CD117_c_kit_在人类精液生精细胞中表达研究_cropped

CD117_c_kit_在人类精液生精细胞中达研究_cropped 第 卷 第 # 期 !" 中国现代医学杂志 #$ %& $ ""(!’ %&&" 年 月 ! )*+,- ."/0,-# "1 2"340, 243+5+,4 .-,$ (66& 文 章 编 号 % )& &"5 6*6## #&&"$  &#&65 &4 !,8))9:;5 <=>?在人类精液生精细胞中表达研究 蒋祥龙范立青朱文兵曾亚荣 卢光王秀!!!! 中南大学湘 雅医学院 人 类生殖工程 研究室湖南长沙 ! !"#$$%&$ 摘 要 目 的 从 精 液 中 分 离 和 鉴 定 各 类 生 精 细 胞 探 讨 用 从 精 液 中 分 离 生 精 细 胞 的 可 能 性 方 法% 5 <=> & !;A 对 精 液 中 圆 细 胞 超 过 的 标 本 进 行 联 苯 胺 兰 染 色 排 除 白 细 胞 再 用 改 良 非 连 续 梯 度 离 心 对 生 0@)&BCDEF F!!;!精 细 胞 进 行 分 离 纯 化 结 合 细 胞 形 态 学 荧 光 原 位 杂 交 鉴 别 各 类 生 精 细 胞 的 组 成 运 用 抗 人 单 克 隆 & ’!!8!!9 ,抗 体 对 纯 化 的 细 胞 进 行 免 疫 细 胞 化 学 检 测 结 果 经 分 离 对 分 离 的 细 胞 用 混 合 探 针 进 行 荧 光 " GCD;EF F!H I J 原 位 杂 交 可 对 除 精 原 细 胞 和 初 级 精 母 细 胞 外 的 各 级 生 精 细 胞 进 行 准 确 的 分 类 结 合 形 态 学 分 析 可 确 定 分 !!!离 细 胞 中 生 精 相 关 细 胞 的 组 成 比 例 在 分 离 纯 化 的 圆 细 胞 中 无 核 胞 浆 小 体 占 整 个 细 胞 比 例 为 细 胞 免 疫 化 学 " !%6K"L!研 究 表 明 有 表 达 的 细 胞 占 整 个 总 细 胞 的 比 例 为 且 精 子 也 表 达 在 人 类 精 液 结 论 5 <=> AAK0M5 <=>" 5 <=> !;!;;中 各 级 生 精 细 胞 及 精 子 上 均 表 达 为 从 人 类 精 液 中 分 离 各 类 生 精 细 胞 用 于 临 床 及 科 研 提 供 了 可 能 !" 关 键 词N 生 精 细 胞P ,8!!9:;5 <=>?中 图 分 类 号 文 献 标 识 码 % . 0 *4 % Q "#"$%&’ () "*+%"##,() (- 001 () !./ !2"%3 &"4#4 ,) ’53$) #"3") .789 :+-,;<=",;> ?8 @+ BCD EF, HI9 JK<0",L> @D 9/K,L?@AB7 CD*DE8%"0F 67#8%$&89 (7;"&8,<") O" +P"=-Q4 -3 +34Q+1R -= =P"0QP "1 ;40S 54=P=> -3 T0"G4 +Q" QU4 T"PP+G+=+QR "1 P4T-0-Q+" :,,,,, ^ "1 40S 54=P= 10"S PT40S QU0"U V%%WN5# OU40 "3 54=P= "1 US PT40S "40 %_404 "0QU"< ;/;)(=’()/,/-,[\!]Q"=/+3+,4 PQ-+,43 Q" 4M5=/34 =4/X"5RQ4P> - S"3+1+43 3+P5",Q+,/"/P ‘405"= =54,Q0+1/;-Q+", /P43 Q" P4T-0-Q4 -,3 T/0+1R QU4 P4S+,+140"/P 54=P=Z )"SG+,+,; QU4 54= =S"0TU"=";R> 1=/"04P54,54 +, P+Q/ URG+30+a-Q+", Q" 3+PQ+,;/+PU QU4 5",PQ+Q/" Q+" "1 P4S++140"P 54=P=Z 8Q+ 4ST="R+,; 1=/"04P54,54 +, P+Q/ URG+30+a-Q+", ", QU4 T/0+1+43 54=P= _+QU :bJ S+M43 T0"G4> Q" 5=-PP+1R -= =X+,3P "1 P4S+,+140"/P 54==P 4M54TQ 1"0 PT40S-Q";",+- -,3 T0+S-0R PT40S-Q"5RQ4 4M" -5Q=R$ ?0"S QU4 --=RP+P "1 S"0TU"=";R> QU4 5"PQ+QQ+" 0-Q+" "1 P4S++140"P 04=-Q43 54=P= 5- G4 +3 4Q+1+43$ 8S"; ,,/,,/,,,QU4 P4T-0-Q43 -,3 T/0+1+43 0"/,3 54==P> QU4 5RQ"T=-PS+5 S-PP 5",P+PQP (c$&d> 5 -3 PT40SP 4MT04PP 5 -,3 T0"[+34P Q*4 T"PP+G+=QR+ "1 -TT=R+,; Q*4 P4T-0-Q+", "1 P4S+,+140"/P 54==P Q" Q*4 5=+,+5-= -,3 P5+4,Q+1+5 04P4-05*Z ?"@ A%>#9 40S 54=P=e V%%WN5?@ 混 合 探 针 )a^% 染 色 经 !!材料2 ** 根 据 生 精 过 程 中 各 级 生 精 细 胞 性 染 色 体 变 化 规 原 液混合探针*2*2* 主要试剂34567 789/<= >?@ ,:; 律 !8A- B/6 :4C4=鼠 抗 人 D)**E 单 克 隆 抗 体FG(HII # $精 子 细 胞 所 占 比 例 为 >>@@’KW >>>>’K >@’Pl% 计 数 个 圆 细 胞 PUU KK @K P @@OK!>***>>’’’l’ 山羊 抗鼠 罗丹明 标记# $ B&%I:JFS*2KWX次 级 精 母 细 胞 所 占 比 例 KU2KWX可 确 定 的 !! 仪器 低温离 心机荧光显 微镜22K 87M3N9=**!L"; 生精细胞所 占比例为 性 染 色 体 表 型 为 E2EW @kX!> *2K 精液标本 的圆 细 胞 为 考 虑 到 精 原 细 胞 的 性 染 色 体 表K2KW*X! 精液标本的 检查 标本来 自于我 室 自 愿 损 精 *2K2* 而 其 中 也 有 一 部 分 为 精 原 细 胞 及 初 级 型 为 >@ ! 精 者经 遗传学严格 体检符合 卫生部规定 的捐精者要 !!荧光原位 杂交检测结 果与形态学 检 因此 母细胞 % ! 求 禁 欲 后 手 淫 法 无 菌 留 取 精 液 标 本 液 化 后OP Q !!!测结果基 本一致 %!S# 标 准 进 行 精 液 常 规 分 析 密 度 为 SP 按 RLT’! 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QN3 KLQL>K QY?K 3-bc)-I-I[;II’‘,殖细胞的转 移存活增殖 以有防精原 细胞凋亡等 方 !!CL?KQS?ONQJ>N >Le?>OL OY J>LN JKQ?OPO Q >L?O QL OO S?6E73 ;]dI;[I]Id;I69H7面 都 发 挥 重 大 作 用 E" #&%AFG 等运 用 免 疫 组 ’" AQL?^ 9DDH^ T:119@f 92< 913 ;I.//化 及 受 体 蛋 白 在 大发 现 GIJ?IKL MNO? 分 析 8< =>? !6T7 C#a"g E^ C&%Fh ^ C#a E3 >QMN LMKSOJYKO >L< \8\\\cIId’‘’’鼠小鼠 及人的睾丸 组织生精细 胞及精子均 有表 e?>OL OY KOZLR JKQ?>RJ >L?O OOS?J6E7 3 & CLN E R^ 9DD4^ ’!I;]Id;I[I‘ 69T7TTT:1@f 4H43 达等运 用 组 合 酶 消 化 及 非 连 续!+ "PQRSQK -IK;ON N 6.7 +"#CA #^ _aCC& #^ W"#F- ^ I? 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II其单克隆 抗体也可能 为糖尿病血 管病 期预测指标 #GHCBE JNW JF LQHFCDFBHNL GJDSBCJO 5DCL(U+ 3 9QCDE WJO ?BL> 8228> III变防治 提供一条新 途径 $c7X)4o. )73 j (d+ %&= <> k&$$%% <> ?$$ Z> BC DE3 pJLC5JSNCJHF HM l[]["]["参 考 文 献 &V DEQD DFG J CL 5BDOCJRB RDLONED5 DGBLJ HF W HE BONE BL & F MJ"nII. 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