人狂犬病毒IgG检测试剂盒(酶免ELISA法)

人狂犬病毒IgG试剂盒(酶免ELISA法) 狂犬病毒概述： 狂犬病是由狂犬病毒（RV）引起的人畜共患的急性高度致死性传染病,狂犬病一旦发病，死亡率几乎是100%，狂犬疫苗接种是目前人类对抗狂犬病的唯一有效方法。对潜伏期的狂犬病毒感染者，早检测早发现，及时注狂犬病疫苗有一定意义！标健生物专供的人狂犬病毒IgG抗体ELISA试剂盒可用于接种狂犬病疫苗后，或潜伏期内的狂犬病毒感染者，对其免疫机体的抗体IgG免疫水平监测。 产品简介： 人狂犬病毒IgG抗体ELISA试剂盒采用双抗原夹心法定量检测人血液中狂犬病毒IgG抗体，可对接种狂犬病疫苗后，或潜伏期内的狂犬病毒感染者，对其免疫机体的抗体IgG免疫水平监测。 检测原理： 本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人狂犬病病毒抗体 IgG 表达水平。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中狂犬病病毒抗体 IgG 相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的抗原结合，形成抗原-抗原-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），与CUTOFF 值相比较，从而判定标本中人狂犬病病毒抗体IgG存在与否。 试剂盒主要组成： 1、酶标包被板  96 孔×1块  2、样品稀释液  6ml×1 瓶 3、酶标试剂  6ml×1 瓶 4、30 倍浓缩洗涤液  20ml×1 瓶 5、显色剂 A 液  6ml×1 瓶 6、显色剂 B 液  6ml×1/瓶 7、阴性对照  0.5ml×1 瓶 8、阳性对照  0.5ml×1 瓶 9、终止液  6ml×1 瓶 10、封板膜  2 张 11、密封袋  1 个 12、原版说明书1份 包装规格：96T/盒 储存条件：于2-8℃干燥、阴凉处保存 有效日期：有效期为12个月 生产企业：广州市标健生物科技有限公司 标本要求： 1、建议标本采集后应尽早进行提取，提取请按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。 2、不能检测含NaN3的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 检验方法：（请按顺序进行） 编号： 将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同） 加样： 分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50µl。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 温育： 用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。 配液： 将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。 洗涤： 揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。 加酶： 每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。 温育： 操作同上温育方法。 洗涤： 操作同上洗涤方法。 显色： 每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。 终止： 每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 测定： 以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值） 。 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。 结果的判读： 1、试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10 2、临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15 3、阴性判定：样品 OD 值< 临界值（CUT OFF）者为狂犬病病毒抗体 IgG 阴性 4、阳性判定：样品 OD 值≥ 临界值（CUT OFF）者为狂犬病病毒抗体 IgG 阳性 注意事项： 壹：试验完成后，所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸，使用时必须注意安全。 贰：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 叁：浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 肆： 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 伍：底物请避光保存。 陆：试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为 630nm。 柒：操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。