生远志及其皂苷与蜜远志对家兔离体肠平滑肌运动作用机制的实验研究

生远志及其皂苷与蜜远志对家兔离体肠平滑肌运动作用机制的实验研究 生远志及其皂苷与蜜远志对家兔离体肠平滑肌运动作用机制的实验 研究 生远志及其皂苷与蜜远志对家兔离体肠平滑肌运动作用机制的实验 研究 作者:鲍荟竹 王建 吴晖晖 赵海平 田徽 张媛【关键词】 生远志; 总皂苷;蜜远志;离体肠肌 摘要:目的探讨生远志及其皂苷与蜜 远志对家兔离体十二指肠平滑肌的作用机制。方法采用离体肠肌实 验，用生物机能系统记录生远志及其皂苷与蜜远志对正常肠肌及 工具药乙酰胆碱、组胺、氯化钡所致离体肠肌收缩的影响，采集肠肌 的振幅与频率，计算出各抑制率。结果生远志和远志皂苷均能显着抑 制正常肠肌运动，其抑制率显着高于蜜远志(P,0.01);且生远志与 总皂苷还能显着抑制乙酰胆碱(Ach)、组织胺、氯化钡所致的肠肌收 缩，并与蜜远志相比有极显着差异(P,0.01);蜜远志对正常肠肌和 氯化钡所致的离体肠肌兴奋性收缩也有抑制作用(P,0.05) 。结论生 远志及其所含的总皂苷对家兔离体肠平滑肌运动具有抑制作用;其抑 制机制，可能系其与乙酰胆碱、组胺竞争，阻断M，H1受体以及直接 抑制肠肌兴奋有关，且其抑制作用是不可逆的。蜜远志对正常肠肌运 动有直接抑制作用，但显着小于生远志及其皂苷。 关键词:生远 志; 总皂苷; 蜜远志; 离体肠肌 Experimental Research of Crude Radix Polygalae and its Saponin and Honey-stir-baked Radix Polygalae on the ex vitro Intestine Movement Mechanism to Domestic Rabbit Abstract:ObjectiveTo approach the Crude Radix Polygalae and its saponin and Honey-stir-baked Radix Polygalae mechanism of in vitro intestine movement of domestic rabbit.MethodsUsed the in vitro intestine movement experiment, with the biologic function analyzer to record the influenses on ex-intestines and the intestines which contract were induced by Ach, Histamine and Barium Chloride; Got the ex-intestines amplitude and the frequency, and calculated the inhibition ratio.ResultsCompared with the control, the Crude Radix Polygalae and its saponin could all remarkably inhibit the exintestines‘ movements, the inhibition ratios were remarkably larger than that of Honey-stir-baked Radix Polygalae(P,0.01); and the Crude Radix Polygalae and its saponin could all remarkably inhibit the movements of the intestines which contract were resulted with Ach, Histamine and Barium Chloride; the inhibition ratios were remarkably larger than Honey-stir-baked Radix Polygalae(P,0.01); Honey-stir-baked Radix Polygalae also inhibited the excitability contract with the exintestines and the intestines which contract were induced by the Barium Chloride (P, 0.05).Conclusion?Crude Radix Polygalae and its saponin can inhibit the ex vitro intestine‘s movement of the domestic rabbit;the mechanism is possibly related with two factors, the one is Crude Radix Polygalae and its saponin compete with Ach and Histamine and block M, H1 receptor; the next is direct inhibition of ex vitro intestine excitability, and the inhibitory action is inreversible.?Honey-stir-baked Radix Polygalae can directly inhibit the ex-intestine movement but the inhibitory action is remarkably less than Crude Radix Polygalae and its saponin. Key words:Crude Radix Polygalae; Saponin; Honey-stir-baked Radix Polygalae; Ex vitr intestine 远志系临床常用中药，常用于安神、祛痰、止咳等，但已有文献 中鲜见对其毒性的报道。前期研究发现远志对胃肠运动有明显抑制作 用，毒性较大。同时发现蜜远志对胃肠运动的抑制作用小于生远志， 且毒性较小。基于上述研究结果，该研究拟考察生远志及其皂苷与蜜 远志对家兔离体十二指肠平滑肌运动的影响，以探讨远志抑制胃肠运 动的作用机理。 1 材料与方法 1.1 药材及被检药制备 1.1.1 生远志购于成都市五块石中药材市场，经本校卢先明教授鉴定 为Polygala tenuifolia Willd.的根，系药典载正品药材。 1.1.2 蜂蜜四川南宝蜂产品有限公司出品，产品号:Q/20276901-0。 1.1.3 蜜远志系优化设计，结合急性毒性与胃肠毒性以及相关主要药效学实验，筛选出的最优蜜制远志工艺制备而成，由成都中医药大学炮制教研室提供。 1.1.4 被检药液制备分别称取生远志100 g，等生药量蜜远志119 g(即实际生远志量为100 g，蜂蜜量19 g，合计119 g。其后实验各标示剂量是按原生远志实际含量计算),加入8倍量水,浸泡30 min，煎煮1 h，过滤。重复煎煮3次，合并滤液，浓缩为1?2(即每毫升药液中相当于含原生药2 g)药液，高温灭菌,置冰箱内供实验备用。 1.1.5 远志总皂苷参考相关文献,1,,将生远志粗粉300 g经石油醚脱脂后抽滤，药渣挥干，用95%的乙醇回流提出，趁热抽滤，重复4次，合并滤液，并浓缩至约300 ml，加入3倍量乙醚沉淀，放置过夜，倾去上清液，将沉淀减压干燥，称重，含量为2.21%。 1.2 动物普通健康家兔，体重2~3 kg,由成都中医药大学实验动物中心提供。合格证号:SCXK(川)2004,14。 1.3 药品1×10,5 g/ml氯化乙酰胆碱溶液(上海化学试剂总厂所属上海试剂三厂)、10,氯化钡溶液(成都化学试剂厂)、1×10,5g/ml磷酸组胺溶液(SIGMA公司，批号16H0653)。 1.4 试剂台氏液，配置方法参考相关文献,2,。 1.5 器材HW-400S恒温平滑肌槽(成都泰盟科技有限公司)、BL-420生物机能实验系统(成都泰盟科技有限公司)、压力换能器、手术器械、1 ml可调式移液枪等。 1.6 统计学处理所有数据依据SPSS.0版统计软件进行t检验分析处理。 2 方法与结果 取家兔猛击头部致死，迅速剖腹，取近幽门端十二指肠约10 cm，置于盛有冷台氏液之器皿中，沿肠壁剪去肠系膜，将肠管剪成1.5~2 cm的小段备用。调节恒温平滑肌槽，使水温保持在(37?0.5)?。将压力换能器与BL-420生物机能实验系统连接。取兔肠一段，两端各穿一线，其中一线固定于L型通气管上，放入有50 ml台氏液的浴漕内，固定L型通气管，并调节恒温平滑肌槽，缓慢通入气泡(2个气泡/s)。肠管另一端与压力换能器相连，加1 g负荷，打开BL-420生物机能实验系统，待肠管运动恢复正常后，记录一段肠管正常活动曲线，开始滴加给药。 2.1 给药以及观察记录方法正常肠肌活动?被检药(分别记录生远志、皂苷、蜜远志对正 常肠肌的影响)?正常肠肌活动?工具药(乙酰胆碱、组胺、氯化钡)?被检药(同前)?工具药(同前)。 2.2 给药浓度和剂量被检药所含浓度均为2 g/ml，滴加0.2 ml(即换算成50 ml台氏液浓度为7.97×10-3 g/ml);工具药乙酰胆碱浓度为1×10,5g/ml，氯化 ,5g/ml，各工具药滴加量均为钡浓度为10,，磷酸组胺浓度为10 0.2 ml。