[word doc]正交设计优选菟丝子盐炙工艺

[word doc]正交设计优选菟丝子盐炙工艺 正交设计优选菟丝子盐炙工艺 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VO L.21NO.11时珍国医国药2010年第21卷第11期 正交设计优选菟丝子盐炙工艺 李春雨,郭晓伟,王树,常宁,张丹参 (河北北方学院,河北张家口075000) 摘要:目的优选菟丝子盐炙的最佳炮制工艺.紫外分光光度法测定菟丝子中总黄酮的含量为指标量,采用 Lo(3)正交实验设计法对菟丝子炮制工艺进行优选.结果优选出最佳盐炙工艺为:盐浓度3%,闷润2h,在130~C下炒 炙3min.结论优选出的菟丝子盐炙工艺合理可行. 关键词:菟丝子;炮制;盐炙;正交实验 D0I标识:doi:10.3969/i.issn.1008.0805.2010.11.107 中图分类号:R283文献标识码:B文章编号:1008—0805(2010)l1—2941-02 菟丝子始载于《神农本草经》,列为上品,是常用补益中药, 具有补肾益精,养肝明目,安胎之功效,其主要成分有黄酮,多 糖,糖苷,氨基酸及微量元素等:由于其质地坚硬,不利于粉 碎和煎煮出有效成分,故临床多以炮制品入药.菟丝子历代炮制 方法有黄精汁浸,盐炒,酒蒸,酒浸炒,清炒等十余种:现代研究 也取得一定进展,张素茂以浸出率为指标研究高压蒸煮法炮 制菟丝子的可行性.曾诠以总黄酮为指标,比较了盐炙,酒 炙,炒黄3种炮制方法.李波用正交设计以总黄酮为指标优选 了菟丝子黄酒炮制工艺.田树革对菟丝子盐炙品及100, 160%之间的烘制品中黄酮及多糖含量进行了比较研究.黄继 全对菟丝子的生品,不同方法炮制品的水浸出物做了比较研 究:张德昌等对药典中菟丝子所规定的”盐炙法”炮制提出商 榷,认为”酒炙法”比”盐炙法”更具临床实用意义.现在《中国药 典》收载的盐炙炮制方法为主流炮制工艺,但是仅有菟丝子盐炙 的要求和鼓起,香气等指标,没有其盐炙饮片客观科学的炮 制工艺和质量.本文采用正交设计优化菟丝子盐炙工艺,为 合理利用其炮制品提供依据. 1器材 UV一紫外可见分光光度计;DF一?集热式磁力加热搅拌器; 电磁炉;对照品:购白药品生物制品检定所;市售盐;药材由张垣 中药饮片公司提供: 2方法与结果 2.1含量测定方法的考察 2.1.1含量测定方法精密称取60?干燥的样品粉末(过80 目筛)1.5g于索氏提取器中,加8Oml乙醇回流3h,滤过,滤液 用乙醇定容至100ml,摇匀,作为供试品溶液.另精密称取 105~C干燥至恒重的芦丁对照品l0.4tug置50ml容量瓶中,加乙 醇适量,稍加热助溶,定容至刻度,摇匀,作为对照品溶液.按照 紫外一可见分光光度法实验,精密吸取供试品溶液1.0ml,置 1Oml容量瓶中,加5%亚硝酸钠溶液0.3ml,摇匀,放置6rainI力口 人10%硝酸铝溶液0.3ml,摇匀,放置6min,加入4%氢氧化钠 溶液10ml,再用水稀释至刻度,摇匀,放置15min,502nm处测 定吸收度,代入线性方程计算含量. 2.1.2标准曲线的绘制及线性范围考察精密吸取对照品溶液 0.0,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0ml与3.5m1分别置10ml量瓶中,按 “2.1.1”含量测定方法项下测定法操作.结果表明芦丁在20.8 , 72.8m1范围内,其量与对应的浓度呈良好的线性关系.以 收稿日期:2009-05-08;修订日期:2010-04-08 基金项目:河北省中医药管理局项目(No.2009064) 作者简介:李春雨(1979-),女(汉族),吉林长春人,现任河北北方学院讲 师,硕士学位,主要从事中药新剂型及炮制学研究工作. 通讯作者简介:张丹参(1961.),女(汉族),浙江温州人.现任河北北方 学院教授,博士学位,主要从事中药抗衰老药理作用及机制研究工作. 芦丁对照品浓度(X)为横坐标,吸收度(Y)为纵坐标进行回归,所 得线性方程是Y=0.011X+0.0352,r=0.9991.结果见表1 表1标准曲线实验结果 芦丁浓度C/txg?ml 20.8 3l2 41.6 52.0 62.4 72.8 A值 2.1.3精密度实验精密量取一份对照品溶液,502rim处连续 测定吸收度6次.结果见表2. 表2精密度实验结果 2.1.4重复性实验分别精密称取同批号生品5份,按”2.1.1” 项下含量测定方法项下测定5份样品中芦丁含量.结果见表3 表3重复性实验结果% 实验表明,样品的重复性良好. 2.1.5样品溶液稳定性考察将一份样品溶液在规定时间测定: 结果表明样品溶液在75rain内稳定性良好结果见表4. 表4样品溶液稳定性实验结果 2.1.6回收率实验精密量取已知含量的样品9份各1.0ml, 置l0ml容量瓶中,分别按下表低,中,高3个用量,精密加入对 照品溶液,按”2.1.1”含量测定方法项下制备样品,测定.结果 见表5. ? 2941? 09598 569965” 000OO0 时珍国医国药2010年第21卷第l1期LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VO L. 21NO.11 ? 2942? 由表7中极差R值大小显示,各因素作用主次为B>A>D >C;从表8方差分析中可见因素B对总黄酮含量有显着影响, 且B2>B>B:因素A,C,D对总黄酮含量无显着影响;从表7 中直观分析可得最佳工艺为BADc..分折结果表明,最佳炮 制条件为:盐浓度3%,闷润2h,13O?炒3min 2.4验证实验取120g菟丝子药材3份,用80ml食盐水(食 盐浓度3%)闷润2h,置炒制容器内,130~C炒3min,取出,备用. 测定总黄酮含量为2.72% 3讨论 本研究采用正交设计,以总黄酮为指标优化了菟丝子最佳盐 炙工艺,经验证结果比正交设计表中9种炮制均高,本 工艺是可行的,可确证最佳炮制工艺为3%食盐浓度(辅料比 2%)闷润2h,置炒制容器内,l300C炒3min.因为药典中记载盐 炙工艺辅料比为2%,故把食盐浓度作为主要考察因素之一.正 交实验表明食盐浓度越高越有利于总黄酮含量提高,但是不能过 高,否则易盐析造成不利影响.使用盐溶液浸润药材的主要作用 是改变药性,因此炮制温度也不能过高,时间不宜过长,否则易糊 化,达不到炮制目的 本研究还发现菟丝子药材经炮制后总黄酮含量比生品高,表 明经炮制使药材易于粉碎及有效成分易于煎出.2005版《中国 药典》中菟丝子盐炙法炮制品标准仅提到”炒至微鼓起”,并没有 确切的指标衡量其标准,本研究把菟丝子有效成分之一作为其炮 制品标准衡量的一项指标,可为《中国药典》中菟丝子炮制项的 进一步完善提供实验基础,如果能够采用多指标综合制定菟丝子 炮制标准将会更加完善,有待进一步研究. 参考文献: 1]南京中医药大学.中药大辞典,第2版[M].上海:上海科学技术出 版社,2006:3. 2:郭洪祝,李家实.南方菟丝子化学成分研究[J].北京中医药大学学 报,2000,23(3):20. :3:张素茂.高压蒸煮法炮制菟丝子[J].中国中药杂志,1992,17(9): 536. 4:曾诠,杜文清,吴洪元,等.菟丝子炮制研究[J].中草药,1998,29 (10):667. :5:李波.金承勇正交法优选菟丝子黄酒炮制工艺[J]中成药, 2003.25(1):43 [6]田树革,周晓英,肖新芳,等.菟丝子及不同炮制品中有效成分含量 的研究:J:.新疆医科大学,2001,24(1):68. [7]黄继全.菟丝子炮制工艺探讨J].江西中医学院,2006,18 (1):36. 8]张德昌,曹谷珍.对药典中菟丝子炮制方法的商榷[J].中医药研 究,2001,17(1):50. [9国家药典委员会.中国药典,I部[S].北京:化学工业出版社, 2005:附录VA,附录28.