门静脉转流下大鼠门静脉缺血对肝脏能量代谢的影响

门静脉转流下大鼠门静脉缺血对肝脏能量代谢的影响 门静脉转流下大鼠门静脉缺血对肝脏能量代谢的影响 作者:冯春林 别平 林恒 谭轶峰 黄波 李昆【摘要】 目的 探讨在 门静脉转流下大鼠门静脉缺血后肝脏能量代谢变化。方法 在门静脉 转流下阻断门静脉不同时间后，观察大鼠存活率、肝细胞线粒体呼吸 活性、肝组织ATP含量及动脉血酮比值。结果 在门静脉缺血60、90 及0 min后7 d大鼠存活率分别为100%、100%及40%;缺血后肝脏能 量代谢功能明显受损，再灌注后24 h，门静脉缺血60、90 min两组 大鼠肝脏能量代谢功能已有明显恢复，而门静脉缺血0 min组仍维持 在低水平。结论 在门静脉转流下大鼠门静脉缺血90 min以内肝脏能 量代谢损害可逆，而门静脉缺血0 min则不可逆。 【关键词】 门静 脉缺血; 能量代谢; 大鼠 【Abstract】 Objective To study changes of hepatic energy metabolism after portal vein ischemia under portal vein bypass and discuss their relation with tolerance limit of rats. Methods Rat survival rate, hepatocytic mitochondrial respiratory function, hepatic ATP content and ketone body ratio in arterial blood were investigated at different time after portal vein ligation under portal vein bypass. Results The survival rate of rats at postoperative day 7 was 100%, 100% and 40% when they were subjected to 60, 90 and 0 minutes of portal vein ischemia. The hepatic energy metabolic function weakened markedly after ischemia but recovered evidently in groups subjected to 60 and 90 minutes of portal vein ischemia after 24 hours of reperfusion. While hepatic energy metabolic function remained at low rate in group with 0 minutes of portal vein ischemia. Conclusion Hepatic energy metabolic function is reversible in rats with portal vein ischemia within 90 minutes but irreversible in those with 0 minutes of portal vein ischemia. 【Key words】 Portal vein ischemia; Energy metabolism; Rats 在临床上，我们常常碰到侵犯 门静脉的肿瘤。为提高根治率，术中阻断并部分切除受侵门静脉段， 再行血管重建。因此，研究门静脉缺血对肝脏的影响具有重要临床意义和应用价值。研究表明门静脉血流阻断所致胃肠淤血及血流恢复后缺血再灌注损伤是影响肝脏耐受缺血时间的重要因素,1-2,。本研究以大鼠肝尾状叶引流门静脉血流来消除胃肠道淤血,3,，探讨门静脉血流阻断后肝脏能量代谢变化。 1 材料与方法 1.1 实验动物 Wistar大鼠168只，雌雄不限，220,250 g/只，由第三军医大学大坪医院动物中心提供。术前禁食 h，自由饮水，术后自由进食和饮水。手术均采用乙醚吸入麻醉，经腹部正中切口。 1.2 动物实验模型的制作 本实验动物模型根据文献,4,进行制作。 1.3 实验动物分组 分4组，每组42只。(1)假手术组(S组):行肝十二指肠游离，分离出门静脉各分支，不阻断，预定时间关腹。(2)门静脉血流阻断60 min组(P 60组)。(3)门静脉血流阻断90 min组(P 90组)。(4)门静脉血流阻断0 min组(P 0组)。 1.4 观察指标及方法 各组动物分别于缺血后0 h，再灌注1、6、24 h采集腹主动脉血及肝组织进行肝脏能量代谢指标的检测，每时相点6只动物。 1.4.1 存活率:每组10只动物，统计术后10 d生存率。 1.4.2 肝细胞线粒体呼吸活性:线粒体提取及活性测定分别采用Johnson差速离心法和Clark氧电击法，呼吸状态区别为S3、S4，两者之比即为呼吸控制率(RCR)，计算磷氧比值(P/O)。 1.4.3 肝组织ATP含量:采用生物发光法检测。 1.4.4 动脉血酮体比值:动物在预定时相点剖腹后，从腹主动脉穿刺抽血1.5 ml，按文献,5,所介绍的方法测定血酮比值(AKBR)。 1.4.5 肝脏病理组织学观察:术后预定时相点活杀取肝组织，10%甲醛固定24 h，脱水、透明、石蜡包埋、切片及苏木精 伊红染色，光镜下观察。