[doc] SHR大鼠血压尾套法测定影响因素探讨

[doc] SHR大鼠血压尾套法测定影响因素探讨 SHR大鼠血压尾套法测定影响因素探讨 西北药学杂志2008年4月第23卷第2期 蒸馏水一1:9),加入0.1mL溪黄草受试药液,对照 管加0.1mL生理盐水,置37?振荡温育1.5h,加 入1mL的10g?L三氯乙酸(TCA)终止反应(空 白对照管温育前加入),加入6.5g?L硫代巴比妥 酸(TBA)1.0mL,置沸水浴15rain,冰浴中立即冷却 后,于4?离心10rain(3500r?rain),取上清液 在532nm处测其吸光度(A样品).以加组织匀浆,不 加样品为对照样测其吸光度(A对照),并以用,且 其作用在0.01,1.00g?L-质量浓度范围内随剂量的 3结果与讨论增加作用增强.在质量浓度为1.00g?L时,其抑制 结果(见表1)表明,溪黄草水提取物及乙醇提取率大小为:.肾脏>肝脏>心脏>脾脏>肺脏(见图1). 表1溪黄草提取物对大鼠各离体组织MDA生成的影响(i士s.n=4) 注:无受试药物抑制时各组织匀浆孵育2h后MDA的抑制率为0 0 60 50 意 二40 讳 最30 20 10 0 ‘tq川心j辫,E 大鼠高体维l 图11.00g?L溪黄草水提取物对大鼠 各离体组织的影响比较 4结论 笔者考察了溪黄草水及乙醇提取物对大鼠肝, 心,肾等离体组织脂质过氧化产物产生的抑制作用. 从结果看溪黄草水提取物及乙醇提取物对SD大鼠 离体肾脏,肝脏,心脏,脾脏和肺脏组织都具有很强的 抗脂质过氧化作用,且其效果随质量浓度的增加而加 强,其中以水提取物对.肾脏和肝脏的作用效果最佳, 说明该中草药对机体具有很强的生理活性作用,证实 了民间用该药护肝的科学性,合理性,为溪黄草的开 发利用提供了强有力的科学依据. 参考文献: [1]江苏新医学院.中药大辞典[M]..上海:上海科学 出版社,1977:25. E2]吴剑峰.溪黄草的研究综述[J].时珍国医国药,2003, 14(8):498—500. E3]何照范.保健食品化学及其检测技术EM].北京:中国 轻工业出版社,I998:33,38. E4]段志芳,彭宝玲,林丽莎.溪黄草提取物成分预试及对羟自 由基的清除作用[J].西北药学杂志,2007,22(4):174—176. [5]叶辉,郁建平.老鹰茶中三种黄酮类物质抗脂质过氧化 作用初探[J].中药材,2004,27(2):113-115 (收稿日期:2007—05—18) SHR大鼠血压尾套法测定影响因 素探讨 张燕,王红英,胡艳君,王群立(西安交通大学医学院, 陕西西安710061) 摘要:目的确定尾套法测定大鼠血压的最佳部位,以及 SHR大鼠血压稳定时的时间,为以尾套法测定SHR大鼠血 压试验研究提供依据.采用尾套法测定SD大鼠尾部 由尾根到尾尖的4个不同部位的收缩压(SBP),确定尾部测 定部位;在相同试验条件下,对15周龄的SHR,wKY大鼠进 行连续3个月的血压测量.结果大鼠尾巴中部血压平稳; sHR大鼠第23周血压升至26kPa并趋于稳定,wKY大鼠 血压稳定,波动不大结论采用尾套法应选取尾巴中部作 为测定血压部位;SHR大鼠在23周龄之后适合用于高血压 动物试验,wKY大鼠具有良好的对照性. 关键词:SHR大鼠;收缩压(SBP);尾套法;高血压 中图分类号:R965.2文献标识码:A 文章编号:1004—2407(2008)02—0094—02 高血压疾病治疗药物是目前研究的一大热点.动 物实验作为抗高血压药物筛选的重要手段,通常选用 尾套法测定SHR大鼠血压来筛选药物lL1].笔者发现 尾套法_2在实际操作过程中因尾部测定部位不同测得 血压差异较大,同时由于SHR大鼠是后天爆发高血 压,且有一定的波动性.为此通过实验确定SHR大鼠 尾部最佳测定部位及其血压稳定的最佳时间,对于确 保实验结果的准确性,稳定性有着重要的意义. l仪器与材料 1.1仪器BL-410生物机能实验系统,BP-6动物无创 西北药学杂志2008年4月第23卷第2期 血压测试仪,PT-100生物血压传感器(购自成都泰盟科 技有限公司);血压计(江苏鱼跃医疗设备有限公司). 1.2动物SD大鼠,雄性,15周龄,体质量(180?20) g,12只,购自西安交通大学实验动物中心;SHR大鼠, 雄性,15周龄,体质量(283?12)g,12只,购自北京维 通利华实验动物技术有限公司;WKY大鼠,雄性,15 周龄,体质量(278?20)g,12只,购自成都达硕生物科 技有限公司. 1.3饲养条件温度(24?2)?,湿度(50?10)%,大 鼠自由进水,进食. 2方法与结果 2.1仪器设置打开电源后对血压测试仪进行如下 设置,最大压力30kPa(~0SHR)或20kPa(~0WKY/ SD),保气时间8s,间隔时间1min,温度36?,输入信 号的G为100或200,T为0.01S,F为30Hz. 2.2鼠尾标记根据尾套法可操作性,将SD大鼠 尾巴均分为4段,并从尾根到尾尖依次标记为1,2,3 和4部位,以各段的中点作为感应器的放置部位. 2.3血压测定将SD大鼠装入鼠笼,按编号放入 BP一6动物无创血压测试仪箱内预热5,10min.待 电脑监视器上出现大鼠正常脉搏波形图后,加压,放 气,读取收缩压(SBP).如此反复3,5次,选取最接 近的3个值并取其平均值作为结果.自开始测量之 日起,每隔4日重复上述操作,至试验结束. 2.4最佳测定部位的确定大鼠尾部不同部位的 SBP由部位1向部位4逐渐减小,部位2和3减小趋 势不明显(见图1),较为平缓.因此,大鼠尾部不同 部位中,尾巴中部是最佳测定部位. 图1大鼠尾部不同部位sBP测定结果(,l:12) 2.5SHR和wKY大鼠血压动态变化采用尾套 法连续3个月对15周龄的SHR和WKY大鼠进行 血压动态测量.前8周SHR的SBP逐渐上升,平均 值由试验初的22.3kPa上升为26.6kPa,SBP上升 值高达4.3kPa,约为试验初期血压值的20.从第 9周开始,SBP趋于平稳(见图2),介于25.9,26.7 kPa之间,该鼠龄的大鼠适合用于抗高血压药物研 究.对照组WKY大鼠的SBP在3个月的测量过程 中则始终平稳,是SHR良好的阴性对照. 32 28 \ 妻20 l6 l2 图2SHR与WKY3个月SBP测定结果(,l=12) 3讨论 抗高血压药物作用研究需要多次重复测定血压 值,保证实验的准确性,测定位置很重要.试验结果 显示,大鼠尾部血压从尾根到尾尖逐渐减小,但在尾 巴中部减小较为平缓,适合作为测定部位. 一 般认为SHR高血压发生或波动期在5,10 周,确立期在3,4个月..].本试验未对5周龄,15 周龄的SHR大鼠进行考察,所用的15周龄SHR大 鼠SBP达22kPa,处于高血压的确立期.SHR大鼠 在15周龄,23周龄血压升高的过程中,有血压异常 高SHR大鼠突然死亡,经解剖观察,该大鼠脑部有 大量瘀血,左心肥厚指数较大],系死于高血压引起 的脑溢血.接下来近10周的测量,SHR大鼠的SBP 平稳,保持在26kPa左右,环境稳定,无意外死亡. 经过3个月连续的血压测定,提示在进行抗高血压 药物研究时,应选取23周龄以后SBP平稳的SHR大 鼠.WKY大鼠的血压平稳,是近交系最好的健康对照. 参考文献: [1]沃格尔.药理学实验指南—_”-新药发现和药理学评价 [M].北京:科学出版社,2001. [2]焦海霞,李凌,余涓,等.尾套法和颈动脉法测定急性应 激大鼠血压变化值的比较[J].福建医科大学, 2006,40(4):404-405. [3]朱鼎量.遗传性高血压大鼠模型[J].生理科学进展, 1985,16(2):1O5. [4]何文凯,何兆初,苏诚坚,等.血脂康对自发性高血压大鼠 血压及左室功能的影响[J].中原医刊,2006,33(14):5-8. (收稿日期:2007-09—20)