冬凌草胶囊含量测定的研究.doc

冬凌草胶囊含量测定的研究.doc 冬凌草胶囊含量测定的研究 作者:郑圣华 张红霞 夏鸿林 袁郭红 【摘要】 参照部颁03册(WS B 0527 91)，按照药品注册管理办法，将冬凌草片剂改为冬凌草胶囊，按中药注册分类9进行申报。结合所申报剂型的特点，进行了含量测定方法研究。 【关键词】 消旋卡多曲; 分散片; 正交设计 为了有效地控制冬凌草胶囊的质量，本研究参考有关的文献[1]，对主药中的冬凌草甲素进行了含量测定的研究，并进行了系统性实验和方法学考察。 1 仪器与试剂 仪器:高效液相色谱仪(LC 10ATVP);试剂:甲醇为色谱纯;对照品:冬凌草甲素(来源:自制)。 2 色谱条件: 色谱柱:C18 5μm 4.6×250mm(柱号:E1616123);流动相:甲醇:水(50:50)为流动相(本实验通过对甲醇 水，甲醇 水 冰醋酸，甲醇 水 磷酸，甲醇 0.2mol/L磷酸氢二钠，甲醇 乙腈 0.04%磷酸溶液，乙腈 水等不同比例的流动相进行实验，发现甲醇 水比例为50:50的系统分离效果较好，故选择本系统为流动相。理论板数按冬凌草甲素峰计算不得低于6000，且冬凌草甲素与相邻峰的分离度大于2.0);柱温:室温;波长:238nm;流速:1.0ml/min;检测波长:选用238 nm为检测波长。 3 样品溶液的制备和测定方法 3.1 对照品溶液的制备 精密称取在60?减压干燥2小时的冬凌草甲素对照品适量，加甲醇制成每1ml含35μg冬凌草甲素的对照品溶液，即得。 3.2 供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品20粒，精密称定，研细，混匀，取0.75g，精密称定，置50ml量瓶中，加流动相超声溶解，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。 3.3 测定方法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。 3.4 线性范围的考察 精密称取在60?减压干燥2小时的冬凌草甲素对照品适量，加甲醇制成每1ml含冬凌草甲素0.1785mg的对照品溶液，作为储备液,摇匀。分别精密量取该溶液0.5ml、1ml、2ml、4ml、5ml置10ml量瓶中，用甲醇依次稀释成系列对照品溶液。照上述色谱条件分别 进样20 μl，记录色谱峰面积分别是: 2105837;4192602;8527430;16703062;21687346。将峰面积A对相应的浓度C进行回归处理得标准曲线A=240928.7C-108189，r =0.9996，结果表明:冬凌草甲素在8.925,89.25μg/ ml浓度范围内，其峰面积与相应的浓度呈良好的线性关系。 3.5 精密度试验 取上述对照品溶液(每1ml含35.70 ug冬凌草甲素),照上述高效液相色谱法重复测定5次，结果见表1。3.6 样品溶液的稳定性试验 按含测定方法，取同一批冬凌草胶囊样品(批号:20060810)，每隔一定时间测定其中冬凌草甲素的含量，表明被测溶液在8小时内稳定。结果见表2。表1 同一样品连续5次测定峰面积结果表2 同一样品在8小时内测定结果 3.7 样品的重现性试验 按含测定方法，取同一批冬凌草胶囊样品(批号:20060810)，进行多次测定，测得峰面积并计算其中冬凌草甲素的含量，结果见表3。表3 同一样品重现性测定结果 3.8 阴性样品干扰的考察 按供试品样品的制备方法，取缺冬凌草的样品，照处方制备阴性对照品溶液，按含量测定方法测定，结果表明阴性对照品无干扰，含量测定方法可行。 3.9 加样回收实验 在已测含量的冬凌草胶囊样品(批号:20060810)中，加入精密称定的对照品，再按上述高效液相色谱法测定其中的冬凌草甲素的含量，并计算其回收率，结果见表4。表4 样品加样回收实验结果 4 样品检验结果 根据上述色谱条件对10批小试样品的三批中试样品进行含量测定,结果见表5。表5 三批中试样品含量测定结果 5 讨论 冬凌草胶囊为本公司新药品种，其今量测定方法未见报道，根据处方和工艺研究，按照药品标准草案[2]进行了系统的含量测定方法研究。根据文献[3]，对流动相进行了实验，结果甲醇:水为50:50分离效果较好。通过加样回收、精密度、稳定性、重现性实验，表明系统是可行的，方法是可靠的。 【