫生长繁殖和其他生命活动的必要条件。当少氧时，线虫只能存活一段时间，有些线虫进入休眠状态。因此，可利用田间漫灌或淹水造成长时间缺氧来防治线虫）、PH（一定的碱性或酸性条件可抑制线虫的孵化，因此，可以通过控制PH来防治植物线虫）、CO2（高浓度CO2使植物线虫活动受到抑制，低浓度对线虫运动有导向作用，因此，可通过控制CO2浓度来防治线虫）A：植物线虫侵染植物导致植物根部和地上部出现症状。根部表现为根腐烂、根结或根瘤、根过度分枝、根尖损伤。地上部分表现为肿大、坏死、腐烂、萎焉、茎干和叶部的扭曲变形以及花器的非正常生长发育。B：机械损伤、食道腺分泌物和其他器官排泄物诱发寄主组织发生病理变化（使植物细胞过度增大、破坏植物体内的细胞结构、刺激或抑制植物细胞分裂）、与其他植物病原物并发植物病害。粒线虫（线虫属垫刃目粒线虫科；寄生叶片与籽粒；使叶茎畸形，籽粒变成虫瘿）、茎线虫（垫刃目粒线虫科茎线虫属；侵染苗、蔓、薯块；腐烂）、短体线虫（垫刃目短体科短体亚科）、孢囊线虫、根结线虫（雌雄异体）、滑刃线虫属等。实验部分2009—2010学年微生物及植物病原学实验一、选择BCABA(更确切的表述是孢囊梗分枝方式)B(也可以用石蜡油代替香柏油；二甲苯的作用：用浸少量二甲苯的擦镜纸擦去镜头上的残余油迹)ACA(放线菌应该是粉状)C二、填空：1、最大量程2、121℃3、160℃4、血球计数板法或涂片计数法（细菌计数常用比浊法来计数）5、0.1％的升汞溶液2％—5％的次氯酸钠溶液75％的乙醇（三个课上老师都讲了，所以填其中两个应该就行了吧）6、平板划线法单个细胞进行培养7、机械摩擦8、细菌（高氏一号培养基用于培养放线菌）9、真菌10、抗原抗体11、盖28℃（我依稀记得应该是标在了盖上，但不是很确定！！）四、识图题:图一：子囊子囊孢子子囊壳图二：分生孢子器分生孢子分生孢子梗图三：分生孢子分生孢子梗图四：游动孢子乳突（图三和图四不是很确定，只是我个人判断，图三应该是链格孢属、图四应该是疫霉属）实验思考题整理：实验二：培养基的制备及灭菌制备培养基的一般程序是什么？称量——溶解——矫正PH值——过滤——分装——灭菌——检验做过本次试验后，你认为在制备培养基时要注意些哪些问题？不同的生物需要不同培养基，注意配方的选取称取要准确，误差不能太大调节适宜培养物生存的ph值及渗透压先将溶液进行分装，再加琼脂粉，防止在为灭菌前培养基已凝固先调ph，再进行定容分装灭菌在微生物学实验操作中有何重要意义？防止培养基中有其他微生物的污染，对其后培养目标物进行干扰，从而影响实验结果为什么有的培养基要调PH？因为微生物对于其生活的ph有一定的要求，调节ph是为了使培养基培养微生物时使其更好地生长。培养基配好后，是否要立即灭菌？需要立即灭菌。因为若不立即灭菌，会有微生物大量生长，消耗培养基中的营养物质，并可能产生有毒物质对目标培养物的生长有不利影响。为什么干热灭菌温度高，反而时间长？因为在湿热条件下，水蒸气导热比干空气要快；水蒸气冷凝变水时有放热过程；水蒸气能够穿透细菌的细胞膜，直接进入细胞内破坏细胞；水蒸气能水解一部分细胞结构，加速导热。因此，湿热条件下比干热条件下灭菌效果好，干热灭菌虽然温度高，但仍需时间较长。实验三：细菌的形态观察及染色分析影响革兰氏染色结果的因素，讨论实验过程中的注意事项。答：媒染时间、脱色时间、菌龄、细菌堆积密度、固定时的温度等媒染时间过短时，不利于结晶紫、碘－碘化钾复合物与细胞的结合，从而影响染色结果。过应该控制媒染时间为60秒左右。脱色时间过短，会使革兰氏阴性菌染成革兰氏阳性，；脱色时间过长，会使革兰氏阳性菌染成革兰氏阴性。因此，应该严格把握时间在30秒以内。菌龄过长，细菌进入稳定期或衰亡期，对革兰氏阳性菌来说，其细胞壁失去保留结晶紫的能力，会显示成阳性；相反，对革兰氏阴性菌来说，菌龄过长，着色力大为减弱。因此，应该使细菌为对数生长期为宜，即18—24小时。细菌堆积密度过高时，会使革兰氏阴性菌大量聚集而呈阳性。因此，涂片时取菌少，涂片薄，使菌体分布均匀。固定时的温度过高时，会破坏细胞的结构，影响染色效果。因此，应控制载玻片的温度在手背上感觉不烫为宜。实验四：分离真菌时，有哪些方法可以避免或减少细菌的污染？（课本第35页）答：在培养基中加入适当浓度的抗生素（如链霉素、青霉素等）可以抑制细菌的生长；在培养基中加入一定的乳酸以抑制细菌的生长。实验七：根据你的实验体会，说明血球计数板计数的误差主要来自哪些方面？答：计数板、血盖片、微量吸管及刻度吸管的规格应符合要求或经过校正；样品的纯度，杂质多必然影响结果；样品稀释的浓度应该适中；样品的分布不均匀，也会影响实验结果。显微测微尺上的刻度大小和放大倍数会影响到测量结果吗？答：理论上应该不影响测量结果，但是在实验时刻度大小会关系到估读，因此还是会有一些影响的。实验八：土壤中线虫的分离机形态观察请描述浅盘法分离土壤线虫的方法；描述植物线虫与腐生（自由生活）线虫的主要区别答：方法：将小筐放入小盆中，并在矿上铺一层纸巾；土样压碎混匀，取100ml体积的土样放入筛子的纸巾上；从筛子与小盆中的缝隙加上水，没过上层土；在室温下静置24小时后，将小盆中的水过500目筛网，用少量清水将筛面上的线虫洗入烧杯中。区别：类型口针食道尾部水中运动腐生线虫没有双胃型或小杆型细长剧烈植物寄生线虫有，且发达滑刃型或垫刃型，且有中食道球较短不剧烈实验九：应用胶体金免疫层析试纸条检测植物病毒病毒免疫测定的方法有哪些？答：酶联免疫吸附测定(ELISA)，斑点免疫结合测定法，组织印迹法，westernblotting，免疫荧光技术，免疫电镜技术，免疫染色标记技术，快速免疫滤纸测定等胶体金免疫层析试纸条检测植物病毒时获得检测线的意义是什么？若：胶体金免疫层析试纸条检测植物病毒时检测线显色，则说明样品抗原遇到标记的抗体后发生相应的抗原抗体反应，从而显色，则说明样品检测为阳性。实验十：有益微生物的利用纯种发酵与传统发酵在无菌操作方面的差别？答：纯种发酵是在成分单一的发酵基质中，仅接入一种微生物，通过对该微生物的培养，得到纯度较高的单一性产物。为使发酵顺利进行，必须保持发酵的始终单菌纯种，要求人工扩大的菌种不得被污染，一旦发现其它菌株出现，便称之为发酵事故。因而对发酵设备和环境要求较高，要有严格的灭菌措施和空气净化系统。传统发酵是以成分复杂的谷物为原料，有多种微生物分泌的酶系参与，水解与发酵混合进行，将原料成分转化成多种风味和营养物质的过程。因此，纯种发酵对无菌要求比较高，要严格无菌条件，否则会造成杂菌的生存。而传统发酵相对来说不太严格，因为几种菌之间相互抗衡。为何选择无抗奶作为酸奶发酵原料？答：无抗奶，即为不含抗生素的牛奶。如若加入有抗生素的牛奶，便会抑制牛奶中细菌的生长，从而抑制了乳酸发酵，故选择无抗奶作为酸奶发酵原料。