抗氧化肽的研究进展

抗氧化肽的研究进展 维普资讯 ////0>. 第 期总第 期 农产品【 :?学刊 年 月 】. 文章编号:? ?抗氧化肽的研究进展 宋春丽 齐齐哈尔大学黑龙江省普通高校农产品加 重点实验室,黑龙江齐齐哈尔 摘要:随着对小肽生理活性的深入认识及其抗氧化重要性的发现,动植物蛋白水解物的抗氧化活性的研究受到 关 注。介绍 肽的抗氧化性测定方法,综述 以动植物蛋白为原料,制备抗氧化肽、分离纯化的方法,及其氯基酸组 成。 关键词:蛋 质;水解物;抗氧化 中图分类号:. 文献标志码: , , , , : . ,. . : ; ; 随着对蛋白酶解技术的深入研究,动植物蛋白水 清除 自由基、羟基自由基、过氧自由基及高氧 解所得的具有一定生理活性的功能性多肽及寡肽产品 自由基的能力进行了测定,该肽清除上述 种游离基 被广泛开发利用,如具有抑制血压升高的食品,及有 的值分别为 . , . , . 和 . : 特殊氨基酸组成的、可以作为患者营养补剂的寡肽 ? 等人 年 研究表明,氨基 等。随着人们发现某些蛋白质具有清除生物体内过量 酸序歹 为 ? ? ? ? ? ? ? ? ? 的游离基,抑制脂质氧化的作用后,肽的抗氧化性的 ? ? ? ? ,分子量为. 的厚壳贻 研究成为一大热点。目前,对以多种动植物蛋白为原 贝 水解物,具有优于及 一 料,制备高效、低毒的天然抗氧化肽的研究,已经取 生育酚抑制 氧化的能力:利用电子自旋捕 得的一定的成果。本文对抗氧化肽的研究进展进行厂 集仪 测定得知,质量浓度为/ 的贻 综沭 贝水解物可以清除 . %的羟 由基,这与 对 羟自由基的抑制效果相近。此外,经纯化所得的抗氧 肽的抗氧化性测定方法 化肽同样可以清除超氧自由基和碳白 基,但是清除 能力不及目前抗氧化活性的测定方法有硫氰酸铵法、 自 基清除能力的测定、还原力测定、羟基自 抗氧化肽的制备方法 分离纯化及其氨基酸组成 由基清除能力的测定、清除超氧阴离子能力的测定、 目前多采用控制水解参数 如蛋 酶、水解度 抑制脂质氧化及螯合铜离子的测定等。在动植物蛋白 水解物抗氧化性测定的过程中,通常以 一生育酚、 等 的方法制备具有不同分子量分布 陶的蛋白水解及作为对照。 物 通过测定得知,抗氧化肽的分子量分布范嗣均在? 等人 年 利用 种蛋白酶以下,其中以 左右的居多。鉴 水解新西兰好吉鱼 蛋白制得一系 /肽,并 于抗氧化肽的分子量分布存在于较小的范围,大此通 将所得肽经过超滤及色谱法分离纯化,其中由 个 常采用超滤的方法将不同分子量范围的酶解肽分离 氨基酸残基组成,分子量为的肽具有较 后,再利用连续色谱法将酶解肽进一步地分离纯化以 制备抗氧化肽。此外,研究中通常测定抗氧化肽的氨 /.一生育酚更强的抑制脂质氧化的能力,同时对该肽 收稿日期:? ? 作者简介:宋舂丽 一 ,女,山东人,硕士,助教,研究方向:食品化学维普资讯 ////. 年第 期 宋春丽:抗氧化肽的研究进展 一 ,一 及反相高效液相色谱 基酸组成,以便于进一步了解肽的抗氧化性与其结构 对其分离纯化。分离得到 种具有较强抗氧化活性的 之间的关系。 肽,其结构特征为:个氨基酸残基组成, . 植物蛋白水解物抗氧化活性的研究 以大豆、羊栖菜、鹰嘴豆等为原料制备抗氧化 一末端含有亮氨酸残基。 等 人 年 研究了蛋清肽的抗 肽。 氧化活性。研究表明,蛋清经胃蛋白酶水解 后, ?年,年 , ? 所得产物表现出较强的血管紧张肽转化酶,年 和 年 抑 制 能力 。氨 基酸组 成 为 ? ? ? ? 对大豆抗氧化肽进行了研究。 ?等人利用来自芽孢杆菌的蛋白酶? ? ? ?的肽,具有较强的抑制能 水解大豆蛋白来制备抗氧化肽,在所得产物中,氨基 力,同时表现出较强的游离基清除能力。 酸组成为 ? ? 的肽具有最强的抗氧化性。等人 年 研究了牛蛙水解产物的抗 氧化活性。实验采用连续色谱法纯化水解物,得到氨 ? , 以大豆分离蛋白为 原料,以胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰凝乳蛋白酶及 基 酸组 成为 ? ? ? ? ? ? ?? ,, 作为水解酶,? ? ?? ? ? ? ? ,分子量为的肽。试验表明,该肽对 、羟自 水解物的水解度控制在 . %. %。结果表明,大 豆蛋白水解物 木瓜蛋白酶酶解产物除外 及原料大 由基及超氧游离基的清除作用与 相近。此外,水 豆分离蛋白均能在脂质体中抑制 丙二醛和 解产物在推迟 氧化时,较 一生育酚有更明显 的作用。 硫代巴比妥酸的反应产物 的形成。其中,大豆分离等人 年 采用不同的蛋白酶水解 蛋白经过热处理后 ,再经胰凝乳蛋 白酶及水解所得的水解产物抑制脂质氧化的效 对虾,其中胃蛋白酶水解所得产物的抗氧化性最强。 果最佳。 采用离子交换色谱、凝胶过滤、高效液相色谱 等人对大豆分离蛋白的胃蛋白酶水 法纯化抗氧化肽,并测定了 种抗氧化肽的结构分别 为: ? ? ,? ? 和? ? ?。 解物的凝胶形成能力及其清除 的能力进行了研 究。结果表明,当大豆分离蛋白原料及其水解物的比.一 等人年 研究表明,鲭鱼经蛋 例为 : ,且向该混合物中添加转谷氨酰胺酶时, 白酶 ;. . .水解所得的水解产 混合物表现出较强的清除 自由基的能力。 物具有较强的抑制亚油酸氧化及清除 自由基的 能力。实验分离纯化得到 种主要的抗氧化肽的分子 年 对羊栖菜水解产物 的抗氧化活性进行了研究。实验以酶解产物得率、总 量分别为,, ,其中分子量为酚含量及肽的抗氧化效果为指标,研究了 值、温 肽的抗氧化活性最强。 ‘ 度及蛋白酶对水解效果的影响。结果表明,最佳水解 等人 年 对欧洲康 吉鳗的胰蛋白酶水解产物超滤分级后, 条件为: 值为 . ,酶解温度为? ?,%的 和 %的,酶解时间为,此时所 采用连续色谱法分离纯化,得到具有较高抗氧化能力 得肽具有较高的酚含量及清除 和过氧化氢的能 的肽 体外实验,其阻止脂质氧化的能力优于 一 力。 生育酚 ,该肽有 个氨基酸残基组成,分子量 李艳红等人 年 研究了酶与底物的比值 为 。 【 】 】 、酶解温度和酶解时间对制备抗氧化肽工艺等人 年 通过研究证实蛋白酶种 类、水解度及预处理条件均影响水解产物的抗氧化能 的影响,并最终确定了酶解鹰嘴豆蛋白制备抗氧化肽 的工艺条件。该条件下制备的鹰嘴豆酶解产物还原能 力。实验分别采用 , 对竹荚鱼进 力和超氧阴离子捕获率分别为 .和 . %。 行水解,所得的水解产物的水解度分别为 %, % . 动物蛋白水解物抗氧化活性的研究 和 %。对同一水解度的水解产物, 及 以蛋清、蛋黄、牛蛙、对虾 、鲭鱼 的酶解产物表现出不同的抗氧化能力,前者 、欧洲康吉鳗、竹荚鱼 较后者具有较强的抑制 的能力,但是螯合、金枪鱼 、新西兰好吉鱼 的能力不及后者。 为原料制备抗氧化肽。 ? 等人 年 将约含 %蛋白? 年 等人以去除卵磷脂的蛋 质的金枪鱼脊骨,采用酶解的方法制备抗氧化肽。水 黄为原料,经 酶解后制备抗氧化肽。采用超 解用酶为 , 一胰凝乳蛋白酶,中性蛋白酶、 滤的方法 分子量为 , , 将水 胃蛋白酶及胰蛋白酶。研究表明,由 个氨基酸残 基组成 ? ? ? ? ? ? ? ? ? 解产物分级后,采用连续色谱法 包括 ?维普资讯 ////.? 农产品加 ?学刊 年第 期 : ?.? ??,分子量为 的肽,具有较 ? , ,.. ? 】 强的抗氧化活性及游离基清除能力。 ? . 发酵产物抗氧化活性的研究 除了采用上述动植物蛋白水解制备抗氧化肽的方 【 .&,, , 法外,一些研究试图利用发酵的方法制备抗氧化肽,: ? . 如用牛乳、紫贻贝、大豆的发酵产物制备抗氧化肽。 ? , , ,. ? 】 研究表明,发酵产物具有较强的抗氧化能力。???? , 等人年 利用保加利亚 ? 菌种发酵牛乳 ,发酵产物经. ? , , 。: ? .一 凝胶过滤色谱及反相色谱分离纯化后制 ? . .备抗氧化肽。通过测定,该肽的氨基酸序列为 . ,? 唱一 ? ? ? ? ?? ?? , 其 , : ? . 清除 的能力不及,但该肽在 一胡萝卜 , , ,. ? 】 素漂白法中显示出很强的抗氧化性,其抗氧化能力较 ?强 倍。 】. ? 等人 年 对紫贻贝发酵产. , : , ? , ?, ?,. 物进行过筛、电渗析脱盐及冷冻干燥等一系列方法处 【 理后,采用连续色谱法分离纯化得到抗氧化肽,其分 . 子量为 。当该肽浓度为 .时,显示出. 很强的抗氧化性,可以清除 . %的羟自由基。 & , , ,?. 刘明等人 年 用同态发酵法制备出的大 李艳红,刘坚,张涛,等.酶解瞧嘴豆蛋 制备抗氧化 豆抗氧化肽,具有较强的还原能力,能清除羟基自由 肽 艺优化研究 .农业: 程学报,: ? 基,抑制邻苯三酚白氧化,并能够对脂质体过氧化和 . 油脂过氧化具有一定的清除能力,其中,大豆抗氧化 ? , ? , ? , . 【 】肽的总抗氧化能力为 .,对羟基自由基的清除 ?. 率达到. %,抑制邻苯 酚自氧化能力达到 , , : ./ ,抑制脂质体过氧化 率为 . %,对油 . 脂过氧化抑制抑制率为 %。 , ,?,. ? 【 】 ? 结束语. ? 同内外制备抗氧化肽的原料来源十分广泛,从大, , : , ? . 宗原料 如大豆 的水解产物的抗氧化作用的研究逐 . .渐转向多种海洋鱼 类的水解产物的抗氧化性的研究。.? ,, ,:?. 制备方法从酶解法拓展到所得产物风味更好的发酵 . 】 法。分离纯化通常采用超滤、柱层析和 等方 . , 法,具有一定的局限性。通过对抗氧化肽的氨基酸测 , : ? . 序及分子量测定得知,抗氧化肽多数由 个以下的 【 】 , ,.氨基酸残基组成。且 一末端多为支链氨基酸。 . 【 . , , :?. 参考文献: . . . 】 ,, ? . ? ’., , ,:?.. , , , 【 】 , , ?. : 一 . , ? . ? , ..? & , ,,?: ? . ., , , 下转第 页