中蜂和意蜂三型蜂上颚腺蛋白的比较研究

中蜂和意蜂三型蜂上颚腺蛋白的比较研究 3蜜蜂杂志(月刊)JOURNALOFBEE(Monthly)NO.52007May. 蟾 中蜂和意蜂三型蜂上颚腺蛋白的比较研究 黄少康,马超,张招荣 (福建农林大学蜂学学院,福建福州350002) 摘要:上颚腺是蜜蜂重要的外分泌腺,其分泌物在蜂群 生活中有重要调控作用.为研究中蜂,意蜂三型蜂上颚腺蛋白 的异同,对中蜂,意蜂的外勤工蜂,初出房蜂王,巢内雄蜂的 上颚腺蛋白进行定量和SDS-PAGE.结果表明:每个腺体中, 蜂王的蛋白含量最高,工蜂次之,雄蜂最少,三者差异明显; 两蜂种三型蜂的上颚腺蛋白相同的较多,但也有明显差异.意 蜂王的76kD蛋白和中蜂王的74k蛋白;意蜂工蜂的54kD蛋 白和中蜂工蜂的36kD蛋白;意蜂雄蜂的27kD蛋白和中蜂雄 蜂的48kD蛋白;均为相同级型之间的差异蛋白,它们可能与 生理功能差异相关. 关键词:中华蜜蜂;意大利蜜蜂;上颚腺;SDS—PAGE 中图分类号:$891+-4文献标识码:A 文章编号:1003-9139(2007)05—0003-03 ComparisonofMandibularGland ProteinbetweenThreeCastesofApis ceranaceranaandAmellifera ligustica HUANGShao-kang.HAChao.ZHANGZhao-rong (CollegeofBeeSciences,FujianAgricultureandForestry University,Fuzhou350002,China) Abstract:Mandibularglandsecretionplaysan mportantroleinmediatingcolonia11ife.Inorderto investigatetheproteindifferencesofmandibularglands betweenthreecastesofApisceranaceranaandA.撇f2ra ligustica,theproteinsextractedfrommandibularglandsof newlyhatchedqueen~foragerWOrkers,anddronesofboth species,werequantifiedrespectivelyandappliedfor SDS—PAGE.Theresultshowedthat,theproteincontent1n thequeen'smandibularglandwashighes~thesecondwas theforager,theleastthedrone1nbothspecies.Many proteinbands1nSDS-PAGEprof11esofdifferentcastesof bothspecieswerethesame,thoughfewproteinswere evidentlydifferent.AsforItalianhoneybee.a76kD proteinofqueen'smandibulargland,a54kDproteinof forages.anda27kDproteinofdrone'sweredi竹erentto thosecounterpartsofChinesehoneybee,whichwere74,36 and48kDrespectivelyThesedi骶erentproteinsprobably reflectthespeciesdiscrepancyinglandmetabolism. Keywords:Apisceranaeerana;Apis撇f2raligustwa; mandibulargland;SDS—PAGE 本实验通过SDS—PAGE对中蜂和意蜂三型蜂上 颚腺蛋白作了初步比较,发现了它们之间的异同,现 报道如下. 1材料方法 1.1材料 蜜蜂:中蜂,意蜂均由福建农林大学蜂学学院教 学蜂场提供. 实验用蜂的获取:2006年4,5月间,分别在中 蜂和意蜂群中人工培育蜂王,将待出房的王台放入人 工气候箱内[(344-1)?,65%,80%RH]羽化.蜂王 出台24h内,冷冻保存.工蜂均为#J-勤蜂,雄蜂从 脾面抓取.所有蜂取样后均立即冷冻保存待解剖用. 上颚腺的解剖:将冷冻蜂取出,剪下头部,用昆 虫针固定于蜡盘上.在解剖镜下用解剖刀从复眼基部 切开,用镊子将上颚及其上颚腺完整解剖出,冷冻保 存.使用前从上颚基部剪下上颚腺. 上颚腺蛋白的提取:'1)剪取中蜂,意蜂蜂王上 颚腺各10个于1.5mL小管内,分别加入0.2mol/L, pH6.5的磷酸缓冲液(PBS)50/xL;2)剪取中蜂, 意蜂工蜂上颚腺各20个于1.5mL小管内,分别加入 PBS60/xL;3)剪取中蜂,意蜂雄蜂上颚腺各20个 于1.5mL小管内,分别加入PBS50L.以上各管 分别用塑料研棒研磨50下,再用10000r/rain离心 10min,上清液即为蛋白提取液.用Bradford法【t坝0定 以上各管的蛋白浓度. 1.2方法 1.2.1中蜂,意蜂上颚腺蛋白的SDS--PAGE比较 1)参照文献[1】的方法配制凝胶:分离胶浓度 12%,堆积胶浓度5%. 2)根据测得的蛋白浓度,分别取中蜂和意蜂上 颚腺蛋白提取液蜂王各15L,工蜂各9/xL,雄蜂各 7.5L,分别与5/xL2.5×SDS上样缓冲液混合,水浴 3min,上样进行SDS—PAGE.每孔上样量均相当于3 个上颚腺的蛋白提取液. 收稿日期:2006—12—19;修回日期:2007—03-29 基金项目:博士后项目经费资助(010128) 作者简介:黄少康(1969-),男,福建福州人,副教授,博士后,从事蜜蜂科学研究. 5, 蜜蜂杂志(月刊)JOURNALOFBEE(Monthly)NO.52007May 档案是人们在社会实践活动中在必行,借鉴成功经验,少走弯路,减少损失,提高 黑形成的具有保存价值的文字材料,蜂产品质量,要在养蜂档案的指导下加以实现.养蜂 笄图纸,图样,计算材料,实验记档案在日常养蜂工作中积累形成,养蜂者要自觉注意 录,影像材料,合同,协议,鉴定积累和保存所形成各种材料;养蜂档案是养蜂工作的 案材料,科研成果等,经鉴定整理装真实记录,是养蜂者宝贵的知识财富,整理档案是系 订成册归档交档案室或档案部门保统巩固知识,加深记忆的过程. 吊墨管.党和国家对档案工作非常重笔者认为在养蜂工作中应注意积累形成以下归档 和江视,对档案要求齐全,完整,准材料:越冬观察和饲养记录,繁殖记录,病害防治, 确.要求党政机关,企事业单位和转移放蜂记录,蜂场蜜源植物分布及泌蜜规律,气象 尔各人民团体都要把档案工作纳人议变化规律记录,各种自然灾害记录,蜜蜂出巢和归巢 事日程,做到与社会进步和经济建规律,蜂产品质量变化规律,采用新技术及蜂具改进 设同步发展,使档案工作更好地为使用情况,蜂群年产记录,各类合同协议,养蜂总结 受精神文明和物质文明建设服务.发表文章原稿,参加养蜂培训班,博览会,展览会, . 档案工作虽然对养蜂者没有提协会活动等有关材料,每份材料均注明形成日期.对 出具体要求,笔者认为在养蜂工作上述材料在冬季休整时集中整理,采用统一 中同样形成了大量具有保存价值应归档的材料,对于(A4纸)耐久保存的纸张,蓝黑墨水书写或打印,按 养蜂工作具有借鉴和指导意义.形成时间先后顺序进行整理并编页码.档案首页是本 我国养蜂业多以个体经营为主,归档材料的形成卷的目录,目录制成表格形式,自左至右为:序号, 由养蜂者在日常活动中注意积累和保存,为日后建档题目,页号,备注.按排列顺序将每份材料标题填人 打好基础,把养蜂工作成功的经验和失败教训记录下目录题目栏中,页码填入页号栏内,便于查找利用. 来,为养蜂提供借鉴和参考,从而减少盲目性,提高封面用较厚的纸张,上面一行大号字书写"养蜂档 科学养蜂和判断能力.人的头脑记忆是很有限的,随案',中间一行中号字书写×××养蜂场,下面一行 时间推移,记忆较深的事情也会淡化或忘记,只有记是年,月,日,装订成册后保管. 录在档案中才能完整,永久保存.强群高产获取较大以上仅供养蜂者参考,有兴趣者试行必有益处. 经济效益是每个养蜂者强烈愿望,走科学养蜂之路势收稿日期i2007-01-12 IllIllIIllIIIllII,,,,,II,,,,,,,''',,,'''''''''''''''''''''''''''''','''''''''',''''''''''''''''