不同稀释液和温度对猪精液稀释常温保存效果的影响

不同稀释液和温度对猪精液稀释常温保存效果的影响 不同稀释液和温度对猪精液稀释常温保存 效果的影响 一 72@固技学一赭占禽 不同稀释illi~O温度对猪精液襦释常温保存效果的影响 潘越博黄龙艳.米占锋. (甘肃畜牧工程职业技术学院,甘肃武威733【1(】6;z甘肃省家畜繁育中心,甘肃武威733000) :1号稀释液(即变温摘要:拳试验分别设计了4种稀释液配方和保存温度.结果表明 液)对原精液稀释保存效果最好,精子 活力,有效存活时间,总存活时间和生存指数分别为0.75,101.5h,134.6h,76.8h,稀释后的精子活力与其他组之间差异不 显着(P>0.()5);精子有效存活时间,总存活时间,生存指数1号与2号配方差异不显着(P>f).05),但与其他配方组之间差异 极显着(P<【)_01);且试验得出,17c(=条件下保存的稀释精液,其活力,存活时间的生存指数等个指标最高,保存效果最好. 关键词:猪精液;稀释液;精予活力;存活时间;生存指数 中图分类号:$813.1文献标识码:A文章编号:1001—0769(2010)06—0072—3 1前言 随着规模化养猪场的增加和家畜繁殖技术的不断发展,人 丁授精技术在养猪业中的应用力度也不断加大,但较低的情期 受胎率和产仔数依然是该项技术的不足.猪是属于多胎家畜,在 上l=常情况下,一个情期内母猪能排出l0,25枚卵子,据不完全 统计,采用人T:授精的母猪平均产仔数约为8头左右,低于正常 要求的lO头左右,原因精液的处理技术有关,且主要是精液 稀释液配方和保存温度.因此,为了有效地开展猪的人丁授精, 精液的稀释保仔足父键技术.日前,公猪精液常温保存在生产中 具有一定的实用价值,为了探讨一种生产中使用方便,效果较好 的猪精液常温保存稀释液和保存,本试验从精液稀释液配 方和保存温度着手,比较分析了该因素与精液稀释和保存效果 之间的关系 2试验材料 2.1精液 从甘肃畜牧工程职业技术学院种猪场精心选择健康,生产 性能优良,体质健壮和遗传性能稳定的原种长白种公猪5头,年 龄18,24月龄,采集其精液,精子活力0.8以上,气味,色泽正常 者供稀释保存用. 2.2主要仪器及用品 计算机辅助精液分析系统CASA,冰箱,恒温水浴锅,电子天 平,高压蒸汽锅,电热鼓风干燥箱,pH测定仪,双蒸仪,磁力搅拌 器,生化培养箱. 2.3试验配方(见表1) 3技术路线 3.1试验用各类用品的消毒 收稿日期:2010-08—14.试验用玻璃仪器采用电热鼓风干燥箱干燥消毒,配制好的 2-2流动相的选择表2回收率及精密度 通过预实验及对比分析发现,选用甲醇一1%乙酸水溶液作 流动相,效果较好. 2.3标准曲线和检出限的确定 分别配制一定浓度的5种磺胺类物质混合标准溶液,进样量 5LLT,流速0.6mL/min,按上述确定的色谱条件进行测定,进样后计 算不浓度的峰if?秋,并计算叫归方程,其结果见表l所示 表1工作曲线及方法检出限 组分保留时间回归方程相关系数检出限lag/mL 2.4方法回收率和精密度实验 在确定榆洲方法后,为验证该方法对样品中磺胺类物质检 测的适用性,以及该方法的准确度和精密度,选取样品为洲试对 象,进仃加际回收率和精密度实验,结果见表2所示. 第30卷第6期总171期 从表中数据可以看出,样品中5种磺胺类物质的加标回收 率均在80%以上,且相对标准偏差低.此法精密度高,可适用于 鹅肉中中磺胺类物质的检测. 3结论 本实验建立了鹅肉中多种磺胺类药物残留的HPLC测定方 法.通过对样品预处理,仪器最佳色谱检出条件等实验,发现该 法简便快速,基体干扰小,线性范围宽,回收率和检出限令人满 意.从而为快速灵敏的测定鹅肉中磺胺类药物的残留奠定了实 验和理论基础,为动物源性食品的安全提供了保障. 参考文献:(5篇,略) 2010年11月25日出龋 围技学一薯考占禽一73 稀释液分装至沽净的玻璃瓶中,盖瓶摩}1_用消毒过的纱和 棉线将其包扎,然后置于高蒸汽灭菌消毒. 表1稀释液配方 基 础 液 葡萄糖 碳酸氢钠 二水柠檬 酸钠 氯化钠 氨基乙酸 氨苯磺胺 EDTA 牛奶 03 02l 2-0O O-04 __—— 030 ?—— 5.O __—— 0-3 蒸馏水10010010(1 100 注:'充二氧化碳20rain,pH调至6.35. 单位:g,札,容量%,IU/mL,uI. 3.2稀释液的配制和精液稀释 按配方要求准确称量各成分并置于消毒过的壁杯I{j,?蒸馏 水稀释至100mL;对溶解后的溶液用滤纸过滤,然后将其密埘,采 用高压蒸汽灭菌后将溶液冷却.新鲜鸡蛋洗净外壳后用75%酒精 消毒,待酒精挥发后破壳,用消毒过的卫生纸提取卯黄,采用新鲜 牛奶,卵黄和牛奶用4层纱市过滤后,按比例加入消毒冷却后的 溶剂中;搅拌混匀稀释液,测定其pH值后密封保仔;陵用时按要 求加入抗生素;为了减少稀释打击,采用等温二次稀释 3.3精液的处理及保存 每组试验采用试验用公猪1次射精的精液用4,5层纱布滤 去胶状物,测定精液pH值,镜检活力达0.8上告供稀释保俘 用;对同头次所采精液分成4等份,分别按试验,J案作4种稀释 处理,稀释比例1:3;稀释后每种处理再分成2等份14,18? 恒温保存,保存时间36h;按时问检查1次精子活力,直至 全部精子死亡为止,相应数据 3.4数据处理 处理后的精液随机抽取l0个样l本检测棚嘘指标并求其均 值,采用独立性检验(xz检验)对数据进行分析,检验不同组问的 差异显着性. 4试验结果 4.1稀释保存效果 由表2可以看出,按4种稀释液方对满足条件的原精液 进行稀释和保存后,精子活力,精子有效仔活时问,总仔活时问, 生存指数值均以1号稀释液效果最好,分别达到0.75101.5h, 134.6h,76.8h,稀释后的精子活力jj2,3,4号之闭差异不显着 第3O卷第6期总171期 (P>().05);精子有效仔活时间,总存活时间,尘仔指数1号j2晤【J 方差异不显Np>o.os),但与其他配方组之问差异极显着(/9<0.01) :h) 表2不同稀释液稀释精液后的精子活力和保存效果(单位0.75:k-0.3 0.72-~t-0.2 0.73:~-0.2 0.70土o.1 1O1.5:kl1.0 93.44-18.7 5a5~k-4.8 4矗7~--9.7 l34.6t:18.4 125.8+11.6 96.5?13.3 82.34-10.2 76.8:k6.5 70.4:k7.3 42.1土6.6 34士5.8 4.2稀释精液保存温度 通过试验筛选分析,1号稀释液稀释和保存效果最好.为了 进一步试验分析稀释精液的最佳保存温度,采用该稀释液对合 格的原精液进行稀释后分别置于l5?,16,l7oC,18?的生 化培养箱保仔后,每组取10个样品测其精子活力,存活时问和 生存指数等指杯结果表明:在17的环境中,稀释精液的保俘 效果最好,其精子活力,有效存活时间,总存活时间和生存指数 分别为0.66,97.7h,l25.9h,72.9h,该结果与其他温度环境相比 较差肄不显着(P>0.05)滢3). 表31号液稀释精液在不同温度条件下的保存效果 150.60士0.298.4:1:7.2123.2t:15.671.34-5.4 160.63:k-0.196.5士8.4124.8+11.070.8:k5.1 170.66:~0.197.7士6.9125.9士12.572.9土5.8 180.614-0.292.3士7.3122.l1.771.仕4.6 注:精液处理室的温度为15"'25?. 4.3保存温度 常温保仔温度以14,18?效果较好,pH篮在6.5,6.8之 保存效果较好.这与国内相关报道一致. 4.4抗生素的作用 试验组中的抗生素采用林肯和庆大霉素,抗菌效果较 好其原冈足这2种抗菌素的作用维持时问长,不易产生耐药性 5结果与分析 5.1通过对精液有效保存时间,总存活时问,生存指数的测定,在 所没计的配方巾,经试验以1号配方常温保存效果最好其脲因 足陔怖释液含有精子所需要的营养物质葡萄糖,缓冲物质柠檬 酸钠等,抗菌物质青霉素双氢链霉素和氨苯磺胺等,稀释剂的种 类和厢量全而适于精液保存和改善保存后精子活力. 5.22稀释液营养物质葡萄糖用量最大,缓冲物质柠檬酸钠和 EDTA用量较l号稀释液少得多,因此稀释后对精子活力,精子 存活时间等指标产生一定影响,总体稀释效果比1号差 5.33号稀释液仅含有缓冲物质,营养物质和一定量的抗生素;4 号稀释液只含有印黄,牛奶和抗生素,以上两种稀释液结构单 一? ,顾此失彼,可以稀释合格精液,在生产中适合于现配现用而 不于精液的保存. 5_4新鲜精液品质对保存效果具有显着影响,稀释保存用精液其 2010年11月25日出版 —— 74——?阅技学一轱占禽 鸡宾词嗯肓吧猜效果实验报告 马更尕,潘照仁 (武威市畜牧兽医局,甘肃武威733200) 摘要:用15%和20%的鸡粪替代育肥猪全价日粮,实验结果表明和饲喂全价日粮相 比,采食量,增重效果均无显着差异, 但经济效益显着提高.以20%的鸡粪替代育肥猪全价日粮经济效益最好. 关键词:鸡粪;采食量;增重;经济效益 中图分类号:$813.3文献标识码:A文章编号:1001—0769(2010)06—0074—2 近年来由于饲料资源日趋紧张,价格偏高,导致饲料成本直 线上升,经济效益下降,一定程度上影响了养殖业的快速发展. 发掘利用新的饲料资源,是降低养殖成本,推动养殖业发展的关 键之一.由于鸡粪中有70%的营养物质未被消化掉,将其 作为饲喂猪的饲料成为一种新的养猪方式,为了进一步探讨鸡 粪养猪的价值及其经济效益,笔者在养殖场开展了鸡粪喂猪实 验,取得了很好的效果.现将实验如下: 1实验材料和方法 1.1鸡粪的/ja-r处理 将新鲜鸡粪放在干燥平坦的地面上,在烈日下暴晒1,2d, 除去羽毛等杂质,碾或粉碎成细粉,贮存待用. 1_2参试猪 选择体重60左右的生长育肥猪3O头,随机分为I,?, ?组,每组1O头,I组为对照组,?,?为实验组.参试猪均在实 验前按常规免疫,消毒,驱除内外寄生虫. 1.3鸡粪的用量 鸡粪的用量在对照组在全价饲料的基础上,每百千克饲料 实验?组全价饲料85%,鸡粪含量l5%,实验?组全价饲料 80%,鸡粪20%,对照组全价饲料消化能为3.O0MKcal/kg,粗 蛋白为l4.47%,粗纤维5.18%,钙0.55%,磷0.48%,赖氨酸 0.69mg/kg,蛋氨酸0.31mg/kg. 1.4饲养管理 参试猪均在半开放的标准猪舍饲养,每日饲喂3次,自由饮 水,专人负责管理.实验前7天为预试期,正试期45d. 2实验结果 2.1采食量观察 饲料中添加l5%和20%的鸡粪,除个别猪采食速度略有 下降,组问无显着差异,三组均定时定量,采食时间:I组平均 收稿日期:2O10—08—11. 作者简介:马更尕(1977一)女,甘肃武成人,本科,畜牧师,主要从事畜牧技 术推广工作. '—."—.—..—十一"—'"—+一"十*十-+一十n十"十"+"+-+一十"+"+"+-+一+"+-? 活力应在0.8级以上为好,活力偏低会对保存效果明显下降;同 时本试验结果表明,公猪精液常温保存以17?效果最好,其原 因是:在满足精子生存环境的条件下,该温度使精子的物质能量 代i胄}和自身需求处于最佳的平衡状态,同时酶的活性强,精细胞 第30眷第6期总171期 21min,?,?组分别为22min和24min.在实验期间,没有出 现不良反应和拖食现象.'. 2_2育肥增重效果 由表1看出,I组比?组,?组日增重分别高39.9g和80.9g, 但无显着差异. 表1各组增重(x?s)统计表 注:单位:l【g,g 3经济效益分析 表2经济效益分析 :Iq;,g,元. 注:单位 由表2知,实验期间,?,?组比I组分别减少精料-15.9kg 和21.2kg,减少投入成本23.85元和31.8元,?,?组分别比I 组多收入16.06元和18.6元,分别提高37.26%和43.25%. 4小结与讨论 4.1鸡粪含有多种营养物质,干鸡粪中粗蛋白质含量为28.7%,粗 纤维为18.1%,钙7.8%,磷2.1%,各种氨基酸含量占8.1%.还 有丰富的微量元素,特别是蛋氨酸,胱氨酸的含量均高于玉米,高 粱,大麦等谷物籽实.在育肥猪的饲料中添加15%,20%经过加 工处理的干鸡粪,可充分利用其中的营养成分.饲喂实验中?,? 组个别猪采食速度略有下降,但不影响适口性和采食量. 4.2在育肥期内,添加鸡粪的?,?组增重略低于对照组,但无显 着差异>o.os).证明鸡粪中含有猪生长发育所需的营养成分, 添加鸡粪喂猪有利于猪的生长发育. 4.3鸡粪中的粗蛋白,氨基酸,维生素等含量较高,所以添加鸡粪 新陈代谢旺盛,从而改善精子活力,延长精液保存时间.总体而 言,精液稀释和保存的影响因素很多,机理也非常复杂,至于一 些细微因素和机理有待于进一步研究探讨. 参考文献:(9篇,略) 2010年11月25日出版