HPLC法测定芩宁软膏中黄芩苷及盐酸达克罗宁的含量

HPLC法测定芩宁软膏中黄芩苷及盐酸达克罗宁的含量 HPLC法测定芩宁软膏中黄芩苷及盐酸达 克罗宁的含量 齐鲁药事?QiluPhalmaceuticalAffairs2007Vo1.26,N— o.9 2.9样品测定取两批冠心丹参滴丸按样品项下处理,分别 精密吸取对照品溶液2OL,样品溶液201~L,注入色谱仪,依 法测定,丹参酮?的含量,测定结果见2: 表2样品含量测定结果(n=3) 3讨论 3.1提取工艺的确定将样品分别用样品甲醇和乙醚超声提 取,峰面积后者只有前者的1/3,原因有:(1)用乙醚提取回收 乙醚时温度太高,丹参酮?损失;(2)操作中损失,且用甲醇 提取时分离度达到要求,故本实验采用甲醇超声提取方法. 3.2流动相及配比的确定依次选用流动相甲醇一水(75: 25,80;20,85:15).甲醇一水配比在75:25时符合系统 ?597? 适用性条件但出峰迟,分析周期长,甲醇一水配比在85:15 时,出峰时间提前(t一4min),但分离度达不到要求,综合考 虑,选择8O:2O,tR一8.7min左右出峰,峰形好,对称性强, 分离度高,均符合系统适用性条件,分析周期为25min即可. 3.3流动相流速依次设定流动相流速为0.8mL?min-, 1.0mL?min_.,1.2mL?min一,分析结果显示最佳流速为 1.0mL?min,. 4结论 本法测定冠心丹参滴丸中丹参酮?的含量准确,可 靠,可用于该药的生产过程中的质量控制,能够很好的保证 药品质量. 参考文献 [1]杨朝莲,曹敏.丹参药材中丹参酮?A提取方法的探讨.贵阳中 医药,2005,27(1):6O,61, HPLC法测定芩宁软膏中黄芩苷及盐酸达克罗宁的含量 郭宇鹏,赵青 (滨州市药品检验所,山东滨州256618;1.滨州市疾病控制中心,山东滨州256600) 摘要:目的建立高效液相色谱法测定芩宁软膏中黄芩苷及盐酸达克罗宁的含量.方 法用C8柱,以乙腈一0.02mol? L—KH2PO磷酸调节pH至3.0(30:70)为流动相,波长为282nm结果黄芩苷及 盐酸达克罗宁分别在25,125g ?mL-1(r=0.9999,一5),7.5,37.5g?mL(r:0.9999,一5)范围内呈良好的线性关系,其平 均回收率(=5)分 别为99.5,i00.5,RSD分别为0.51,0.92(一6).结论此方法简便,快速,准确. 关键词:高效液相色谱法芩宁软膏盐酸达克罗宁黄芩苷含量测定 中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1672—7738(2007)10—0597—03 DeterminationofBaicalinandDyclonineHydrochlorideinQinjingOintmentbyHPLC GUOYU—peng,ZHAOQing (BinzhouInstituteforDrugControl.Binzhou256618:1.Binzhoucenter fordiseasecontrolandprevention,Binzhou256600) ABSTRACT:O&,ECTIVEToesteblishanHPLCmethodforthedeterminationofBaicalinandDyclonineHydrochloridein QinjingOintment.METHODSTheC】 8columnwasused,themobilephasewasconsistedofaletonitrile一0.02molpotassium dihydrogenphosphatesolution(3O:70)(AdjustedpHto3.0byPhosphoricAcid),thedetectionwavelengthwas 282nm.RESULTSThestandardcurvesofBaicalinandDyelonineHydroehloridewaslinearinrangeof25,125g?mL一(r =0.9999,一5),7.5,37.5g?mL(r一0.9999,一 5),respectivelyandtheaveragerecoverieswere99.5,i00.5% withRSDwas0.51,0.92respetively.CONCLUSIONThemethodwassimple,rapidandaccu rate. KEYWORDS:HPLC;QinjingOintment;DyclonineHydroehloride;Baicalin;Assay 芩宁软膏是由黄芩苷,盐酸达克罗宁等组成的医院制 剂,对烧烫伤皮肤表面具有止痛,止痒,杀菌,消炎及抑制疤 痕皮肤的生成等作用,在临床上用于烧烫伤的后期治疗.本 文采用同一个色谱系统同时测定此两种成分的含量,可用于 该制剂的质量控制和评价. 1仪器与试药 仪器:DionexP680高效液相色谱仪,配低压四元泵,Di— onexUVPI70U四通道紫外检测器,Chromeleon工作站.对 照品:黄芩苷(中国药品生物制品检定所,批号715— 20001O),盐酸达克罗宁(上海轻工实验厂,批号040608,含 量99.38%).试剂:乙腈为色谱纯,其它试剂均为分析纯. 药品:芩宁软膏(山东滨州医学院附属医院批号060103, 0602儿,060516).芩宁软膏处方:黄芩苷2g,盐酸达克罗宁 0.6g,甘油lOg,氮酮2g,二甲亚砜3g,加基质至100g. ?598? 2方法与结果 2.1色谱条件AgilentTC—c18柱,以乙腈一0.02mol KH2P04(30t70)磷酸调节至pH3.0为流动相,检测波长 282nm,流速1mL?rain-.,柱温3O?. 2.2系统适用性试验分别取线性关系项下对照品溶液及 样品测定项下供试溶液各IO,uL注入色谱仪,记录色谱图 (图1),黄芩苷,盐酸达克罗宁分别于4,12min左右出峰. 『-' )O255075100125'501752C A一样品图 lA B一对照品图 C一阴性对照图 图1HPLC图(出峰顺序为黄芩苷,盐酸达克罗宁) 2.3线性关系考察分别取黄芩苷,盐酸达克罗宁对照品 50mg,15mg,置于100mL量瓶中,加甲醇溶解至刻度.吸取 5.0mL置于50mL量瓶中,用流动相定容,分别进样5,1O, 15,20,25L,以进样量为横坐标,峰面积为纵坐标,得回归 方程分别为:黄芩苷:Y一0.4779X+0.0415,r一0.9999 (t'/一5),线性范围25,125~g?mL_..盐酸达克罗宁:y =0.5060X一0.0597,r=0.9999(t'/=5),线性范围7.5, 37.5"g?mL一. z.4空白干扰试验按处方制备不含黄芩提取物,盐酸达克 罗宁的样品,以供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液.取 阴性样品溶液在上述色谱条件下进样IO/~L,得色谱图,结果 见图1.由图可见,阴性样品溶液对样品溶液含量测定无干 扰. z.5样品测定取样品约2.5g,精密称定,置100mL量瓶 中,加75mL甲醇,超声20min,迅速冰浴30min,用甲醇定 容,取干燥滤纸迅速过滤上清液,精密量取续滤液5mL,置 50mL容量瓶中,用流动相定容,摇匀,滤过,取续滤液供试, 齐鲁药事QiluPharmaceuticalAffairs2007Vo1.26,No.10 按外标法计算样品中对黄芩苷及盐酸达克罗宁的含量,结果 见表1. 表1三批芩宁软膏中对黄芩苷和盐酸达克罗宁 的含量(mg?g一) 2.6回收率测定取6份不含主药的软膏基质,按处方比例 的8O%,100,120%加入一定量的对照品各两份,按样品 测定项下处理,进样IO/~L,外标法计算,测得黄芩苷,盐酸达 克罗宁回收率,结果见表2. 表2回收率试验(一6) 16.617 16.617 2O.783 2O.783 24.95O 24.95O 平均() 16.47699.15 16.642IO0.I5 2O.71799.68 20.65899.39 24.62398.69 24.89299.77 99.5(RSD一0.5I) 4.975 4.975 6.225 6.225 7.475 7.475 100.5 4.95899.66 5.0331Ol_16 6.242100.27 6.329101.67 7.537100.83 7.41999.26 (RSD=0.92%) 2.7色谱仪进样精密度试验取对照品溶液1OL连续进样 6次,记录峰面积,黄芩苷:RSD一0.87;盐酸达克罗宁: RSD一0.91%. 2.8重现性试验取同批样品5份,按样品测定项下方法测 定含量(mg?g),结果黄芩苷:RSD一1.12%;盐酸达克 罗宁:RSD一0.86. 2.9稳定性试验精密量取上述同一份供试品溶液IO/~L, 分别在0,2,4,6,8,10,20,24h测定峰面积,RSD一0.74%. 杂质峰面积与初始峰面积相比无明显变化,说明供试品溶液 24h内稳定. 3讨论 3.1通过对几种浓度和酸度缓冲液的流动相比较发现,当有 机相高于3o时,黄芩苷与有关物质的分离度不理想,当流 动相的pH值高于3时,峰形不理想,且分离时间变长.本 色谱条件下两种预测定成分的柱效最高,分离理想,峰形对 称,且与基质中其他成分有效分离,可以在20min内完成一 次进样,同时测定两种成分. 3.2测定波长的确定是通过对两种物质紫外吸收图谱的比 较,黄芩苷在278nm处有最大吸收,盐酸达克罗宁在282nm 处有最大吸收,考虑到本制剂处方中盐酸达克罗宁含量较 低,故选择盐酸达克罗宁的最大吸收波长282nm处测定. 3.3通过对几种提取方法的比较,结果甲醇超声提取20min 即可提取完全,且操作简单. 参考文献 [1]《中国药典》2005年版(一部).北京:化学工业出版社 .2005.211. [2]单萍萍,龚春燕,申国庆.高效液相色谱法测定盐酸达克罗宁乳 膏含量.中国药师,2006,9(8).776,777. 齐鲁药事?Qil.PharmaceuticalAffairs2007Vo1.26,No9 [33张玲莉,彭燕,涂毅.高效液褶色谱法测定黄芩口服液中黄芩苷 的含量.中国药师,2005,8(6).495,,196. [43宋晓勇,魏磊.高效液相色谱法测定鼻复康口服液中黄芩苷的含 ? 599? 量.中国药房,2004,9,567,568. [5]郭珉,李珠华,赵远征,等.反相高效液相色谱法测定复方达克罗 宁搽剂中二组分的含量.医药导报,2006,25,(5).425,426. HPLC法测定复方麝香草酚滴耳液中两种组份的含量 何益锋,刘义钊 (湖南省常德市第一人民医院,湖南常德415003) 摘要:目的建立同时测定复方麝香草酚滴耳液中麝香草酚和水杨酸含量的方法.方法采用高效液相色谱法.色谱 柱为Shim—packVP一()DS(4.6×l50mm,5m),流动相为甲醇一水一磷酸(60:4O:0.3),检测波长220nm,柱温3O?.结 果水杨酸和麝香草酚分别在0.12,0.28mg?mL和0.06,0.14mg?mL范围内线性关系良好,平均回收率分别为 101.2(RSD=0.57)和i00.1(RSD一0.64%).结论该方法可用于复方麝香草酚滴耳液的质量控制. 关键词:高效液相色谱法麝香草酚水杨酸 中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1672—7738(2007)10—0599—03 SimultaneousdeterminationoftwocomponentsincomplexthymoleardropsbyHPLC HEYi—feng,LIUYi—zhao (theFirstPeople'sHospitalofChangdeCity,Changde415003) ABSTRACT:OBJECTIVEToestablishamethodforthedeterminationofthym'olandsalicy licacidincomplexthymolear drops.METHODSThecolumnwasshim—packVP—ODS(4.6×150mm,5um),themobilephaseconsistedofmethanol--wa— ter—phosphoricacid(60:40:0.3),thedetectionwavelengthwas220nm,thecolumntemperature was30"C.RESULTS Therewasagoodlinearrelationshipwhenthecontentofsalicylicacidandthymolwasintheran geof0.12,0.28mg?m=一, and0.06t0.14mg?mL—respectively.Theaveragerecoveriesofsalicylicacidandthymolwere101.2(RSD=0.57)and 100.1(RSD=0.64),respectively.CONCLUSIONThemethodCanbeappliedtOthequalityc ontrolofcomplexthymol eardrops. KEYWORDS:HPLC;thymol;salicylicacid 复方麝香草酚滴耳液含麝香草酚,水杨酸等成分.临床 用于治疗耳癣效果较好.为了控制其质量,参考相关文 献_l~,本实验建立了HPLC法,同时测定制剂中2种成分 含量的方法,可用于该制剂的质量控制. 1仪器与试药 岛津LC一10A高效液相色谱仪,Class,vp6.12色谱工 作站,麝香草酚,水杨酸对照品(中国药品生物制品检定所), 复方麝香草酚滴耳液(本院制剂室生产,批号:070323, 070518,070727),甲醇(色谱纯),磷酸(分析纯),水(二次蒸 馏水). 2方法与结果 2.1溶液的配制 2.1.1对照品贮备液的制备;精密称取麝香草酚20.0mg,水 杨酸40.0mg,同置100mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻 度,摇匀,作为对照品贮备液备用. 2.1.2供试品溶液制备:精密量取供试品5.0mL,置100mL 量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,再取此液5.0mL于25mL 量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀备用 2.1.3空白溶液的制备;除麝香草酚和水杨酸外,称取处方 量的辅料,配制空白样品溶液.按"2.1.2"项下方法制成空 白对照溶液. 2.2色谱条件和系统适用性实验色谱柱:Shim—packVP— ODS(4.6×150mm,5m),流动相:甲醇一水一磷酸(60:40 ;0.3),流速:0.8mL?min-,检测波长;220am,进样量: lC'L.在此色谱条件下,测得水杨酸和麝香草酚的保留时间 分别为5.3min和17.6min,麝香草酚的理论塔板数为10600. Ih'Jute$ A:空白基质图