米非司酮和利洛司酮对人早孕绒毛、蜕膜分泌功能的影响

米非司酮和利洛司酮对人早孕绒毛、蜕膜分泌功能的影响 米非司酮和利洛司酮对人早孕绒毛、蜕膜分 泌功能的影响 ?168?生殖医学杂志2006年6月第15卷第3期 米非司酮和利洛司酮对人早孕绒毛,蜕膜 分泌功能的影响 刘芳,于俊荣,樊瑞芹,刘效群,齐惠敏 (河北省计划生育科研所,石家庄050071) 【摘要】目的比较米非司酮和利洛司酮对人早孕绒毛,蜕膜分泌功能的影响.方法用放射免疫法测定体外培养 的人早孕绒毛,蜕膜组织细胞培养液中的人绒毛膜促性腺激素(hCG),孕酮(P),雌二醇(E2),前列腺素F2.(PGF2)的浓度. 结果不同浓度的米非司酮和利洛司酮作用48h后,绒毛和(或)蜕膜组织培养液中hCG,P,E2的水平均明显低于对照组 (P<0.05,P<0.01);PGFzn水平明显增高(P<0.01).利洛司酮作用后,绒毛和(或)蜕膜组织培养液中hCG,E2和P的水 平均低于米非司酮组(P<0.05,P<O.01),PGF2水平高于米非司酮组(P<0.05,P<O.01).hCG,E2和P的水平与米非司 酮和利洛司酮的浓度呈负相关(P<0.Ol,P<O.05),PGF2a的水平与米非司酮和利洛司酮的浓度无明显相关性.结论利 洛司酮和米非司酮均明显抑制离体人早孕绒毛和蜕膜组织细胞的内分泌激素分泌,刺激前列腺素的合成与释放,呈剂量依赖 关系I利洛司酮的作用强于米非司酮. 【关键词】米非司酮;利洛司酮;绒毛;蜕膜;内分泌功能 【中圈分类号]R979.2【文献标识码】A【文章编号]1004—3845(2006)03—0168—04 Effectsofmifepristoneandlilopristoneontheendocrinefunctionofchorionicanddecidualce llsduring earlyhumanpregnancy LJUFang,yUJun—rong,FANRui—qin,LIUXiao--qun,QJHui—min HebeiFamilyPlanningInstitute,Shijiazhuang050071 [Abstract] objective:Toevaluatetheeffectsofantiprogestinmifepristoneandlilopristoneontheendocrinefunc— tionofchorionicanddecidualcellsinvitro. Methods:Decidualandchorionictissueculturesweretreatedwithdifferentconcentrationsofmifepris— toneorlilopristonefor48h,andthelevelsofhCG,progesterone(P)andestradiol(E2)intheculture mediumweredeterminedbyradioimmunoassay. Results.MifepristoneorlilopristoneatvariousconcentrationsusedsignificantlydecreasedthelevelsofhCG.P and(P<0.01toP<O.05)andincreasedthelevelsofPC 汪,2a(P<0.01)inthechorionicanddecidualtissuecul— tures.Thelevelsof}lCG,Pandinthechorionicanddecidualtissueculturestreatedwithlilopristonewerelower thanthosetreatedwithmifepristone(P<0.01toP<O.05)whilePGF2alevelswerehigherthanthosetreated withmifepristone(P<0.01toP<O.05).Therewerenegativecorrelationsbetweenthelevelsof}lCG,P,and theconcentrationofmifepristoneandlilopristone(P<0.01toP<0.05). Conclusions:Theresultsindicatethatmifepristoneandlilopristoneinhibittheendocrinefunctionof chorionicanddecidualtissuesignificantlyandstimulatethesynthesisofprostaglandininadose-dependent manner,andtheeffectoflilopristoneisgreaterthanthatofmifepristone. Keywords:Mifepristone;Lilopristone;Chorion;Decidua;Endocrinefunction (JRe#rodMed2006,15(3)168—171) 【收稿日期】2005一II一09,【修回日期】2006—01—28 【作者简介】刘芳(1965~),女,石家庄人,医学硕士,副主任医师. 生殖医学杂志2006年6月第15卷第3期 米非司酮(mifepristone,RU486)和利洛司酮 (1ilopristone,ZK98,734)均为抗孕酮制剂,具有抗 孕酮和抗糖皮质激素作用,而利洛司酮的抗孕酮活 性大于米非司酮,抗糖皮质激素作用远小于米非司 酮[1],两者均有效终止早孕[2..本实验以体外培养 的人绒毛,蜕膜组织细胞模型,观察比较米非司 酮和利洛司酮对离体人早孕绒毛,蜕膜分泌功能的 影响. 材料与方法 一 ,材料 1.绒毛,蜕膜组织:选择18,36岁,停经? 49D,正常宫内妊娠,身体健康的妇女.近3个月未 哺乳,未应用甾体类激素.自愿采用负压吸引人工 流产术终止妊娠时,无菌收集其绒毛和蜕膜组织. 2.试剂和药品:McCoy'5a培养基干粉(Gibco, 美国),HEPES,谷氨酰胺(Sigma,美国),米非司酮 品(上海市计划生育科研所赠品),利洛司酮 (Scherling,德国),人绒毛膜促性腺激素(hCG),雌 二醇(E.),孕酮(P)药盒(DPC,美国),前列腺素2. F..(PGF2.)药盒(中国协和医科大学基础研究所). 二,实验方法 1.培养液:每1,000mlMcCoy'S5a培养液中 含McCoy's5a培养基干粉12g,NaHCO31.2g, HEPES0.842g,青霉素,链霉素各10万单位,谷胺 酰胺0.29g,pH7.O,7.2. 2.组织细胞培养:无菌收集的绒毛,蜕膜组织 用McCoyS5a培养液洗数次,剔去血块,胎膜,将 组织剪成1mm.小块,再用培养液洗3遍,接种在 涂有鼠尾胶原的24孔培养板中,待组织贴壁后,绒 毛组织中每孔加入1mlMcCoy'S5a培养液,蜕膜 组织中每孔加入1ml含15小牛血清的McCoy's 5a培养液,置于5CO.,37?培养箱.预培养 48h,以排除内源激素,待细胞长满孔后换成无血清 McCoy's5a培养液并分组加药培养. 3.实验分组:对照组:单纯培养液培养;米非司 酮:米非司酮I,II,III,IV组,浓度分别为10,100, 1,000,10,000nmol/L;利洛司酮:利洛司酮I,II, III,IV组,浓度分别为10,100,1,000,10,000 nmol/L.收集加药48h的培养液,一70?保存待 测.每组实验至少重复3次,每个浓度为3个平行 孔. 4.激素测定:采用放射免疫法检测,按药盒说明 书测定培养液中的hCG,E,P及PGF2..各激素 测定均于同一批进行,批内误差均<10. 三,统计学方法 每组实验至少重复3次,以3个以上平行孔测 定值(士s)表示,各组数据采用t检验和相关分析, 资料用SPSS软件处理. 结果 一 ,米非司酮和利洛司酮对绒毛,蜕膜组织细胞 形态学的影响 绒毛和蜕膜组织培养24h后贴壁,周边开始可 见细胞爬出,向外生长,培养48h后组织松散,细胞 连接成片布满培养孔.加药培养48h后,对照组及 用药组的细胞均胞核清晰,胞浆饱满丰富,各组间无 明显差异. 二,米非司酮和利洛司酮对绒毛组织细胞分泌 功能的影响 不同浓度的米非司酮和利洛司酮作用48h后, 绒毛组织培养液中hCG,P的水平均明显低于对照组 (P<0.05,P<0.01),PGF2.水平明显增高(P< 0.01).利洛司酮作用后,绒毛组织培养液中hCG和 P的水平均低于米非司酮组(P<0.05,P<O.01), PGF2.水平高于米非司酮组(P<0.05,P<0.01). 用药48h后,各组的E2均降至不可测量水平. 绒毛组织培养液中hCG和P的水平与米非司 酮和利洛司酮的浓度呈负相关(分别为rl一 一 0.966,P<0.05;r2一一0.993,P<0.01;r3一 一 0.956,P<0.05;r4一一0.986,P<0.05.rl, r2分别代表hCG与米非司酮,利洛司酮浓度之间 的相关系数,r3,r4分别代表P与米非司酮,利洛司 酮的浓度之间的相关系数),PGF2.的水平与米非司 酮和利洛司酮的浓度无明显相关性(表1). 三,利洛司酮和米非司酮对人早孕蜕膜分泌功 能的影响 米非司酮和利洛司酮作用48h后,蜕膜组织培 养液中E.和P的水平均明显低于对照组 (P<0.05,P<O.01),P水平降至不可测量水平; PGF2.水平明显增高(P<0.01).利洛司酮作用 后,蜕膜组织培养液中E.的水平低于米非司酮组 (P<0.05),PGF2.水平高于米非司酮组(P< 0.05.P<0.01). 生殖医学杂志2006年6月第15卷第3期 表1利洛司酮和米非司酮对人早孕绒毛组织细胞分泌功能的影响(士s) 注:与对照组比较,'P<O.05,一P<0.01;与利洛司酮组比较,P<0.05,P<0.01 ?? 培养液中Ez的水平与米非司酮和利洛司酮的 浓度呈负相关(分别为r一一0.975,P<0.05, r=一0.988,P<0.05),PGF2的水平与米非司酮 和利洛司酮的浓度无明显相关性(表2). 表2利洛司酮和米非司酮对人早孕蜕膜 分泌功能的影响(士s) 注:与对照组相比,P<0.05,一P<0.01;与利洛司 酮组相比,P<0.05,P<0.01 讨论 临床应用米非司酮抗早孕时发现,米非司酮可 使血清Ez,P水平降低或上升速率减慢?,明显降 低在体和离体绒毛蜕膜组织中的hCG,E.,P的水 平,增加Ez/P的比值,干扰内分泌激素间的平 衡[5;使早孕绒毛蜕膜组织内源性PGF2增加, PGF2为缩血管物质,对妊娠子宫平滑肌有收缩作 用.其异常增高可致血管收缩,蜕膜组织变性坏死, 继而直接或间接影响绒毛组织的血液供应,导致绒 毛组织内分泌功能及组织结构发生改变[7].本实验 结果进一步表明,米非司酮可直接作用于人早孕绒 毛蜕膜组织,抑制绒毛和(或)蜕膜组织hCG,E.,P 的分泌,刺激PGF2的合成与释放. 利洛司酮和米非司酮同为19去甲基甾体化合 物,在C-11位上均有一个二甲胺基丙基,具有相似 的生物学效应,两者均可与孕酮受体(PR)竞争结 合,阻断P效应,达到止孕目的.其结构差异仅在 与抗糖皮质激素活性强弱有关的C17a取代基不 同,利洛司酮为1一丙烯醇基,米非司酮为1一丙炔基. 利洛司酮这一微小的结构变化,很好的分化了米非 司酮的抗孕激素和抗糖皮质激素作用,改变其生理和生化活性口].Elger等[1证实,利洛司酮的抗孕 激素作用是米非司酮的3倍,抗糖皮质激素作用仅 为米非司酮的1O.此外,利洛司酮与雌雄激素受 体及盐皮质激素受体几乎无亲和力,因此不表现相 应的激素及抗激素效应[g... 动物实验证实,利洛司酮能有效终止早孕[2], 且大剂量单独应用时,完全流产率可达100,而米 非司酮仅达6O左右,此外,利洛司酮致流产时间 也比米非司酮短.利洛司酮在终止早孕时,阴道出 血2,3d后,血浆P明显下降口?.文献[1纠报道, 利洛司酮能抑制未孕子宫内膜PGE.,PGF2的合 成,促进早孕子宫蜕膜PG的合成与释放,抑制其分 解代谢,使局部PG含量增加,发挥止孕作用.利洛 生殖医学杂志2006年6月第15卷第3期 司酮可使早孕大鼠子宫内膜变薄,重量减轻,蜕膜中 腺体发育不良,腺腔分泌物减少,间质细胞分化受抑 制[1引.表明利洛司酮可通过作用于子宫内膜PR, 阻滞蜕膜的正常发育成熟,进而影响胚泡着床与早 孕维持.本实验结果,进一步证实利洛司酮明显抑 制离体人早孕绒毛和蜕膜组织细胞的内分泌激素分 泌,刺激前列腺素的合成与释放,且呈剂量依赖关 系;其作用强于米非司酮. 综上所述,利洛司酮和米非司酮均能降低体外 培养的人早孕绒毛,蜕膜细胞的激素分泌功能并增 加前列腺素合成,推测二者均直接或间接使绒毛,蜕 膜细胞发生退行性改变,致绒毛蜕膜缺血坏死而终 止妊娠.并且利洛司酮的作用大于米非司酮,提示 利洛司酮有望成为一种新型的生育调节剂. 【参考文献】 [1]ElgerW,BeierS,ChwaliszK,eta1.Studyonthemecha— nismsofprogesteroneantagonists[J].SteroidsBoichem, 1986,25(5B):835—845. 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