醋酸铅对生长期SD大鼠血压的影响.doc

醋酸铅对生长期SD大鼠血压的影响.doc 醋酸铅对生长期SD大鼠血压的影响 作者:熊伟，万伟，赵英，罗学港，雷德亮，伍效琼，孔杏云 【关键词】 醋酸铅;血铅浓度;动脉收缩压 ,摘 要, 目的:研究铅暴露对生长期SD大鼠血压的影响， 探讨铅对生长期SD大鼠血压的剂量一效应关系、时间,效应关 系。方法:使用6周龄雄性SD大鼠75只，随机分为5组，每组15 只，第1、第2、第3、第4组为实验组(n=15,共计60只)和第5组 为对照组(n=15)。4个实验组动物分别用15 mg,kg、30 mg,kg、 45 mg,kg、90 mg,kg的醋酸铅，采用灌胃方式经消化道染毒，1 次/d;对照组动物以等量的双蒸水灌胃，1次/d。实验组和对照组均 采用普通饲料喂养，每组大鼠随机分为3个小组，各5只，每小组 以1.1、1.2、1.3;2.1、2.2、2.3;3.1、3.2、3.3;4.1、4.2、4.3; 5.1、5.2、5.3加以标注。在第10天时测1.1、2.1、3.1、4.1、5.1小 组内大鼠尾动脉收缩压，随后将各组动物处死并进行血铅测定。在 第30天时，对1.2、2.2、3.2、4.2、5.2各组大鼠进行同第10天时 的处理;第90天时，对1.3、2.3、3.3、4.3、5.3各组大鼠动物进行 同第10天时的处理。结果:在同一剂量染毒情况下，在一定时间 内，SD大鼠血铅浓度随染毒时间的增加而逐渐升高;在同一染毒时 间内，SD大鼠血铅浓度随剂量的增加而升高。在同一染毒剂量情况 下，在一定时间内，SD大鼠尾动脉收缩压随染毒时间的增加而升 高;在同一染毒时间内，SD大鼠尾动脉收缩压随剂量的增加而升 高。结论:血铅浓度与尾动脉收缩压之间存在正性相关关系。 ,关键词, 醋酸铅;血铅浓度;动脉收缩压 The Influence of Lead Acetate on Arterial Pressure in Growing Rats Abstract:Objective To investigate the influence of lead on arterial pressure in growing rats,to explore the dosage effect and time effect of lead exposed to by arterial pressure in growing rats.Methods 75 male six weeks old rats were stochastically divided into five groups,and the groups of NO.1、NO.2、NO.3 and NO.4 were experimental group and group NO.5 was control group,15 rats in each group.Four experimental groups rats were caused poisoned by intragastric administration respectively using 15 mg,kg，30 mg,kg，45 mg, kg，90 mg,kg lead acetate once aday.The control group rats were intragastriclly administered with equal double distilled water once a day.The experimental groups rats and control group rats were fed with common feedstuff and double distilled water randomly.Furthermore,rats in each group were stochastically divided into three subgroups,and the subgroups were marked with 1.1、1.2、1.3;2.1、2.2、2.3;3.1、 3.2、3.3;4.1、4.2、4.3;5.1、5.2、5.3 in turn.On the tenth day following the experiment,the blood tension of arteria caudilis and lead contend of blond are surveyed with the rats in subgroups 1.1、2.1、 3.1、4.1、5.1.On the 30thday,the same treatments were adopted as those on the 10thday in the subgroups 1.2、2.2、3.2、4.2、5.2.On the 90thday,the same treatments were adopted as those on the 10thday in the subgroups 1.3、2.3、3.3、4.3、5.3.Results Using the same dosage of lead within certain period of time,the lead density in blood of SD rats increased gradually as the time of lead exposure extended;And within the same time of lead exposure,the lead density in blood of SD rats increased gradually as the lead dosage increased.Using the same dosage of lead within certain period of time,the systolic arterial pressure of arteria caudilis in SD rats increased gradually with the time of lead exposure extending;At the same time,the blood pressure of arteria caudilis increased gradually with the dosage of lead increased.Conclusion There is a positive correlation relationship between the the lead density in blood of SD rats and systolic arterial pressure of arteria caudilis in SD rats. Key words:Lead acetate;Lead density in blood;Systolic arterial pressure 1 材料和方法 1.1 材料 1.1.1 实验动物 6周龄健康雄性Sprague,Dawley大鼠75只 (体重60 g~100 g)，纯系，中南大学湘雅医学院实验动物学部提供。 1.1.2 主要试剂和设备 乙酸铅分析纯(中国湘中地质实验研究 所):HX?型鼠尾动脉血压仪(中南大学湘雅医学院生理学教研室生 产)，原子吸收分光光度计(沈阳分析仪器厂生产，型号WXY402)。 1.2 实验方法 1.2.1 动物分组与模型制备 6周龄雄性SD大鼠75只，随机 分为5组，每组15只，第1、第2、第3、第4组为实验组(n=15)和 第5组为对照组(n=15)。4个实验组动物分别用15 mg,kg、30 mg ,kg、45 mg,kg、90 mg,kg的醋酸铅，采用灌胃方式经消化道染 毒，1次/d;对照组动物以等量的双蒸水灌胃，1次/d。实验组和对 照组均采用普通饲料喂养，双蒸水自由饮用。每组大鼠随机分为3 个小组，每小组各5只，每组以1.1、1.2、1.3;2.1、2.2、2.3; 3.1、3.2、3.3;4.1、4.2、4.3;5.1、5.2、5.3加以标注。在第10天 时测1.1、2.1、3.1、4.1、5.1小组内大鼠尾动脉收缩压，在第30天 时，对1.2、2.2、3.2、4.2、5.2各组大鼠进行大鼠尾动脉收缩压测 定;第90天时，对1.3、2.3、3.3、4.3、5.3各组大鼠动物进行大鼠 尾动脉收缩压测定。 1.2.2 尾动脉测血压的方法和原理如下 用环形气囊套住SD大鼠尾根部，并在其后捆绑一压力传感器。该传感器连接于心电图机。环形气囊上连接有一血压计，当环形气囊未充气时，尾动脉正常搏动，心电图上记录有压力传感器传来的压力电信号。当向环形气囊打气阻断尾动脉血流时，被阻断下方尾动脉停止搏动，此时，心电图机上测不到信号。缓慢放气，直至尾动脉刚好搏动，心电图仪记录到信号，此时，血压计上观察到的数值为收缩压。 1.2.3 SD大鼠血铅测定方法 采用石墨炉原子吸收光谱法。 1.2.3.1 样品制备 第10天、第30天、第90天处死动物(灌注)时取右心房内静脉血1 ml加入含有0.5,的肝素钠溶液30 μl抗凝管中，振摇混匀，用微量取液器取40 μl静脉抗凝血置于盛有0.1,TritonX100溶液0.32 ml的带盖离心管中，充分摇匀，然后加入1,硝酸40 μl，混匀。样品置冰箱待测。 1.2.3.2 质量控制 所有容器用3%硝酸浸泡48 h，做除铅处理;标本的盛放、处理过程中均应避免环境的污染，以标准品做质量控制。采血样标本时应充分摇匀，避免凝固，否则会导致实验结果偏低。 1.2.4 资料收集 动物适用性喂养3 d后，对每小组动物进行编号标记。分别在第10天、第30天、第90天时，各测量25只SD大鼠的尾动脉收缩压并做纪录，其结果如下。 2 结果 2.1 尾动脉收缩压的测定结果 第10天、30天、90天各剂量组SD大鼠尾动脉收缩压:用尾动脉测量仪测SD大鼠尾动脉收缩压(单位:mmHg)。每个时间点,各个剂量组的样本数为5只。将尾动脉收缩压数值输入SPSS 12.0，采用OneWayANOVA分析,用LSD法分析资料，进行同一时间点，不同剂量组尾动脉收缩压的比较和同一计量组，不同时间尾动脉收缩压的比较，发现:第10天，45 mg/kg、90 mg/kg组与对照组(0 mg/kg)间尾动脉收缩压比较差异有显著性意义(P,0.05);第30天、第90天，不同剂量实验组与对照组(0 mg/kg)间尾动脉收缩压比较差异有显著性意义(P,0.05);同一染毒剂量组，第30天、第90天与第10天尾动脉收缩压比较差异有显著性意义(P,0.05)。其结果见表1。表1 醋酸铅染毒大鼠尾动脉收缩压(略) 注:“?”表示同一时间点，不同剂量实验组与对照组(0 mg/kg)间尾动脉收缩压比较差异有显著性意义(P,0.05)“?”表示同一剂量组，第30天、第90天与第10天尾动脉收缩压比较差异有显著性意义(P,0.05)。第10天、第30天、第90天各剂量组大鼠尾动脉收缩压比较,见图1、图2。 图1 同一剂量，不同时间尾动脉收缩压的比较(略) 图2 同一时间，不同剂量尾动脉收缩压的比较(略) 2.2 血铅的测定结果 第10天、第30天、第90天各组SD大鼠静脉血铅浓度:取右心房内静脉血抗凝处理后，用石墨炉原子吸收光谱法测SD大鼠静脉血铅值(单位:μmoL/L)。每个时间点,各个剂量组的样本数为5只。将血铅值输入SPSS 12.0，采用OneWayANOVA分析,用TamhaneT2法分析资料，进行同一时间点，不同剂量组血铅浓度的比较和同一剂量组，不同时间血铅浓度的比较，发现:同时间点，不同实验组与对照组(0 mg/kg)间血铅浓度相比较差异有显著性意义(P,0.05);同时间点，不同实验组间血铅浓度比较差异均有显著性意义(P,0.05);同一剂量组，第30天、第90天与第10天血铅浓度比较差异有显著性意义(P,0.05);同一剂量组，第30天与第90天血铅浓度比较差异有显著性意义(P,0.05)。其具体结果见表2。 表2 醋酸铅染毒大鼠右心房静脉血血铅均值(略) 注:“*”表示同一时间点，不同实验组与对照组(0mg/kg.bw)间血铅浓度比较差异有显著性意义(P,0.05)。“?”表示同一剂量组，第30天、第90天与第10天血铅浓度比较差异有显著性意义(P,0.05)。 3 讨论 我们建立生长期铅中毒SD大鼠模型，采用6周龄SD大鼠，相当于人儿童时期，而且SD大鼠对铅的药物动力学与人类相似,1,，是一种较好的模拟儿童铅中毒的动物模型。在我们的实验中，以15 mg/kg、30 mg/kg、45 mg/kg、90 mg/kg的醋酸铅灌胃导致的血铅水平均值从0.697 μmol/L~4.034 μmol/L，相当于儿童的轻度、中度、重度和极重度铅中毒,5,。表2显示:第10天时，各实验组生长期SD大鼠体内血铅浓度平均值为0.697 μmol/L,2.177 μmol/L，此浓度达到由美国国家疾病控制中心(CDC)制订出儿童铅中毒的诊断标准中的轻度至重度铅中毒,2,4,。第30天时，各实验组SD大鼠体内的血铅浓度随着染毒剂量的加重而升高，血铅浓度平均值由0.867 μmol/L升高至3.303 μmol/L。第90天时，各实验组SD大鼠体内的血铅浓度也是随着染毒剂量的加重而升高，其中最高剂量组90 mg/kg的血铅浓度平均值达到4.034 μmol/L,为极重度的铅中毒。结合图2可以看出:在同一染毒时间，生长期SD大鼠体内血铅浓度随着染毒剂量的加重而升高，这一结果与国内学者李凭建的报道一致,5,。在同一剂量染毒时，第10天与第30天、第90天组组间血铅浓度差异均有显著性意义(P,0.05)，结合图1可以看出:在同一剂量染毒时，血铅浓度随着染毒时间的延长有升高的 趋势。研究结果表1反映出:空白对照组SD大鼠尾动脉收缩压均值为106.93 mmHg,而各实验组尾动脉收缩压均值为111.20 mmHg,152.20 mmHg,其中90mg/kg组第90天尾动脉收缩压均值最高为152.20 mmHg。大鼠正常收缩压为82 mmHg,120 mmHg,6,。第10天，45 mg/kg、90 mg/kg组与对照组(0 mg/kg)间尾动脉收缩压比较差异有显著性意义(P,0.05);第30天、第90天，不同剂量实验组与对照组(0 mg/kg)间尾动脉收缩压比较差异有显著性意义(P,0.05);同一染毒剂量组，第30天、第90天与第10天尾动脉收缩压比较，差异有显著性意义(P,0.05)。结合图1、图2可认为:在同一染毒剂量情况下，在一定时间内，SD大鼠尾动脉收缩压随染毒时间的增加而升高;在同一染毒时间内，SD大鼠尾动脉收缩压随染毒剂量的增加而升高。学者王敏发现3岁,6岁儿童发铅与收缩压有正相关,7,。关于血铅浓度与血压的关系的报道较少，但发现高血压患病组其血铅水平高于血压正常人群组,8,,同时，临床上观察到急性铅中毒高血压的患者，在驱铅治疗后血压可下降,9,。本研究中将SD大鼠血铅浓度与尾动脉收缩压做双变量相关分析，Pearson相关系数r=0.796,P=0.000(双侧)，样本容量N,75。据此资料，可认为血铅浓度与尾动脉收缩压之间存在正性相关关系。即可说明铅中毒后，生长期SD大鼠随着体内血铅浓度的升高，大鼠动脉收缩压呈升高的趋势。