淋球菌显微镜检查标准操作程序

淋球菌显微镜检查操作程序 黑龙江省性病防治中心(黑龙江省皮肤病防治研究所)实验室标准操作规程 hljsxb(hljspy)-sop-G? 淋球菌显微镜镜检标准操作程序 1. 目的: 淋病是由淋病奈瑟菌感染而引起的一种常见的性传播疾病， 常见的实验室诊断方法主要有显微镜检查法和培养法。 2. 原理: 淋病患者的泌尿生殖道分泌物经涂片染色后，在显微镜下可 见多形核白细胞内有革兰阴性双球菌。 3. 仪器材料: 3.1显微镜 3.2阴道窥器、采样拭子、革兰染色液、载玻片等。 4. 标本采集: 4.1男性尿道分泌物:在取材前2小时内不应排尿，有临床症状患 者可直接蘸取分泌物，无临床症状或疗效观察者，用男性采样拭 子插入尿道3,4cm，轻轻转动并保留10,15秒后取出。 4.2女性宫颈分泌物:先用无菌棉拭子擦去宫颈口外溢分泌物，然 后用女性采样拭子插入宫颈管内1,2cm，轻轻转动，保留20, 30秒后取出。 4.3女性尿道分泌物:用手指插入阴道，抵着耻骨联合并轻轻按摩 尿道口，尿道口出现分泌物时，可用棉拭子蘸取分泌物，若无明 1 黑龙江省性病防治中心(黑龙江省皮肤病防治研究所)实验室标准操作规程 hljsxb(hljspy)-sop-G? 显分泌物，也可用与男性相似的采样方法取材。 5. 操作步骤: 5.1涂片:将拭子在载玻片轻轻滚动涂片。 5.2固定:待涂片在室温中空气自然干燥，涂片经火焰固定。 5.3革兰染色: 5.3.1第一液(结晶紫)染30,60秒，流水冲洗数秒; 5.3.2第二液(碘液)染60秒，水洗; 5.3.3第三液(95%乙醇)脱色30,60秒，水洗; 5.3.4第四液(复红)复染30秒，水洗。 5.4镜检:晾干后的载玻片滴加香柏油，先在低倍镜下找到视野后 转换成油镜观察结果。 6. 结果判读: 6.1淋病奈瑟菌为革兰阴性菌呈红色、肾形，在多形核白细胞的胞 浆中常成对排列，两菌接触面扁平或稍凹。 6.2油镜下观察多形核白细胞内是否存在革兰阴性双球菌。 7. 结果报告: 根据镜下观察报告: 7.1多型核白细胞内找到革兰阴性双球菌。 2 黑龙江省性病防治中心(黑龙江省皮肤病防治研究所)实验室标准操作规程 hljsxb(hljspy)-sop-G? 7.2多型核白细胞内未找到革兰阴性双球菌。 8. 临床意义: 8.1男性淋菌性尿道炎患者的标本，敏感性及特异性高达95%，可 作初步诊断。 8.2不推荐用于女性感染者、亚临床感染者、疗效观察者以及来自 直肠和咽部的标本。 9. 注意事项: 9.1涂片时不要用力涂擦，防止细胞破裂细菌从细胞中逸出。 9.2涂片厚薄要合适，脱色时间要根据涂片厚薄作适当调整。 9.3固定涂片时只要将涂片迅速通过火焰2,3次，以加热的涂片 背面放到手背上感到不烫为宜。 9.4染色后的载玻片用吸水纸吸干水分而不是擦干玻片。 10. 引用文件: 《性病传播疾病实验室诊断技术》(初稿) 3