【精品文档】高效液相色谱法测定参杞益脑胶囊中Β-细辛醚的含量药学论文_医药学论文_23874
论文范文
题目:高效液相色谱法测定参杞益脑胶
囊中β-细辛醚的含量药学论文_医药学
论文
编辑:小小
【摘要】 目的建立了参杞益脑胶囊中β-细辛醚的高效液相色
谱含量测定
。方法色谱柱为Thermo BDS Hypersil C18 (250
mm×4.6 mm~5 μm),流动相为甲醇-0.1,冰醋酸溶液
,60?40,,柱温35 ?,流速1.0 ml?min-1,检测波长为257
nm。结果β-细辛醚浓度在4.885 , 146.55 μg/ml之间峰面积与
浓度具有良好的线性关系。其高、中、低3种浓度的平均回收率分
别为103.2,~102.1,和100.2,,RSD分别为0.4,~0.3,和
0.7,。结论方法简便灵敏~结果准确可靠~专属性强~可用于参杞
益脑胶囊中石菖蒲的质量控制。
【关键词】 参杞益脑胶囊 β-细辛醚 石菖蒲 高效液相色谱法
Abstract:ObjectiveTo establish a high performance liquid chromatographic method for the determination of β-asarone in Shenqiyinao Capsules. MethodsThe column was Thermo BDS Hypersil C18 (250 mm×4.6 mm~5 μm). The mobile phase was methanol - 0.1% glacial acetic acid solution (60?40) and the temperature of column was 35 ?. The flow rate was 1.0 ml?min-1 and the detection wavelength was 257 nm with external method. ResultsThe linear range of β-asarone was 4.885 , 146.55 μg?ml-1. The average recoveries of β-asarone were 103.2%, 102.1% and 100.2%
with corresponding RSD of 0.4%, 0.3% and 0.7%,respectivery.
ConclusionThe method is simple, sensitive, accurate and can
be used for the determination of Rhizoma Acori Tatarinowii
(RAT) in Shenqiyinao Capsules.
Key words:Shenqiyinao Capsules, β-asarone, Rhizoma
Acori Tatarinowii (RAT), HPLC
参杞益脑胶囊具有补益肝肾~益气养血~健脑益智等功能~适
用于肝肾不足~脑神失养所致的健忘~失眠~多梦~记忆力减退等
症。其处方来源于国家药品监督管理局
~由枸杞子、黄精、白
首乌、石菖蒲、猪脑粉、荷梗、肉苁蓉、郁金、远志(蜜)、骨碎补、
紫苏子(炒)、人参、鹿茸等13味中药组成。现行质量标准中未收载
含量测定项目~目前仅有报道测定参杞益脑胶囊中毛蕊花糖苷的含
量作为肉苁蓉的质量控制,1,。石菖蒲具有化湿开胃~开窍豁痰~
醒神益脑的功能,2,~为其主药之一。而β-细辛醚为石菖蒲的主
要活性成分之一,3,~其在市售的石菖蒲挥发油中的含量占
83.75,,4,。本实验采用高效液相色谱法测定参杞益脑胶囊中
β,细辛醚的含量~为参杞益脑胶囊中石菖蒲的含量提供了质量控
制方法。
1 仪器与试药
Agilent 1100 高效液相色谱仪~配置G1311A 四元泵,G1313A
自动进样器,G1316A 柱温箱,G1315B 二极管阵列(DAD)检测器,
Agilent 化学工作站,Elmasonic S 300H 型超声波清洗器,功率1
500 W,。
甲醇为色谱纯~水为超纯水~其它试剂均为分析纯。β-细辛醚
对照品,广州中医药大学第一附属医院实验中心~按面积归一化法
测定~含量为98.94,,。参杞益脑胶囊,批号:
20060701~20060702~20060703~20060704~20060705~20060801
~20060802~20060803~20060804~20060805 深圳万基药业有限公
司生产并提供,,不含石菖蒲的阴性样品,深圳万基药业有限公司
生产并提供,。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱: Thermo BDS Hypersil C18 (250
mm×4.6 mm~5 μm),流动相:甲醇-0.1,冰醋酸溶液,60?40,,柱温:35 ?,流速1.0 ml?min-1,检测波长为257
nm~进样体积20 μl。在上述色谱条件下β-细辛醚与其它组分能达到基线分离~色谱峰的理论板数为3139~并且石菖蒲阴性样品无干扰~色谱图见图1,3。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取β-细辛醚对照品适量~加甲醇制成每毫升含 β-细辛醚35μg的溶液~摇匀~即得。 2.3 供试品溶液的制备 取本品20粒~求得平均装量~将内容物混合均匀~取本品内容物约0.5 g~精密称定~置50 ml量瓶中~加甲醇约30 ml~超声处理30 min~放冷~用甲醇稀释至刻度~摇匀~滤过~取续滤液~即得。
图1 供试品溶液色谱图,N=3 139~R,2.42,,略, 图2 β-细辛醚对照品溶液色谱图,略,
图3 石菖蒲阴性样品溶液色谱图,略,
2.4 线性关系考察 精密称取β-细辛醚对照品19.54 mg~置20 ml量瓶中~加甲醇溶解并稀释至刻度~摇匀。精密量取
3~3~2~2~2~1 ml分别置20~25~20~50~100~200 ml量瓶中~加甲醇稀释至刻度~摇匀~分别取20 μl按“2.1”项下色谱条件注入液相色谱仪~以峰面积Y为纵坐标~对照品浓度X (μg/ml)为横坐标~进行线性回归。回归方程为:
Y=46.242 4X-42.458 8,r,0.999 9
表明β-细辛醚在4.885,146.55 μg?ml-1浓度范围内具有良好的线性关系。
2.5 重复性实验 取同一批参杞益脑胶囊样品~按“2.3”项下供试品溶液的制备方法制备6份供试品溶液~按上述色谱条件测定~结果RSD为2.2,~结果表明本法重复性良好。
2.6 精密度实验 精密吸取上述供试品溶液20 μl~连续进样6次~按上述色谱条件测定β-细辛醚峰面积~RSD为0.5,。 2.7 稳定性实验 取1份供试品溶液~分别于
0~2~4~6~8~10 h进样20 μl~按上述色谱条件测定β-细辛醚的含量~RSD为0.6%~结果表明供试品溶液在10 h内稳定。
2.8 回收率实验 精密称取已测定含量的样品(批号20060805,含β-细辛醚1.57 mg/粒) 9份 (每种浓度3份~低浓度约0.15 g~中浓度约0.25 g~高浓度约0.70 g)~置50 ml量瓶中~分别精密加入β-细辛醚对照品溶液,0.249 6 mg?ml-1,3~5~15 ml~每种加入量平行操作3份~按“2.3”项下供试品溶液的制备方法~自“加甲醇约30 ml……”操作~各进样20 μl~
色谱图~计算回收率。其高、中、低3种浓度的平均回收率分别为
103.2,~102.1,和100.2,,RSD分别为0.4,~0.3,和0.7,。
结果见表1。
2.9 样品含量测定 取不同批号的样品~分别按“2.3”项下供试品溶液的制备方法制备~测定含量。结果见表2。
表1 回收率实验结果,略,
表2 样品中β-细辛醚的含量测定,略,
*为每粒中含量
3 讨论
3.1 检测波长的选择 采用二极管阵列检测器~在200,400 nm波长范围内检测 β-细辛醚在流动相中的紫外吸收图谱及参考相关文献,5,~选择257 nm为检测波长。
3.2 流动相的选择 考察了不同比例的甲醇-水、乙腈-水及甲醇-0.1,冰醋酸溶液等作为流动相体系~以甲醇-0.1,冰醋酸溶液(60?40)为流动相时效果最好~供试品溶液中β-细辛醚能与其它组分获得基线分离~且主峰符合要求。
3.3 耐用性实验 考察不同厂牌的HPLC仪:Agilent 1100 高效液相色谱仪、岛津LC-2010A高效液相色谱仪,不同厂牌的色谱柱:Thermo BDS Hypersil C18柱~Luna C18柱和LiChrospherR100
RP-18e C18柱~由不同的实验者进行实验~也可得到满意的色谱图~表明本法的耐用性好。
致谢:广州中医药大学第一附属医院实验中心的柯雪红老师为
本实验研究提供了β-细辛醚对照品~在此表示感谢:【参考文献】
,1, 邬晓鸥, 熊 英, 肖丽和. 参杞益脑胶囊中毛蕊花糖苷的HPLC分析,J,.中成药, 2004, 26 (6): 458.
,2, 国家药典委员会. 中国药典~?部,S,.北京:化学工业出版社, 2005:62.
,3, 胡锦官, 顾 健, 王志旺. 石菖蒲及其有效成分对学习记忆的实验研究,J,.中药材, 1999, 22 (11): 584. ,4, 刘春海, 刘西京, 杨华生. 石菖蒲挥发油的GC-MS分析,J,.中医药学刊, 2006, 24 (7): 1280.
,5, 柯雪红~魏 刚~方永奇. HPLC测定石菖蒲药材中β-细辛醚、α-细辛醚的含量,J,.中成药~2002~24(10):791.转贴于