【doc】亚硒酸钠和维生素E对被动吸烟小鼠精子形态的影响

【doc】亚硒酸钠和维生素E对被动吸烟小鼠精子形态的影响 亚硒酸钠和维生素E对被动吸烟小鼠精子 形态的影响 皖南医学院2005年第24卷第l期 文章编号:1002—02l7(2005)01—0027—03 亚硒酸钠和维生素E对被动吸烟小鼠精子形态的影响 徐庆阳,彭弋峰 ? 27? (皖南医学院附属弋矶山医院生殖医学研究所,安徽芜湖241001) 摘要:目的研究亚硒酸钠和维生素E对被动吸烟小鼠精子形态的保护作用小鼠置于自制被动吸烟箱 中.每日吸烟两次.用药组小鼠分别给予亚硒酸钠(0.3mg/kg),维生素E(30mg/kg),亚硒酸钠(0.3mg/kg)加维 生素E(30n/kg)灌胃.连续35d.取附睾精子观察精子畸形率,测量睾丸,附睾脏器指数,光镜下观察睾丸组织 显微结构的变化.结果给药组小鼠精子畸形率显着降低(P<0.05.P<001),脏器指数没有显着性变化(P> 0.05).吸烟组睾丸组织的显微结构出现不同程度的改变.结论亚硒酸钠,维生素E对被动吸烟小鼠精子形态 起保护作用. 关键词:亚硒酸钠;维生素E;被动吸烟;小鼠;精子形态; 中图分类号:R3211;R97725文献标识码:A 吸烟对雄性生殖系统的危害性国内外学者已进 行了大量的研究,一般认为,吸烟可引起睾丸,附睾 损伤_lJ,精子总数,密度,活动精子总数,正常形态 精子百分比降低J.香烟的生殖毒性研究已证实 主动吸烟和被动吸烟均可引起动物及人精子畸形的 增加.但对如何减少吸烟尤其是被动吸烟对精子损 伤的研究很少.既往的研究认为13-5],维生素E和 硒可通过多种途径对精子形态,功能及附属性腺起 保护作用.我们给被动吸烟小鼠服用亚硒酸钠,维 生素E,观察对精子形态和附属性腺的保护作用. 1材料与方法 1.1材料 1.1.1动物选用健康雄性昆明种小鼠(由江苏省 江宁县青龙山动物繁殖厂供应,许可证号:SCXK [(苏)2002—0018],体重25,30g. 1.1.2药物亚硒酸钠片,1rag/片,山东菏泽希 力药业有限公司生产(批号:021014);维生素E胶 丸,100rag/丸,厦门鱼肝油厂生产(批号: 03050802);福临门牌大豆色拉油,东海粮油工业有 限公司制造. 1.1.3纸烟市售某品牌过滤嘴香烟,每支含烟气 烟碱量1.3mg,焦油15mg. 1.1.4自制静式被动吸烟箱(体积:130cm×70cm ×70cn1). 1.2方法 1.21方法小鼠随机分为5组,每组10只:正常 对照组,吸烟组,吸烟加亚硒酸钠组,吸烟加维生素 E组,吸烟加亚硒酸钠加维生素E组.参照王淑 玲l_6J所用方法,各吸烟组置于被动吸烟箱中,每天 吸烟两次,每次30min,每次点燃4支香烟,染毒后 充分通风,连续染毒35d.亚硒酸钠用蒸馏水溶解 供小鼠灌胃,其用量为0.3mg/kg体重(浓度为 0.03rag/m1).维生素E用色拉油溶解供小鼠灌 胃,其用量为30mg/kg体重(浓度为3mg/m1).正 常对照组,吸烟组和亚硒酸钠组每日等量色拉油灌 胃.染毒的第36d所有的小鼠以颈椎脱臼法处死. 1.2.2方法及指标?睾丸,附睾脏器指数: 小鼠处死前称取体重,之后立即解剖,天平称取 睾丸,附睾总重,计算每100g体重睾丸,附睾重量. ?精子形态观察.精子悬液制备:取双侧附睾,置于 2ml生理盐水(37?预温)的小平皿中,用眼科小剪 子剪碎,吸管吹打,四层擦镜纸过滤.精子畸形率观 察:取部分精子悬液涂片,晾干后HE染色.每片记 数1000个精子,参照张希桥法计数头,颈,体,尾 及混合型精子畸形数,计算畸形率(%).?睾丸病 理组织学观察:小鼠右侧睾丸置于10%中性缓冲福 尔马林液中固定,石蜡切片,HE染色,光镜下观察. 1.2.3统计学分析所有数据采用均数?标准差 (?s)示,多组间比较采用单因素方差分析,各 组间比较采用q检验,显着性水准均为P=0.05. 2结果? 收稿日期:2oo4—08—3o2?1各组小鼠精子畸形率观察总精子畸形率吸 作者简介:徐庆阳,女,1978年生,2oo2级硕士研究生;彭弋峰, 男,副 烟组与其他各组相比增高或显着性增高(P<0.05, 教授,主任医师硕士生导师.P<0.01);精子头部,体部,尾部畸形各组间均有差 羹直堕堂睦堂王笪2童垦l—塑 异(P<005+P<O01),组问两两比较,差异各不(P)o5).#N4,鼠精于畸形率丧 相同.精子颈部和混台烈畸形各组间比较无差异 裹l小鼠精干畸形率比较(了=. 注:与哑熘组相P<005??P<0Ol;与亚硒酸钠掘帽比.AP<005.??P(00I:与-l 解铺加难l牛采E组相比 ]P<0OS 22各组小鼠睾丸,附睾脏器指数测量结果小鼠 睾丸,附睾的脏器指数.各组间单因素方差分析无统 计学意义(P>005).见表2 表2小鼠皇丸,附睾的脏器指数比较(了i,gll00 23睾丸组织病理观察正常对照组及3个用药 组睾丸组织结构形态基率无异常,曲细精管内各级 生精细胞发育正常,排列整齐,管腔内见大量成熟精 子.曲细精管问可见疏松的间质组织.单纯吸烟组 小鼠的睾丸出现病理性改变,曲缃精管上皮排列紊 乱,各级生精细胞,精子细胞和精子均减少.见图L 围l睾丸组织扁理切片照片HE400 :正常时照组.啦娴加弧硒艘铺纰.0咀棚l维生书E 0:啦蛔JJ"亚硒酸钠j缔一l索E自i 3讨论 香烟烟雾的成分十分复杂.其所尼古丁,镉, 铅氧自由基等可以通过不同的途径搦街雄性生殖 系统,影响生殖缃胞并造成人悼生殖细胞遗传物质 的损伤.从而影响生育井对于代造成潜在的不利影 响.本研究中,吸烟组与对照垣相比.小鼠精子畸形 率显着性增高,这与文献报道哦烟者畸形精子高于 非吸烟耆相一致Z,8J,证实吸烟对小鼠精子毒性作 亚硒酸钠为无机硒化台物,硒是人体必需的微 量元素.缺硒被认为是【起^类精予质量下降的原 圃之一?在不育者饮食中添加适量的硒,可明显改 善精子活力和活卒.并降低精子畸形率1:饲以低 硒饮食的动物显示精于中段结掏异常.可致尾部断 裂及活动'陛差,使受精率降低.人类精子线粒体囊 泡中存在一种特异谷眦肽过氧化物酶(giutathione peroxidase,GSH—Px),称为磷脂过氧化氢谷胱甘肽过 氧化物酶(phosphollpidhydmperoxideglutathione peroxidase,PHGPx),硒是其重要组成成分在精细 胞PHGPx具有与其他GSH.Px相同的过氧化物酶 活性,可保护发育的精子细胞免受氧亿损伤一.在 精子成熟的过程中,其过氧化物酶活性逐步失活,最 终成为线粒体结构蛋白的一部分,对维持精子鞭毛 结构和功能的完整性有重要作用=由此,我们推测, 本实验中精子尾部畸形在吸烟加亚硒酸钠组和吸烟 加亚硒酸钠加维生素E组中显着降低可能与添加的 亚硒酸钠有关:香烟烟雾中的氧自由基可与精于细 胞膜中多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化.致精子 膜受到损害,精于形态改变,精于皤力下p甚至死 亡.硒是GSH—Px的必需成舒,可通过GSI4.Ix破 坏细胞内过氧化物.防止=自由基的形成并阻止 其对细胞内遗传物质的损伤生索C是细胞膜的 结构成分,能与自由基结台成蕴t-案l自由基.将自 由基阻挡在细咆质"外,护脆膜免受自由基攻 皖南医学院2005年第24卷第1期 击和过氧化损伤.硒与维生素E具有协同抗氧化作 用,两者拮抗作用机制和场所互补,能制止脂质过氧 化物造成的精子损伤.另外,维生素E,硒也可以对 抗烟雾中镉,铅等重金属对精子形态的损伤.本实 验中各用药组精子畸形减少,在同时给予亚硒酸钠 和维生素E时,作用更加明显,说明这两种药物可通 过不同的机制消除吸烟对精子形态的损伤.根据文 献报道,吸烟者中可发现睾丸萎缩,重量减轻_l.J. 本次研究中,吸烟组小鼠睾丸,附睾的脏器指数与其 他各组相比虽有降低,但无显着性差异.这可能与 研究时间较短,小鼠性腺尚未发生显着性改变有关. 但是,睾丸组织病理学已发生改变,附睾畸形精子显 着增加.已知吸烟可引起睾丸组织镉浓度增高,睾 丸对镉的损伤较为敏感,可能是由于睾丸对镉亲和 力较强,镉破坏血睾屏障,进而破坏曲细精管内精原 细胞,影响了正常生精功能.动物实验_5J,硒可 以拮抗二氧化镉对去势豚鼠附属性腺的减重作用, 这是由于硒能直接影响镉的代谢,拮抗镉的毒性作 用.维生素E也可以通过抗突变等多种途径对睾丸 组织起到保护作用. 本次研究发现亚硒酸钠和维生素E对被动吸烟 小鼠精子形态有保护作用.今后还需要进一步研 究,确认两药对被动吸烟雄性个体生殖系统的保护 作用及其机制. ? 29? 参考文献: [1]AydosK.(;uvenMC.CanB.et"Nicotinetoxicit3'totheultra— rLlctureofthetestisinrats[J].BjuInt.2001.88(6):622— 626 [2]KunzleR.Ml~ellerMD.HanggiW.etalSemenQualit5'ofMale Smokersal1dNonsmokersinInfertileCouplesJ]FertilSteril. 2003.79(!):287—291. 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EffectofsodiumseleniteandvitaminEonspermmorphology inpassivesmokingmouse XUQing—yang,PENGYi—feng (InstituteofReproductiveMedicineResearch,YOishanHospital, WannanMedicalCollege,Wuhu241001,China) Abstract:ObjectiveTostudytheprotectiveeffectofsodiumseleniteandvitaminEonspermin Dassivesn1ok— ingmice.MethodsMicewereconfinedinaself— madepassivesmokingcabinetgivingpassivesrnokingtwicea day?Themiceinmedicationgroupweregivenperossodiumselenite(0.3mg/kg),vitaminE(3 omg/kg),and vitaminE(30mg/kg)withinasessionof35days.Spermabnormalityrateofepididymideswas measured,theor— gancoefficientoftestisandepididymidesforeachgroupwasdeterminedandthemicrostructu rechangesoftestis wasobserved.ResultsSpermabnormalityrateinmedicationgroupdecreasedsignificantly(P<0.05,P< 0?01),whilenomarkeddifferencewasfoundinorgancoefficient(P>0. 05).Themicrostructureoftestes changedtoacertainextent.ConclusionSodiumseleniteandvitaminEcanprotectspern1n1orphologyfromthe damagecausedbypassivesmoking. Keywords:sodiumselenite;vitaminE;passivesmoking;mouse;spermmorpho1ogy