双嘧达莫人体药物动力学及生物等效性研究

双嘧达莫人体药物动力学及生物等效性研究 中南大学 硕士学位论文双嘧达莫人体药物动力学及生物等效性研究 姓名:彭慧 申请学位级别:硕士 专业:药理学 指导教师:李焕德 20040501硕士学位论文 中文摘要 双嘧达莫人体药物动力学及生物等效性研究 摘要一、 目的 研究双嘧达莫缓释胶囊的单剂量及多剂量人体药物动力学参数和生物等效性，为临床合理用药提供参考，为老药新制剂的开发提供试验依据。二、方法,(单剂量给药试验 ,,名男性健康受试者随机分为,、,两组，每组,,人，,组服,,缓释胶囊(每粒,,,,,，共服,粒)，一周后服,,普通片(每片,,,,，共服,片)，,组交叉服药。,,名受试者中，,人因为不良反应退出，,,人完成试验。受试者分别在给药前和给药后,(,,，,(,,，,(,,，,(,，,(,，,(,，,(,，,(,，,(,，,(,，,(,，,,(,，,,(,，,,(,，,,(,小时取肘静脉血,,,置肝素化离心管中，立即离心，分离血浆于,,,?保存。,(多剂量给药试验 由参加单剂量试验的,,名受试者随机分为,、,两组，,组先服缓释胶囊，每天,:,,，,,:,,时各服一粒(,,,,,)，连服至第五日晨，于第,,,日晨,:,,服药前及第,日服药后,(,,，,(,,，,(,,，,(,， ,,(坠堂堡堡兰 ?兰塑墨,(,，,(,，,(,，,(,，,(,，,(,，,(,，,,(,，,,(,,时采血;,组先服普通片，每日,:,,，,,:,,，,,:,,各服两片(,,,,)，连服至第五日晨，于第,—,日晨,:,,服药前及第五日服药后，,(,,，,(,,，,(,,，,(,，,(,，,(,，,(,，,(,，,(,，,(,，,(,小时各取肘静脉血,,,，隔,周后交叉服药。,(生物样本测定方法 ,,,,—,,法测定体内双嘧达莫的血药浓度。三、结果,(生物样本测定 双嘧达莫最低检测浓度为,(,, ,?,,，线性范围,,(,一,,,,(,,,?,„,(,,,(,,, ,)。方法回收率大于,,,，日内、日间,,,均低于,,,(,,,)。,(双嘧达莫单剂量药物动力学 普通片剂中双密达莫的主要药物动力学参数,…为,,,,(,，,,,(,,, ,屯,;,…为,(,?,(,,;,,,,。,,为,,,,(,，,,,,(,,, ,畸,七一;,?为,(,?,(, ,。缓释胶囊中双密达莫的主要药物动力学参数,…为,,,,(,,，,,,(, , ,?,,;,…为,(,?,(, ,:,,,,一，,。为,,,,(,?,,,,(, ，, ,?,?,,: ,,,,为,(,?,(, ,。,(双嘧达莫多剂量药物动力学 普通片剂中双密达莫的主要药物动力学参数,，，。为,(,?,(,,;稳态谷浓度,。。为,,,(,，,,,(, , ,?,,;稳态峰浓度,。…为 ?，硕士学位论文 中文摘要,,,,(,?,,,(, , ,?,,;达峰时间,…为,(,?,(,,;平均血药浓度,。。为,,,(,?,,,(, , ,?,,;波动系数,,为,(,?,(,。缓释胶囊中双密达莫的主要药物动力学参数,，，。为,,(,?,,(,,;稳态谷浓度,。。(…为,,,(,?,,,(, , ,?,一:稳态峰浓度,。。。，为,,,,(,?,,,(, , ,?,,;达峰时间,…为,(,?,(,,;平均血药浓度,。。(。，为,,,(, ,,,,(,, ,?,,;波动系数,,为,(,?,(,。四、结论 双嘧达莫缓释胶囊具有明显的缓释特征，相同成分，相同剂量的缓释胶囊与普通片剂生物等效，其在中国健康人体内的单剂量、多剂量药物动力学与文献报道相似。关键词双嘧达莫， 缓释胶囊， 药物动力学， 生物等效性 硕士学位论文 英文摘要 ,,, ;,,,,;,, ,,,,,,;,,,,,,, ;, ,,, ,,,,？,,,,,,,;, ,, ,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,?,,,, ,, ,,,,, ,,, ,,,,,, ,,, ,,,,,,, ,,,, ,,,,,,;,,,,,,,;, ,,, ,,,,？,,,,,,,;,,, ,,,,,,,,,,,,(,〔,,,,,, ,(,,,,,, ,,,, ,,,, ,, ,,,,,, ,,,;,,,，,, ,,,,,, ,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,, ,,, ,,,,,, ,,,,, ,,;,(,,, ,,,,,值,,,,,),,, ,,,,,,,,,,,, ,,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,(,,,,,),,, ;,,,,,,,,,,, ,,,,,,,(,,,,,),,,,, , ,,,,(,,,,,？,,,;, ,, ,,,,,,,,,,,,,, ,, ,,,,, 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,。，。:,,,(,，,,,(,昭?,,;,,为,(,,，,(,(,,,,,,,，,,, ，, ,,, ,,,,,, ,,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,, ,, ,,, ,,, ,,,,,,,;,,;,,,,;,,,,,,,;, ,,,,, ,,,, ,,,,,,,(,,,, ，, ,,, ,, ,,,, ,,,,？,,,,,,,,(,,, ,,,,, ,,,,,,,,,,,,， ,,,,,,;,,,,,,,;,， ,,,,,,,,,,,,,,,,, ;,,,,,,， ,,,,？,,,,,,,;, ?硕士学位论文 前言 双嘧达莫(,,,,,,,,,,,,，,,)又名双嘧哌胺醇，潘生丁(,,,,,,,,,)，其化学名称为:,，,,，,,,，,,,,吖(,，,,,,哌啶基嘧啶并〔,，,,,〕嘧啶一,，,二基)双次氮基〕一四乙醇。长期以来在临床上成功用于防治心绞痛。因其缺血盗流的副作用曾一度退出临床。然而双嘧达莫除了扩冠脉外，还具有抗血小板聚集的作用，而传统的抗血小板聚集药物阿司匹林易造成胃肠道刺激，故国内目前普遍采用双嘧达莫代替阿司匹林防治血栓的形成和预防心肌梗死复发，或与阿司匹林合用，减少阿司匹林的剂量，又可增强阿司匹林的作用“?“…，它的应用重新得到肯定。所以有必要研究双嘧达莫在中国人体内的药物动力学特征。国外在这方面的研究较多、较早““…。 双嘧达莫作为抗血小板药已研究了几十年，在临床上通常以普通片剂日服,,,次 (,,,,,,,,,次)，需长期服用，,,,个月后效果显著。,。将其制成隔,,,给药,次的缓释制剂可减少用药次数，增加患者依从性，有利于长期治疗。可使血药浓度平稳，避免和减少血药浓度波动，降低毒副作用，增加用药的安全性和有效性。但双嘧达莫溶解度具有较强的,,依赖性，在酸性条件下极易溶(,,?，,,,(,，,,(,,,?,,,)， 而在弱碱性或近中性条件下难溶(,,?，,,,，,(,,,,?,,,)”,。这种特性造成该药在胃肠道内溶出和吸收不、不完全，波动性大，而且易受诸多因素如饮食、胃排空及其它药物的影响。研究表明,,，该药的血药浓度和生物利用度有很大的个体差异性，亦为该药缓释剂型的开发带来很大困难。王文刚等卜“,制成了双嘧达莫缓释微丸，并就其在,,,,,,犬体内的血药浓度、药物动力学及相对生物利用度作了研究，结果,,缓释微丸的生物利用度和药物吸收程度明显优于,,普通片。柏俊，孙备等“”将双嘧达莫与酒石酸按一定比例混合，制成微丸，最后包上控释膜。周莉，平其能等“”研制了一日二次的复方双嘧达莫缓释双层片，研究了释药特性，并与国外制剂比较，阿司匹林发挥速释作用，双嘧达奠发挥缓释作用，维持稳态药效血浓，延长药物作用时间及效果。 选择海南普利制药有限公司生产的阿斯达莫缓释胶囊(每粒含双嘧达奠,,,,,，阿司匹林,,(,,,，批号:,,,,,,)作为受试制剂，其中次要成分阿司匹林为速释部分，主要成分双嘧达奠为缓释部分。产品均经海南普利制药有限公司质检部检验为合格产品，并经海南省药品检验所复核，均为合格产品。试验分两部分组成:阿司匹林的单剂量试验;双嘧达莫的单剂量、多剂量试验。由第一部分试验可知，次要成分阿司匹林吸收速度有差异，吸收程度无差异。研究主要成分双嘧达莫的单剂量、多剂量药物动力学特征，并探讨是否生物等效，是否具有缓释特性。为临床广泛应用该制剂提供理论依据。 , 豪创性声明 本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在本论文中作了明确的说明。 作者签名: 逸望 日期:』生年 三 月丑日 关于学位论文使用授权说明 本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即:学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文酶全部或部分内容，可以复印、缩影或其他手段保存论文;学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。作者签名:丝垫导师签名:地期:一年上月』日 顽士学位论文 符号说明 英文缩写词表,, ,,,,,,,,,,,, 双嘧达莫,, ,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,,, 速释制剂(普通片剂),, ,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,, 缓释制剂,:,,,,,,，,,, ,,,,,,,,,,,,,,;, ,,？,,, ;,,,,,,,,,,,,, 高效液相色谱(电喷雾 ,,,,;,,,,,,,, ,,,,,,,,,,?墙,, ,,,;,,,,,,,, 离子化质谱联用，(, ,,,,,,,, ,,,,,,,, 内标,,,,一(,, ,,,, ,,,,, ,,, ,,,,,, ;,,;,,,,,,,,,,,,,, ,—,,小时血浆药物浓度( ;,,,,,,,—,,, 时间曲线下面积,,,,((。。 ,,,, ,,,,, ,,, ,,,,,, ;,,;,,,,,,,,,,,,,, ,一一时间血浆药物浓度( ,,，?,, ,,,—,,, 时间曲线下面积,,虹 ,,,,,,,,, ,,,,,, ;,,;,,,,,,,,, ,,,,,,,, 一次给药后最高血药浓度,,,, ,,,, ,,,,,,,,, ,,,,, ,,,,,, 达峰时 ;,,;,,,,,,,,,,〕, ,,,,,,,, ,,,, 半衰期,圳(, ,,,,,,,, ,,,,,, , ,,,,,,,,,,,,, 生物利用度校正的表观分 ,,;,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,,,,, 布容积,,用 ;,,,,,,;, ,,,, ,,;,,,,,, 生物利用度校正的清除率 ,, ,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,,, 生物利用度,‰,,, ,,,,,,,, ,,,,,, ,,,,, ,,,,,, 稳态谷浓度 ;,,;,,,,,,,,,,‰,， ,,,,,,, ,,,,,, ,,,,, ,,,,,, 稳态峰浓度 ;,,,,,,,,,,,,,,?,, ,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,, ,,,,, 稳态后的达峰时 ,,,,,, ;,,;,,,,,,,,,,强工, ,,,,,,, ,,,,,, ,,,,, ,,,,,, 平均稳态血药浓度 ,,?,,,,,,,,,,,,蛆 ,嗽,,,,, ,,, ,,,,,, ,,,,, ,,,,,, 稳态时一个给药间隔的血 ;,,;,,,,,,,,,,,,,, ;，?, ,,,—?, 浆药物浓度(时闻曲线下面 积,, ,,,,,, ,,,,,;,,,,,,, 波动度,, ,,,,,,,, ;,,,,,,, 消除速率常数,,, ,,,,,,,, ,,,, ,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,, 精密度,， ;,,,,,,,;, ,,,,,,,, 可信区间 ，,硕士学位论文 方法学第一部分 ,,,,,,,，,,,测定健康人体内血浆中的双嘧达莫 随着双嘧达莫的广泛应用，对其研究也不断增多，国内外已有双嘧达莫血药浓度测定方法【,,„,,,报道，一般多仅采用高效液相色谱法(,,,,)。目前尚未见高效液相色谱一质谱(,玎，,,(,,)联用法测定双嘧达莫的报道。为此，我们建立,,,,(,,，(,,法，测定中国健康人体内血浆中双嘧达莫，用于研究双嘧达莫在中国健康人体内的药物动力学。 ,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,,;,,;,, ,, ， ,,, ,,,,,,,, ,,,,,(,,,, ,,,,,,, ,逅, ;,,,,;,, ,,,,;,,,, ,, ,,,,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,, 材料与方法,(,药品与试剂 受试制剂:阿斯达莫缓释胶囊(每粒含双嘧达莫,,,,,,，阿司匹林,,(,,,，批号,,,,,,)由海南普利制药有限公司提供。参比制剂:双嘧达莫片剂，每片,,,,，批号,,,,,,，山西亚宝药业股份有限公司提供;阿司匹林肠溶片，每片,,,,，批号,,,,,,，石家庄制药集团有限公司提供。试剂:双嘧达奠对照品由海南普利制药有限公司提供，化学结构如图,;内标唑吡坦由湖南省药检所提供，化学结构如图,:乙腈为色谱纯(美国,,,;,,,,,生产);水为本院自制重蒸水。,(,仪器及色谱条件 ,,,,,,公司,,,,型高效液相色谱系统(配备自动进样器)，,,,,,,公司,,质谱检测器，,,,,,,,,,(,质谱工作站。旋涡振荡议(上海第一医学仪器厂)，,,,,,电子分析天平(瑞士,,,,,,, ,,,,,,)，低温超高速离心机(湘仪离心机厂,,,,,)。色谱硕士学位论文 方法学条件: 采用 ,,,,,,,,—,,,,, ,,,,,,,,, ,,,(,,,,色谱柱 (,岬，,(,,,,,,,,,)，柱温,,?;流动相:乙腈:水(含,,,,,,,,(,(,醋酸铵),,,(,:,,(,(,,,);流速,(,,,,?,,,一。质谱条件:电喷雾离子源(,,，)，采用正离子检测方式，毛细管电压,(,,,,，第一级锥体电压,,,，离子源温度,,,”(,，去溶剂温度,,,”,，去溶剂气(,,)流速,,,,?,,， 离子能量,(,,,，扫描方式为选择离子监测(,，,)，用于定量分析监测的离子双密达奠为,,,(, ,,,，唑吡坦(内标)为,,,(,,,,，,,质量扫描范围,,,,,,,,,,,(,,,,)。,(,血药浓度的测定,(,(,工作液的配制 内标工作液:取,(,,,唑毗坦(,,,,,?,。,)于,,,,,,容量瓶中，用乙腈定容至刻度。 ,,标准液:精密称取双嘧达莫对照品，配成浓度为,,,,,?,。,的标准储备液，密闭，,”,冰箱保存。,(,(,血样的预处理 精密吸取离心后的血浆,(,,,,于,(,,,塑料离心管中，精密加入内标工作液,(,,,,，摇匀，旋涡震荡,,,,，,,,,,,,,,,离心,,,,，取上层清液，进样, , ,，进行液相色谱一质谱分析。,(,(,标准曲线的制备 取空白血浆加入,,标准储备液(,,,,,?,,，)适量成,,、,,、,,,,,、,,,(,、,,,,(,、,,,,(,肛,(,“的系列浓度，按上述方法处理进样测定。,(,(,方法回收率及精密度的测定 空白血浆中加入,,标准储备液(,,,,,?,“)适量制成,,(,,,?,一，,,,(,,,?,,，,,,(,岖?,,)的三个浓度的样品，按血样处理方法处理后进样，各浓度日内重复测定,次，并连续测定,日，每目测定,份，计算其方法回收率及日内、日间精密度。 结果,(,色谱图 从标准及样品质量色谱图上可知内标及双嘧达莫的色谱峰形良好，无杂质峰干扰，保留时间分别为,(,,,,,、,(,,,,,，本法具有较高的专属性。空白色谱图、标准品加空白血浆色谱图、志愿者血样色谱图见,,,,一,、,一;、,一,。,(,标准曲线回归方程 将标准曲线测定项下测得的双嘧达莫与唑毗坦峰面积比(,,,,。)对浓度(;)进行 ,硬士学位论文 方法学直线回归，得标准曲线回归方程如下。本试验的线性范围:,,,,,,,, ,?,,,，最低检测浓度为,(,且,?,,。(,,,,;，,)。』“,,,,,(,,,,,,, ,，,(,,,,,，,,,(,,,,(标准曲线见图,),(,方法回收率及精密度的测定 (结果见表,) 双嘧达莫三个浓度的日内、日间,,,皆小于,,,。表明本次试验测试方法符合生物利用度的检测需要。,(,血药浓度测定 应用本文建立的方法，对,,例中国健康男性志愿者，临床治疗剂量双嘧达莫的药物动力学进行了研究。 讨论 中国药典中双嘧达莫片含量测定以紫外分光光度法测定含量偏低，重复性差【,,,。现国内外报道多用高效液相色谱法测定双嘧达莫【,,“,,，检测器均为紫外检测器。本试验建立了反相高效液相色谱一质谱联用法测定双嘧达莫血浆药物浓度的方法，质谱检测器更灵敏、更专属，可利用任一质荷比或多个质荷比的离子信号进行物质的浓度检测，每个物质都有各自的检测通道，因此，不同质荷比物质在液相条件下即使未完全或完全未分离，当通过,,,,,,,，各自通道检测时，均互不干扰，与,,,,比较，提高了方法专属性，缩短测试时间【,,】。 以前报道的双嘧达莫生物样品的预处理方法〔,,，, ,】，操作过程复杂，不但首先需碱化血浆，而且还需萃取，有的还需二次萃取。我们在本文中选用乙腈沉淀来处理血样，既得到了样品分离完全的色谱峰，又简化了操作步骤，减少试验误差。 在选用的色谱条件下，双嘧达莫与内标可完全分离，峰形对称性好，且不受内源性杂质的干扰;在全部受试样品测定过程中，低、中、高三种血浆质控样本,,,,,,,。 结论 该方法的稳定性与重现性好，简便、灵敏、专属性强，完全可以满足双嘧达莫体内药物动力学研究的需要。 堕主堂些堡兰 塑婆兰 ,,,;(,,,,, ,,,,,, ,,,;, ,,,,(,,,),————————,——,——,——?—,——,—?———————————————,—,—;——,—,—,—,—,—,—,——————————————,—,—,—,—,——,—,—,—,———————,——,—,—,—,,,,,—— ,, ,,,(,,?,(,, ,,(,, ,(, ,,, ,,,(,,?,(,, ,(, ,(, ,,, ,,(,,，,(,, ,(, ,(, ，,(,,,,,,,,, ,,引,叫,;,,,,酬,靛 ,,醇,, ,，, ;,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,, 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