【word】 赭石的不同煎出液中Fe^2＋、Fe^3＋含量测定研究

【word】 赭石的不同煎出液中Fe^2＋、Fe^3＋含量测定研究 赭石的不同煎出液中Fe ，、Fe ，含量测 定研究 . I ... S ..... S... N ......... 1... 0.... 0 ..... 2.... -- ....... 4.... 9.... 5 —— 6 CN11,2034/T 实验技术与管理 ExperimentalTechnologyandManagement 第28卷第3期2011年3月 V01.28No.3Mar.2011 赭石的不同煎出液中Fe,Fe3+ 含量测定研究 康莲薇,熊南燕,李树鱼.,肖红赞 (1.河北工程大学理学院,河北邯郸05600I;2.河北工程大学医学院,河北邯郸 056002;3.涉县人民第一医院儿科,河北涉县056000) 摘要:目的:建立赭石的水煎液和醋煎液中Fe,Fe”含量分别测定的方法.方法:在pH值为3,5之间, 波长为396nm,以邻二氮菲作显色剂,用紫外一可见分光光度计测定铁含量;在波长为510nm处测定Fe的 含量;再由2个浓度之差求得Fe的含量.结果:赭石的醋煎液和水煎液中铁含量有明显不同.结论:该方 法精度好,回收率大于9o,操作简便,可用于Fe,Fe含量的测定. 关键词:赭石;Fe;Fe”;邻二氮菲;紫外,可见分光光度法 中图分类号:R282.76文献标志码:B文章编 号:1002—4956(2011)03—0036—03 DeterminingFe计.Fe.+contentsinochersdecoctingdifferentsolution KangLianwei,XiongNanyan,LiShuyu.,XiaoHongzan (1.CollegeofScience,HebeiUniversityofEngineering,Handan056001,China; 2.SchoolofMedicine,HebeiUniversityofEngineering,Handan056002,China; 3.FirstHospital,ShexianPeopleofPediatrics,Shexian056000,China) Abstract:AIM:EstablishingtheseparatelydeterminingmethodoftheFe,Fe”contentsinocher’sthewa— terandthevinegarfriesfluid.METHODS:DeterminingthecontentofironbyUV—visspectroscopy,pH3,5, wavelength396nm,O-phenanthrolineaschromogenicreagent;thecontentofFebyUV—visspectroscopy, wavelength510nmtoobtainthecontentsofFe”bvconcentrationdifference.RESULTS:ItiSdifferenttothe contentsofFe.Feinocher’swaterandvinegarfriesfluid.CONCLUSION:ItcanbeusedforFe,Fe. contentswhichweredeterminedbygoodprecision.recoveryratemorethan90andeasyoperation. Keywords:haematitum;Fe...;Fe 引;pro—phenanthroline;UV-visspectroscopymethod 赭石又名代赭石,钉头赭石或红石头,为氧化物类 矿物刚玉族赤铁矿,主含三氧化二铁(FeO.),其次为 中等量的硅酸,铝化物及少量的镁,锰,碳酸钙及黏土 等.主要用于平肝潜阳,降逆,止血,用于治疗眩晕耳 鸣,呕吐,噫气,呃逆,喘息,吐血,衄血,崩漏下血等 症[1j.另外,也有许多主要以赭石配伍的单验方,可以 开结胸,治膈食,愈疯狂通燥结,息风止痉等].赭石 富含铁,是很好的补铁剂,具有促进红细胞及血红蛋白 的新生,抗炎止痛,兴奋肠道,镇静中枢神经和调节人 体的内分泌平衡的作用. 收稿日期:2010—05-20 基金项目:河北省教育厅2006年科学研究计划项目(2006109) 作者简介:康莲薇(1965一),女,河北省涉县人,硕士,副教授,研究方 向:中成药成分. E-mail:kanglianwei@126.corn 赭石的泡制有生用,煅用(明煅,煅醋淬)水煮,醋 煮等方法.赭石泡制的实验研究以煅制,煅醋淬,水煎 法研究较多,而醋煎法研究得较少. 本实验对生赭石和煅醋淬赭石的醋煎液和水煎液 中的Fe,Fe和FeH的含量进行测定并进行比较,为 赭石的开发和临床应用提供科学的理论依据和可靠的 临床应用的实验数据. 1仪器与 仪器:单光束双波长紫外一可见分光光度计(上海 精密科学仪器有限公司,型号756MC/756CRT). 材料:生赭石样品(样品a)采自张家口市庞家堡 铁矿,矿样经粉碎研细并过200目筛选;煅赭石(样品 b)是将生赭石高温醋淬后,经粉碎研细过200目筛选 而得. 康莲薇,等:赭石的不同煎出液中Fe,Fe含量测定研究 盐酸,硝酸,硝酸铜,硝酸镍,硝酸钙和氟化钾均为 分析纯试剂. 2测量方法 756MC/756CRT型分光光度计适用波长范围为 200,1000nm.用邻二氮菲为显色剂,在不同波长 下分别作出Fe..和Fe抖与邻二氮菲所形成的络合物 的吸收曲线.Fe一邻二氮菲络合物为橙红色,其最 大吸收峰的波长为510nm;Fe”邻二氮菲络合物为 黄色,在可见区无显着吸收,在510nm处吸光度很 小.这两种络合物在pH值为3,5范围内于396 nm处有相等的吸光系数(等吸光点).根据吸光度 的可加性原理,实验可以在pH值为3,5的条件下, 于波长400nm处测定出样品中的总铁量;然后在 pH一3.8的缓冲溶液,波长510nm处测定出Fe的 含量;最后由总铁量与Fe..的含量之差求得Fe”的 含量[4-5]. 3实验 3.1溶液配制 3.1.1Fe溶液(0.1g/L)配制 分析天平称70.03mgFe(NH1)?(SO4)2?6H2O于 烧杯中,用少量水溶解,转移到100mL容量瓶中,用 二次蒸馏水定容,得到质量浓度为0.1g/I的标准溶 液.使用时用去离子水稀释为所需浓度的标准工作液 (现配现用)_6. 3.1.2Fe标准储备液(0.1g/L)配制 用分析天平称取14.3mg的Fe.o.于烧杯中,用 10mL浓盐酸溶解,转移到100mL容量瓶中,用去离 子水定容,使用时用去离子水稀释成所需浓度的标准 工作液]. 3.1.3pH一3.6的缓冲溶液配制 用分析天平称取14.3mg的NaA于烧杯中,转 移到250mL容量瓶中,加2OmL冰醋酸,用去离子水 定容. 3.2测定波长的选择 分别用Fe和Fe”的标准储备液配制不同浓度 的Fe和Fe.的标准混合溶液(表1中简称混合液), 在756MC/756CRT型分光光度计以不同的波长扫 描,测得的各混合液在不同波长下的吸光度值见表l. 得到Fe的最大吸收波长为510nm,Fe..和Fe抖的 等吸光点在400nm处.表1中:混合液1和混合液2 中的Fe质量浓度分别为1.0mg/L和1.5mg/L;混 合液3和混合液4中Fe质量浓度分别为1.0mg/L 和1.5rag/L. 表1Fe2一邻二氦菲及Fe3?邻二氮菲络合物 不同波长下的吸光度 吸光度 波长/nm—— 混合液1混合液2混合液3混合液4 3.3Fe标准曲线测定 用1mL移液管分别准确吸取0.0,0.2,0.4,0.6, 0.8,1.0mL的Fe(NH)(SO).的标准溶液于5O mE的容量瓶中,再分别加入1mL,10的盐酸羟胺 溶液和2mL,1.6的邻二氮菲,用pH一3.6的缓冲 溶液定容,摇匀.在510nm波长下,用1cm厚的比色 皿,以试剂空白为参比,测定其吸光度,测定结果见表 2.以质量浓度c为横坐标,吸光度A为纵坐标,得到 回归方程式:A一0.384c+0.0122,相关系数r一 0.996. 表2Fe(?)的系列标准溶液及吸光度 浓度(mg?mL)吸光度/A浓度(mg?m)吸光度/A 0.00.0061.20.465 0.40.1701.60.627 0.80.3172.00.784 3.4Fe和Fe混合溶液的标准曲线的绘制 用1mL移液管分别准确吸取0.0,0.1,0.2,0.3, 0.4,0.5mL的Fe的标准溶液和Fe汁的标准溶液于 50mL的容量瓶中,再分别加入2mL,1.6的邻二氮 菲溶液,用pH为3.6的缓冲溶液定容,摇匀.在400 nm波长下,用1cm厚的比色皿,以试剂空白为参比, 测定其吸光度,测定结果见表3.以质量浓度c为横 坐标,吸光度A为纵坐标,得到回归方程式:A一 0.144c+0.0695,相关系数r===0.995. 表3Fe和Fe的系列标准混合溶液浓度及吸光度 混合液中混合液中 Fe,Fe”质量浓度AFe, Fe3’质量浓度A rag/Irag/L O.O0.O060.60.236 O.2O.1330.80.310 0.40.1791.00.354 3.5醋煎样品测定 分别精密称取样品a和样品b各0.5g于2个 200mL烧杯中,再分别加入pH一3.6的缓冲溶液,瓶 38 实验技术与管理 口置1小玻璃漏斗;在电热套中加热至沸腾,保温约 30rain后停止加热;冷却后过滤,分别移人50mL容 量瓶中,用pH一3.6的缓冲溶液定容混匀;精密量 取该液各5mL,分别置于2个50mL容量瓶中,各加 1.6%的邻二氮菲乙醇溶液2mL,混匀,放置2rain;加 pH为3.6的缓冲溶液稀释到刻度,混匀;用1cm厚 的比色皿,以试剂空白为参比,在396nm处测定吸光 度,在510am波长处测定吸光度;按上述的回归方程 式计算含铁量.测定结果见表4.表4中吸光度值为 5次测量的平均值. 表4赭石醋煎液中总铁,Fe和Fe的吸光度 由吸光度根据标准曲线或回归方程(A一0.38@ 4-O.0122)求得样品中的总铁,Fe,Fe的含量(分 别记为Q总铁,Q(Fe”),Q(Fe)见表5. 表5赭石醋煎液中总铁,Fez和FeJ的含量 3.6水煎样品的测定 分别精密称取样品a和样品b各0.5g于2个 200mL的烧杯中,加入蒸馏水,瓶口置1小玻璃漏斗; 在电热套中加热至沸腾,保温约3Orain后停止加热; 冷却后过滤,分别移人2个50mL量瓶中,各加1O 盐酸羟胺5mL,加热30rain后冷却;各加1.6邻二 氮菲乙醇溶液2mL,混匀;用蒸馏水定容到15mL混 匀;以试剂空白为参比,在510nm波长处测定吸光 度,按回归方程式(A一0.144c+0.0695)计算总的含 铁量.测定结果见表6和表7. 表6赭石水煎液的吸光度 样品Q_总/(mg?g)精密度/总铁回收率/ 4讨论 (1)赭石为铁矿石的一种,在pH为3的食醋煎 煮过程中会有多种金属离子溶出,但在铁含量远远大 于其他金属离子含量的情况下,测定相对误差不大于 ?5时,以下共存离子不干扰测定Mn,Mg,Ca,Cu, Al和Ti.实验表明试液中共存离子均不干扰铁的 显色. (2)756MC/756CRT型分光光度法可以同时测 定赭石中的Fe,Fe和Fe.的含量,回收率都大于 9O,精密度高,应用范围广,操作简便快速,为赭石的 煎出液中铁,Fe和Fe什的测定提供了一个简便快速 可靠的测定方法. (3)从含铁量结果可知,含铁量高低次序是:煅醋 淬醋煎液高于生品醋煎液,高于煅醋淬水煎液,高于生 品水煎液,t检验结果也表明含铁量之间有显着性差异, 这说明古人醋制赭石有一定科学依据.中医传统认为 煅淬后质地酥脆,易于粉碎和煎出有效成分.另外,赭 石是矿物质中药,主含FezO.,而Fe03难溶于水,却可 以和酸反应生成易溶于水的铁盐[目],所以赭石醋煎液的 铁的含量会明显偏高.实验结果表明,赭石的醋煎液中 含有一定量的Fez,而水煎液中只有Fe3.因为赭石 中Fe...在pH约为7,微沸30min的水煎煮过程中已几 乎全部被氧化成Fe”.醋煎液的pH值约为3,5,在这 个酸性范围内Fe具有一定的稳定性,不会被氧化. 因此可以看出赭石中化学成分的理化特性直接决定其 煎出液的成分及各成分含量的多少_j.中药的药理理 论认为药效的发挥离不开药物的化学成分及各成分的 含量多少,且在生物体内,铁以二价的形式被吸收,使用 三价铁的补铁剂不仅需要消耗大量的胃酸,使胃酸分泌 不足的人不能使用,而且为了促进铁的吸收需补充一定 量的叶酸和维生素Cl”].赭石的醋煎液中铁和二价铁 含量均较高,更易于被吸收,作为补铁药其临床疗效要 远远的优于水煎液. 参考文献(References) [1]张敏红,王海宝,林有功.铁的生物学功能与代谢调节研究现状[J]. 医药导报,2005,24(1O):922—924. [2]国家药典委员会.中国药典:一部[M].北京:化学工业出版社, 2005:257. [3]柯有甫,李红,魏克民.铁的代谢与缺铁性贫血研究进展[J].中华现 代J临床,2004,2(9B):1460—1462. [4]甑汉深,马利飞,张丽梅.赭石不同炮制品中铁含量测定的研究 [刀.中药材,1996,19(4):186,187. [5]柯以倪.大学化学实验[M].北京:化学工业出版社,2001:37,75. [6]戴树桂,陈新坤,陈进生,等.仪器分析[M].北京:高等教育出版 社,1984:69—97. (下转第44页) 44实验技术与管理 1l6KD 66KD 45KD 35KD 25KD l8KD 图4FPLC分离图谱 M12 一lgY重链 +一未知蛋自 ?一lgY轻链 M一蛋白分子量标准;1一FPLC技术纯化蛋白;2一硫酸铵沉淀蛋白 4讨论 图5SDS-PAGE电冰检测结果图 卵黄抗体IgY具有产量高,稳定性好和使用安全 等优点,适合产业化生产,在利用生物制品预防和控制 疾病方面有着很大的潜力和应用前景.本实验针对 常见的口臭问题,通过分离和培养口臭菌,然后制备 成疫苗,通过免疫,分离提取和鉴定,获得了卵黄抗体 IgY.本实验通过从学生生活中提出问题,然后寻求 解决的办法,旨在引导学生解除科学研究高不可攀的 心理,激发学生对基本实验和科学研究的兴趣. 本实验涉及微生物学,免疫学和生物化学等内容, 这样让学生系统地进行实验,不仅保证了学生学习的 时效性,也有利于对学生连贯性思维的培养,从而让学 生获得扎实的基本实验技能,为今后进一步做研究打 下基础.今后可以再引人分子生物学和组织解剖学等 实验内容,使得该实验更加完善和系统化l】. 参考文献(ReferencesJ L1jIeeCH,KhoHS,ChungSC,eta1.Therelationgshipbetween volatilesulfurcompoundsandmajorhalitosis—inducingfactors[J].J Periodontol,2003,74(】)32—37. [2]范亚贤,王者玲,杨圣辉,等.口臭与主要产臭菌的相关性分析[J]. 北京口腔医学,2005,13(4):221-223. [3]YanagisawaT,ShinadaK,KawaquchiY.Thequestionnairesur— veyonoralmalodorandteethstainsofmalehighschoolstudents [J].Kokubyo—GakkaiZasshi,2005,72(1):56—61. [4]胡贽,胡德渝,郑雷蕾,等.口臭研究模型的建立及其对口腔致臭菌 的确定[J].华西口腔医学杂志,2007,25(3):226,229. 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