银黄解毒胶囊质量标准研究

银黄解毒胶囊质量标准研究 银黄解毒胶囊质量标准研究 理财投资平台 [摘 要]目的:建立银黄解毒胶囊的质量标准。方法:采用TLC法对银黄解毒胶囊中茯苓、金银花、连翘进行了薄层鉴别;采用HPLC法测定蒙花苷的含量，为银黄解毒胶囊的质量控制提供依据。结果:薄层鉴别方法专属性强;在10.1,50.5μg范围内蒙花苷峰面积与进样量线性关系良好，r=0.9998;样品加样回收率为99.75%(n=6)。RSD为0.48。结论:所建立的方法准确可行，重复性好，可有效控制银黄解毒胶囊的质量。 [关键词]银黄解毒胶囊;质量标准;蒙花苷;高效液相色谱法 该制剂是由野菊花、茯苓、金银花、连翘、板蓝根、甘草等十三味中药材组方而制成的胶囊剂。具有滋阴清热，解毒利湿功效，用于病毒引起的带状疱疹，单纯性疱疹等症。为控制本制剂的质量，实验采用薄层色谱法对制剂中的茯苓、金银花、连翘进行了鉴别，并以蒙花苷为指标，用高效液相色谱法测定制剂中野菊花的含量。 1 仪器与试药 (1)仪器。LC-15C高效液相色谱仪(日本岛津);SPD-15C紫外检测器(日本岛津);Wondasil C18 柱 (4.6mm×150mm，Φ5μm)(日本岛津); (2)试药。高效液相色谱用试剂均为色谱纯;薄层层析用试剂为分析纯;茯苓对照药材(120925-200407)、连翘苷(110821-200711)、绿原酸对照品(110753-201314)、蒙花苷对照品(111528-201308)均由中国食品药品检定研究院提 供。自制银黄解毒胶囊，批号:20140106、20140107、20140108。 2 方法与结果 2.1 鉴别 (1)茯苓的鉴别。取本品内容物10g，加乙醚50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取茯苓对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录? B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20?5?0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液-乙醇(4?1)混合溶液，在105?加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。结果见图1。 (2)金银花的鉴别。取本品内容物10g，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。另取绿原酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录? B)试验，吸取供试品溶液10,20μl、对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水(7?2.5?2.5)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 (3)连翘的鉴别。取本品内容物10g，加石油醚(30?,60?)30ml，密塞，超声处理15分钟，滤过，弃去石油醚液，残渣挥干石油醚，加甲醇20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。另取连翘苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录? B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(8?1)为展开 剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105?加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 2.2 含量测定 (1)色谱条件与系统适用性试验。填充剂:十八烷基硅烷键合硅胶，色谱柱为Wondasil C18 柱(4.6mm×150mm，Φ5μm)柱;流动相:甲醇-水-冰醋酸(26?23?1)为流动相;检测波长为334nm。流速1.0ml/min;柱温36?;进样量10μl。理论板数按蒙花苷峰计算，应不低于2000。 (2)对照品溶液的制备。取蒙花苷对照品适量，精密称定，加甲醇溶解(必要时加热)制成每1ml含25μg的溶液，即得。 (3)供试品溶液的制备。取本品内容物1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密甲醇100ml，称定重量，加热回流3小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液5ml，加甲醇至10ml即得。 (4)阴性对照溶液的制备。取阴性样品(不含野菊花药材)1g，精密称定，同法制成阴性对照溶液。 (5)测定法。按上述色谱条件，精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，测定色谱图，见图4,6。从色谱图可见，其他成分对蒙花苷的测定无干扰，符合测定。 (6)线性关系考察。精密称取蒙花苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含101μg的溶液，作为对照品储备液备用，分别精密量取上述蒙花苷对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，各精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积A为纵坐标，以浓度C为横坐标，按最小二乘法进行线性回归，其回归方程为Y=34480×2081.7，r=0.9998。结果明蒙花苷在10.1,50.5μg/ml范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系。 (7)精密度试验。精密吸取对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，重复进样6次，记录色谱图，结果显示仪器具有良好精密度，RSD=0.39%。 (8)稳定性实验。取对照品溶液和供试品溶液分别于0、2、4、8、12、24小时各精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，量取峰面积，计算RSD%。RSD分别为0.72%和0.93%。由试验结果可知，本品在室温自然光条件下存放，在24小时内基本稳定。 (9)重复性试验。取样品(批号:20140108)平行制备6份供试品溶液，按上述色谱条件测定峰面积，计算出蒙花苷的含量，结果表明有良好重复性，RSD=0.99%。 (10)加样回收率试验。取已知含量的样品适量，精密称取6份，分别加入一定量的蒙花苷对照品，制备成供试品溶液，按上述色谱条件测定峰面积，得出蒙花苷的回收率。结果见表1。 由以上试验结果可知，该方法回收率良好，可用于本品的蒙花苷含量测定。 (11)样品测定。取样品3批，分别制成供试品溶液，精密吸取供试品溶液与对照品溶液各10μl，按上述色谱条件测定峰面积(n=6)，对样品中蒙花苷的含量进行计算，结果见表2。 3 结 论 (1)在检测波长的选择中，参考《中国药典》2010年版一部野菊花项下含量测定方法，对蒙花苷对照品溶液进行紫外扫描，在(334?2)nm处有最大吸收，故选择334 nm作为测定波长。 (2)茯苓、金银花、连翘的薄层色谱鉴别专属性强，易操作，无干扰，分离效果好;高效液相色谱法测定野菊花的含量，提取方法简便，重复性良好，回收率高。可作为本制剂的质量控制标准。