凉血散淤抗肿瘤研究进展

凉血散淤抗肿瘤研究进展 凉血散淤抗肿瘤研究进展 【摘要】 近年来的一些实验研究明，凉血散淤方药如桃核承气汤、抵当汤及丹参、丹皮、赤芍、大黄等具有显着的抗肿瘤作用。其作用机制包括抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、诱导肿瘤细胞分化、抑制肿瘤细胞转移以及提高机体免疫力等。 【关键词】 凉血散淤 抗肿瘤 综述 “淤热”作为一种新的致病因素越来越受到中医界的重视。我们通过查阅大量的古今文献资料，结合多年的临床实践，提出淤热互结是恶性肿瘤的一个重要病机，凉血散淤是肿瘤治疗的又一项重要法则。大量的实验研究也表明具有凉血散淤作用的方药如桃核承气汤、抵当汤及中药丹参、丹皮、赤芍、大黄等具有显着的抗肿瘤作用。现就其抗肿瘤作用及作用机制如下。 1 抑制肿瘤细胞增殖 肿瘤细胞的一个重要特点是具有持续的增殖能力，抑制其增殖是抗肿瘤的一个重要靶点。多个实验证实凉血散淤方药能使肿瘤细胞的倍增时间延长，倍增倍数减少，G0/G1期细胞增多，S期细胞减少。计春燕等,1,用不同浓度的丹皮提取物丹皮酚和5-FU，MMC，DDP处理人大肠癌细胞株HT-29。结果发现，丹皮酚在7.81,250 mg/L浓度范围内对HT-29细胞的增殖均有抑制作用，药物浓度越高，作用时间越长，其抑制作用越强。细胞形态观察显示丹皮酚组细胞增殖缓慢，随着药物浓度的增大及作用时间延长，细胞逐渐变小、折光率减弱，部分脱落漂浮于培养瓶中。而且低浓度的丹皮酚与上述化疗药物合用，可使化疗药物对细胞增殖的抑制作用增强。袁淑兰等,2,在体外用丹参酮处理多种肿瘤细胞——人早幼粒白血病(NB4)、维甲酸耐药的 NB4(MR2)、红白血病(K562)、肿瘤细胞系肝癌(SMMC-7721)、鼻咽癌(CNE-1)、肺腺癌(SPC-A-1)后，经丹参酮?A 处理后的肿瘤细胞生长和增殖受到明显的抑制，且随丹参酮?A 作用时间的延长，细胞生长抑制越明显。集落形成试验结果显示，经丹参酮?A 处理过的肿瘤细胞集落形成明显被抑制，对 NB4和 MR2 的集落形成抑制率接近和达到 100%，而对鳞癌细胞的集落形成抑制率较低。通过流式细胞仪分析，经过丹参酮?A处理后的细胞被阻止于G0/G1期，而S期细胞数明显减少，凋亡细胞明显增加，细胞增殖指数降低。 李家宁等,3,用不同浓度的大黄素处理人肺腺癌细胞株Anip973，观察对其增殖的影响，结果显示在一定范围内，大黄素的剂量越大、作用时间越长，对肿瘤细胞生长的抑制作用越强。在大黄素作用下，DNA 合成前期Anip973细胞比例增加，DNA 合成期比例减少。本实验提示大黄素可明显抑制人肺腺癌Anip973细胞的增殖，其可能的机制之一是通过抑制细胞 DNA 合成，延迟细胞周期的进程，进而抑制了细胞的增殖。 2 诱导肿瘤细胞凋亡 细胞凋亡是机体生长发育、细胞分化和病理状态中细胞自主性死亡的过程，是机体保持自稳态的一种重要的方式。对于肿瘤组织而言，不同的凋亡指数，即凋亡细胞占细胞总数的百分比，在一定程度上与其对化疗的敏感性、肿瘤分化程度、分级、发展及肿瘤的生物学行为有关。诱导肿瘤细胞发生凋亡是目前进行肿瘤控制与治疗的可行方法之一，也是筛选抗癌药物的指标之一。刘剑波等,4,应用MTT、软琼脂克隆形成、DNAladder凝胶电泳及流式细胞术等方法，研究了中药单体大黄素对肝癌细胞HepG2生长增殖的影响以及作用机理。结果显示大黄素在较低浓度即可抑制肿瘤细胞的生长，在软琼脂实验中，大黄素可以浓度依赖的方式抑制细胞克隆的形成。经 DNA ladder及流式细胞仪发现，大黄素能诱导HepG2细胞凋亡，与阴性对照相比，随着药物浓度从10μg/ml增加到20μg/ml，AnnexinV染色细胞显着增多，由27.3% 增至 59.6%;当药物浓度增至 40μg/ml时，培养液中几乎无活细胞，由碘化丙啶和 AnnexinV双重标记的凋亡后期以继发性坏死细胞为主。提示中药单体大黄素在体外能抑制肝癌细胞HepG2的生长增殖，并能诱导该细胞凋亡。何金涛等,5,将体外培养的肺癌SPC-A-1细胞经无毒剂量的丹参酮?A(0.5 mg/L)处理5 d，光镜、电镜观察细胞凋亡情况，流式细胞仪检测凋亡指数及凋亡相关基因的蛋白表达，并以全反式维甲酸及顺铂作为对照。结果显示SPC-A-1细胞经丹参酮?A处理后，电镜观察可见多量凋亡细胞。流式细胞仪检测丹参酮组凋亡指数显着高于顺铂组，而与维甲酸组比较无显着差异。丹参酮组促凋亡基因p53，Fas，Bax表达水平明显升高，而凋亡抑制基因Bcl-2的表达水平则显着降低。提示丹参酮?A具有诱导肺癌SPC-A-1细胞凋亡的作用，其分子机理可能是上调p53、Bax、Fas及下调Bcl-2的 表达。 许惠玉等,6,用赤芍总苷作用于荷S180肉瘤小鼠，观测细胞调亡、Bcl-2蛋白及c-myc mRNA的表达。实验结果显示，赤芍总苷可以促进荷瘤小鼠体内肿瘤细胞发生凋亡，凋亡峰提前出现，峰值增高，且诱导细胞凋亡作用于细胞周期G1期和S期。实验组Bcl-2蛋白和c-myc mRNA表达水平降低，说明赤芍总苷诱导调亡的机制可能与下调Bcl-2和c-myc mRNA表达水平密切相关。 3 诱导肿瘤细胞分化 诱导分化治疗不杀伤肿瘤细胞，而是通过药物诱导肿瘤细胞向正常细胞转化，同时对正常细胞无杀伤作用，且少有骨髓抑制等副作用。故诱导分化是目前肿瘤治疗的新途径。梁勇等,7,研究了丹参酮?A对初治、复发及耐药人急性早幼粒细胞白血病细胞体外诱导分化作用。将11例APL患者(初治5例、复发3例、对ARTA耐药3例)白血病细胞分别与0.5μg/ml(初治、复发病例)或1.0μg/ml(对ARTA耐药病例)丹参酮?A一起原代培养。结果显示，丹参酮?A处理了7 d的APL细胞，其形态及功能都趋向成熟和正常，表现为较高的诱导分化率及NBT还原能力。同时粒细胞表面抗原CD33表达下降，CD11b表达升高，统计学分析显示丹参酮?A对初治、复发APL原代细胞诱导分化能力与ATRA相当。由此说明，丹参酮?A不仅对初治、复发病例在体外具有与ATRA相当的诱导原代APL细胞向终末细胞分化的作用，而且对ATRA继发耐药的病例亦具有良好的诱导分化能力。