HPLC测定龟鹿补肾口服液中淫羊藿苷的含量

HPLC测定龟鹿补肾口服液中淫羊藿苷的含量 HPLC测定龟鹿补肾口服液中淫羊藿苷的 含量 676MedicalJournal,May.2005,.27,No.5 HPLC测定龟鹿补肾口服液中淫羊藿苷的含量 广东省深圳市罗湖区中医院(深圳518001)林晓莲刘塔斯 【摘要】目的测定龟鹿补肾口服液中淫羊藿苷的含量.方法采用HPI_E法测定龟鹿补肾口服液中淫羊藿苷的含量. 结果淫羊藿苷在0.118,O.520范围内线性关系良好.结论方法简便,重现性好. 【关键词】龟鹿补肾口服液;Ht'I.E;淫羊藿苷;含量测定 【中图分类号】R282 龟鹿补肾口服液由菟丝子,淫羊藿,续断,狗脊,制何首 乌,鹿角胶,龟甲胶等十几味中药组成,具有壮筋骨,益气血, 补肾壮阳之功效,用于身体虚弱,精神疲乏,腰腿酸软,头晕目 眩,肾亏精冷,性欲减退,夜多小便,健忘失眠等症.淫羊藿是 方中有效成分之一,《中华人民共和国药典》…规定了淫羊藿 药材质量的检测方法,淫羊藿苷为淫羊藿药材质量评价指标, 本文采用高效液相色谱法测定龟鹿补肾口服液中淫羊藿苷的 含量,现报道如下. l材料与方法 1.1仪器与试药仪器:日本岛津SPD-10A高效液相色谱 仪.LC-10AT泵,ODS柱,10/an,250舢×4舢.试剂:淫羊藿 苷对照品为中国药品生物制品检验所提供,批号0737- 200011,水为重蒸馏水,甲醇,冰乙酸为分析纯.样品:龟鹿补 肾口服液为广东华天宝药厂生产,批号:0412007,0412009, O41201O. 1.2色谱条件流动相:甲醇.水.冰乙酸(6O:40:0.5);流速: O.3mI_/min;柱温:30?;检测波长:270nm;灵敏度O.03AUFS; O51O15min A A:淫羊藿苷对照品 图1 进样量:20;理论塔板数按淫羊藿苷峰计算为1800,分离 度为1.53. 2实验方法与结果 2.1对照品溶液的制备精密称取淫羊藿苷对照品 3.28Illg,用少量甲醇溶解于25mL量瓶中,补足甲醇至刻度, 摇匀,得对照品贮备液,精密吸取对照品贮备液3mL,置 25mL量瓶中加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液. 2.2供试品溶液的制备对3批样品各精密吸取5mL置 50mL量瓶中加甲醇至刻度,摇匀,超声5rain,放置后继续加 甲醇至刻度,离心(3000r,nliI1)10min,取上清液做供试品溶 液. 2.3空白试验按处方及生产工艺制备不含淫羊藿的阴性 再按供试液制备方法制备阴性溶液,精密吸取对照品溶 样品, 液,供试品溶液和阴性溶液各20,在上述色谱条件下依次 进样,进行测定,结果明阴性溶液无吸收峰,样品溶液中淫 羊藿苷能与其他杂质峰分离,见图1. 051015min B B:不含淫羊藿的阴性样品C:供试品液 龟鹿补肾口服液的高效液相色谱图 2.4曲线的绘制精密吸取上述对照品贮备液1.0, 2.O,3.0,4.0,5.0mL,分别置于25mL量瓶中,加甲醇稀释至 刻度,摇匀,再分别精密吸取20止,注入高效液相色谱仪,按 上述色谱条件测定,以淫羊藿苷进样量为横坐标,相应的峰面 积为纵坐标.绘制标准曲线,其回归方程式为Y=1.709×106X 一1.284×104r=0.995,结果表明,淫羊藿苷在0.118, ?湖南中医学院药学院(长沙410007) 0.520范围内,线性关系良好. 2.5精密度试验精密吸取淫羊藿苷对照品20止,注入高 效液相色谱仪,重复进样5次,测定淫羊藿苷峰面积,结果为 RSD1.78%. 2.6重复性试验取供试品溶液5份,按样品含量测定项下 的方法进行测定,其峰面积值的RSD1.76%. m c摊5藿羊淫O 广西医学2OO5年5月第27卷第5期 2.7稳定性试验取批号为041201)9的样品1mL,按供试品 溶液的制备法制备后,置棕色瓶中,于0…246,8h分别进样, 测定淫羊藿苷峰面积RSD0.95%,说明样品在8h内稳定. 2.8样品含量测定取3批龟鹿补肾口服液按上述方法制 按上述方法进行测定,每批同法测定5次, 备成供试品溶液, 计算出样品中淫羊藿苷的含量,结果见表1. 表1龟鹿补肾I:1/i[液中淫羊藿苷的含量(n:5) 2.9加样回收率试验精密量取已测知含量的样品5份,加 入一定量的淫羊藿苷对照品,按样品溶液的制备方法进行处 理及测定,测得平均回收率为95.68%,RSD为1.55%. 2.10结论用眦法测定某种制剂中淫羊藿苷的含量, 文献u"报道较多,且用本法测定原料中淫羊藿苷含量时,所 得结果与按药典中淫羊藿项下定量分析方法,测定结果一致. 3讨论 677 实验中应保持柱温的基本恒定,否则影响实验结果的重 现性.龟鹿补肾口服液由于处方复杂,我们通过查阅文献") 及研究分析,选择了上面选择的流动相,而且由于淫羊藿苷是 一 种黄酮苷,因含羧基而显酸性,故在分离淫羊藿苷的流动相 中加入少量冰乙酸可使淫羊藿苷的出峰时间延长,峰形更佳, 受杂质干扰少,分离效果更好. 参考文献 1<中华人民共和国药典)一部[s].北京:化学工业出版社.2O00.267 — 268. 2杨柳,邓远辉.HPLC测定补肾骨膏中淫羊藿甙的含量【J].中国 实验方剂学杂志,1999,5(2):8—9. 3黄评贵,喻定开,孙树山,等.HPLC测定抗骨增生口服液中淫羊藿 苷的含量[J].中成药,2003,25(9):774—775. 4彭艳,王苑桃.HPLC测定三宝双喜膏中淫羊藿苷的含量[J].中 成药,2001.23(12):925—926. 5陈发奎.常用中药有效成分含量测定[M].北京:人民卫生出版社, 1997.30. 6巍璐雪.中药制剂分析[M].上海:上海科学技术出版社,1997.108. (收稿日期:2O05-O3-07) 血清超敏C反应蛋白检测在心血管病变中作用的探讨 广西南宁市第二人民医院检验科(南宁530031)梁秀云 【摘要】目的探讨血清中超敏c反应蛋白(1~caP)的变化在心血管病变时的临床意义.方法采用乳胶增强试剂,定 时动态散射比浊法,全定量检测急性冠状动脉综合征(AcuteCoronarySvnd唧Tle,ACS)58例,稳定型心绞痛(StableAnnaPectoris, SAP)33例及健康对照者30例的血清hs-CRP浓度,并进行比较.对ACS中的急性心肌梗死35例患者一周后进行血hs-CRP浓度 复查,并将前后浓度进行比较.结果ACS组较SAP组及对照组血清中hs-CRP浓度显着升高,差异有显着性(P<0.01);s^P组 较对照组血hs-CRP浓度差异无统计学意so(P>0.05);急性心肌梗死(>24h) 血hs-CRP浓度较心肌梗死(1周)hs-CRP浓度差 异有显着性(P>0.05).结论动态检测hs-CRP可作为临床心血管病变状况的监测 指标之一. 【关键词】c反应蛋白;心血管病变;冠心病 【中图分类号】R541.4 C反应蛋白(CRP)是反映机体炎症状态的一个敏感而可 靠的指标,用血清超敏C反应蛋白(hs.CRP)测定方法对诸多 冠心病患者的血清hs-CRP浓度进行前瞻性研究发现,hs-CRP 对冠心病的发生有很强的预告价值….有报道血中CRP 与ACS形成严重程度呈高度相关,可能是冠心病新的危险因 子?J.我们采用hs-P自动分析系统,动态监测ACS,SAP, 健康者血清中hs-CRP的含量,探讨hs-CRP在心血管病变中 的作用. 1资料与方法 1.1对象为我院心血内科住院病人及体检中心健康者,其 中:0)ACS组58例,男30例,女28例,平均年龄(54.3?10.7) 岁,其中急性心肌梗死33例,不稳定型心绞痛25例,所有心 肌梗死患者都成功进行溶栓治疗;?稳定型心绞痛33例,两 组对象均经临床心电图,冠状动脉造影证实,并按国际诊断标 准化分类命名,所取病例均排除其它炎症感染,手术前和术后 感染及肝癌等;?对照组30例,男16例,女14例,平均年龄 (55.6?9.4)岁,来自我院体检中心同期健康体检者. 1.2仪器DabEBEHRING公司BNhoSpee全自动免疫分析 系统. 1.3试剂采用hs-CRP乳胶增强试剂盒,校正材料由Dabe Behring生产厂家提供IFCC血浆蛋白标准参考物((=Iu岬0). 1.4原理采用定时动态散射比浊法提供优化的反应条件 保证检测结果的准确性,hs-CRP的正常参考值为<5rng,Lo 1.5取材患者人院24h内及溶栓治疗1周后分别空腹抽 取静脉血(不需抗凝),分离血清备检,同期抽取健康体检者血 检测. 1.6分析应用SPSS10.0版统计软件处理数据,计量数据 用均数?标准差(;?s)表示,组间比较采用t检验.