【最新精选】蛹虫草子实体中天然色素的提取工艺毕业论文

【最新精选】蛹虫草子实体中天然色素的提取工艺毕业论文 长春工业大学本科毕业论文 摘 要 蛹虫草又称为北虫草，或北冬虫夏草，属真菌类子囊菌物质，其子实体具有很高的药用价值和营养价值，至今对蛹虫草子实体中的虫草素，虫草酸，虫草多糖，SOD等生物活性成分的研究项目比较多，但对蛹虫草子实体中天然色素的研究甚少。 本实验以蛹虫草子实体为原材料，以天然色素的提取率为考察指标，比较了酸热法，研磨法，超声波提取法和微波提取法对蛹虫草子实体中天然色素的提取效果，并利用紫外-可见分光光度法测定其含量。实验结果表明，酸热法对蛹虫草子实体中天然色素的提取效果最佳，其次是研磨法，最后是超声波提取法和微波提取法。采用响应面分析法对影响有效成份提取的工艺条件进行了优化，最终确定蛹虫草子实体提取天然色素的最佳工艺条件为:盐酸浓度0.05mol/L，盐酸用量10.5mL，热处理时间5min。在此最优工艺条件下，天然色素的提取率为2747.71μg/g。同时讨论了光照和温度对蛹虫草子实体中天然色素稳定性的影响，结果表明，日光对天然色素有明显的破坏作用，温度升高对天然色素有一定的破坏作用。 关键词:蛹虫草子实体;天然色素;酸热法;响应面优化 I 长春工业大学本科毕业论文 Abstract Cordyceps Militaris, also known as Cordyceps,or North Cordyceps are fungus ascomycetes substances. he fruiting body has high medicinal value and nutritional value.Now,there are more and more research projects about cordycepin in Cordyceps militaris, Cordyceps acid, Cordyceps polysaccharide,SOD and other bio-active ingredients , but the Cordyceps militaris natural pigment are less than them. In the experiments, Cordyceps militaris are the raw materials,and we regard the rate of the natural pigment extraction as the indexes, compared the extractions of Cordyceps militaris natural pigment by acid calorimetry, grinding method, ultrasonic extraction and microwave extraction .Then we use ultraviolet- visible spectrophotometry to determine its content. Experimental results show that the acid-heat method of Cordyceps militaris natural pigment is the best way in the optimum extraction methods, followed by grinding method, and finally ultrasonic extraction and microwave extraction. Finally we use the Response surface methodology to optimize the process conditions which affect the active ingredient extraction and ultimately determine the optimal conditions for Cordyceps militaris extract natural pigment,the concentration of hydrochloric acid is 0.53mol/L,the amount of hydrochloric acid is 10.25mL.the heat treatment time is 4.56min.Finally we conclude the effects of light and temperature on the impact of natural pigment extraction of Cordyceps Militaris. Keywords: Cordyceps militaris; natural pigments;acid calorimetry; response surface optimization experiments II 长春工业大学本科毕业论文 目录 摘 要 .......................................................... I Abstract ....................................................... II 第一章 前言 ..................................................... 1 第二章 文献综述.................................................. 2 2.1 蛹虫草子实体 .................................................... 2 2 2.1.1 生长条件 .................................................. 2.1.2功能作用 ................................................... 3 2.1.3 药用价值 .................................................. 5 2.2 天然色素 ........................................................ 6 2.2.1 天然色素的种类 ............................................ 6 2.2.2 天然色素的性质 ............................................ 7 2.2.3 天然色素的结构特点 ........................................ 7 2.3 天然色素提取 ................................................ 8 2.3.1 一般提取法 ................................................ 8 2.3.2 酸热提取法 ................................................ 8 2.3.3 微波提取法 ................................................ 9 9 2.3.4 超声波提取法 .............................................. 2.3.5 超临界CO萃取法(SFE) ................................... 10 2 2.3.6 有机溶液提取法 ........................................... 10 2.3.7 酶法提取法 ............................................... 11 2.4 蛹虫草子实体天然色素的测定方法 ................................. 11 2.4.1 紫外-可见光吸收光谱法 .................................... 11 2.4.2 高效液相色谱法(HPLC) ................................... 11 2.4.3 薄层色谱法 ............................................... 11 2.5 研究内容及研究意义 ............................................. 12 第三章 试验部分 ...................................................... 13 3.1 材料与设备 ..................................................... 13 3.1.1 原材料 ................................................... 13 3.1.2 主要仪器 ................................................. 13 3.1.3 主要试剂 ................................................. 13 3.2 试验方法 ....................................................... 13 3.2.1蛹虫草子实体中天然色素的提取工艺 .......................... 13 3.2.2蛹虫草子实体中天然色素提取工艺的优化(酸热法) ............ 14 III 长春工业大学本科毕业论文 3.2.3 蛹虫草菌丝体天然色素的检测 ............................... 16 3.2.4 蛹虫草子实体中天然色素的性质研究 ......................... 16 3.3 结果与讨论 ..................................................... 16 3.3.1 β,胡萝卜素曲线的绘制 ............................... 16 3.3.2 蛹虫草子实体天然色素提取方法的比较 ....................... 17 3.3.3 酸热法提取蛹虫草子实体中天然色素的单因素分析 ............. 18 3.3.4 响应面优化酸热法提取蛹虫草子实体中的天然色素 ............. 20 3.3.5 蛹虫草子实体中天然色素的性质研究 ......................... 26 第四章 结论与展望 ..................................................... 28 4.1 结论 ........................................................... 28 4.2 展望 ........................................................... 28 致 谢 ....................................................... 29 参考文献 ....................................................... 30 IV 长春工业大学本科毕业论文 第一章 前言 蛹虫草最早源于中国，俗称北冬虫夏草或北虫草，由于其药用价值与冬虫夏草极其相似，故药典中记为“北冬虫夏草”。味甘、性平，具有益肺补肾，止血化痰的功效。近些年的研究表明:蛹虫草与冬虫夏草极其相似，无毒副作用，可做为冬虫夏草的良好代用品。其在治疗老年痴呆，清除人体自由基，降血脂，保护肝肾及呼吸系统，调节内分泌与免疫系统，抗肿瘤、抗疲劳、抗病源微生物，镇静抗惊厥作用等方面有极佳的功效。 蛹虫草天然色素作为蛹虫草子实体中的生理活性物质之一，也是研究的重点。所以，随着对蛹虫草子实体中天然色素研究的不断深入，利用蛹虫草子实体中天然色素开发的保健品，功能性食品添加剂和药品的市场前景为人研究者们所看好。为了研究出有利于人们身体健康的、经济效益高的蛹虫草子实体中天然色类的深加工产品，就需要我们广大的食品科学家、生物学家和医学家们的共同努力，从而带动整个研究的快速发展。 因此，本实验开展对蛹虫草子实体中天然色素提取工艺的研究和优化，为工业化规模性生产蛹虫草子实体天然色素提供理论依据。 1 长春工业大学本科毕业论文 第二章 文献综述 2.1 蛹虫草子实体 2.1.1 生长条件 蛹虫草子实体是蛹虫草生殖细胞“孢子”(相当于植物的种子)随风飘散粘上某些昆虫的蛹后，萌发菌丝并侵入蛹体内吸取养分，而后从蛹体上长出的金黄色、或橘黄色、或橘红色的棍棒状物体，是产生生殖细胞“孢子”的生殖体(相当于植物的果实体)。 图2.1 人工培养的蛹虫草子实体 图2.2 蛹虫草菌丝体 2.1.1.1生长史 蛹虫草是一类复型真菌，在生活史中有分生孢子阶段(无性型)和子囊孢子阶段(有性型)。蛹虫草的菌丝是一种子囊菌，当子实体成熟后可以形成子囊孢子，孢子散发后随风传播。如果孢子落在适宜的昆虫蛹(虫)体上，特别是幼虫的虫体上后，便开 [1]始萌发形成菌丝体。菌丝体以昆虫蛹体或虫体的体内组织和器官作为其生长发育的物质和能量来源，很快布满整个昆虫蛹体或虫体的内部，最后将蛹体或虫体内部各种组织和器官完全分解。自此以后，菌丝体由营养生长开始转为生殖生长，菌丝体扭结，并从虫体空壳的头部、胸部、近尾部等处伸出，形成金黄色、橘黄色或橘红色的、顶部略膨大的棒状子实体。在子实体的顶端，着生许多表面呈乳头状突起的子囊壳，每个子囊壳内产生许多子囊孢子，当子囊孢子成熟后放射出来，又开始下一轮生活史。 2.1.1.2 生长地域 蛹虫草寄主的专一性不强，可寄生于鳞翅目、鞘翅目、双翅目等昆虫的幼虫、成虫和蛹，并且大多数寄生于蛹。其寄主昆虫共有3目11科19种。野生蛹虫草是一种世界性分布的广布种，其地理分布区域遍及全世界。在我国，野生蛹虫草主要分布在吉林，辽宁、河北、陕西、安徽、广西、云南、广东、四川、贵州、湖北、湖南、山 [2]西、山东、江苏，河南等十几个省区。主要表现出以下分布规律:多生长于春夏季节的4,7月份，或秋冬季节的8,11月份;海拔高度一般在100,2000左右;年均气温为2,12?，最高气温36?，最低气温-36?，在蛹虫草大量产生的4,11月份， 2 长春工业大学本科毕业论文 气温较高，平均气温为9,28?;蛹虫草产区多属温带湿润气候，年均降水量在650毫米以上，空气相对湿度为60,95%，土壤湿度为20,65%;野生蛹虫草多产生在针阔混交林地上，土壤多为棕壤土、紫红壤土等腐殖质土壤，一般土壤腐殖层3,9 [3]厘米的林地中较多。 2.1.2功能作用 蛹虫草含有虫草素、虫草酸、虫草多糖、蛋白质、超氧化物歧化酶(SOD)、麦 [4]角甾醇、氨基酸、维生素及多种微量元素，与冬虫夏草的化学成分基本相同。另外还包含虫草素在内的腺苷、尿苷、尿嘧啶、腺嘌呤等物质。 2.1.2.1 虫草素 1951年，加拿大的Cunningh等观察到被蛹虫草寄生的昆虫组织不易腐烂，随后从中分离到一种腺苷类活性物质，命名为虫草素(Cordycepin)，并确定其结构式为 3’-脱氧腺苷(3’-Deoxyadenosine)，虫草素是第一个从真菌中分离出来的核苷类抗菌素。虫草素又称虫草菌素、蛹虫草菌素、3’-脱氧腺苷。在已报道的400多种虫草中，蛹虫草是唯一能大量产生虫草素的虫草。 [5] 分子生物学和现代医学的研究发现，虫草素具有多方面作用:免疫调节、抗肿瘤、抗真菌;增加脾脏重量、加快肝脏核酸和蛋白质更新速度，抗缺氧、增加心肌营养血流量及降低血清胆固醇和B酯蛋白，刺激糖酵解导致ATP合成增加，增强肝脏功能和肌肉中CPK的活性，对由于激素失调引起的性功能损伤有修复作用，能明显 [6]增加冠脉血流量，降低冠脉、脑及外围血管阻力。丁向萍等的研究报告《虫草素诱导人肝癌Hep G-2 细胞凋亡及对端粒酶活性影响的研究》中指出，虫草素有抗肿瘤的作用。 2.1.2.2 虫草酸 虫草酸(Cordycepic acid)是冬虫夏草主要活性成分之一，又名甘露醇(Mannitol )， [7]化学分子式C6H14O6，为1,3,4,5—四羟基环已酸。施英等在《蛹虫草药理作用研究进展》中提到，虫草酸能抑制各种病菌的成长，可预防与治疗脑血栓、脑出血、心肌梗塞、长期衰竭;虫草酸含量的高低是衡量虫草质量的主要标准之一，一般认为虫草 [8]酸含量高的虫草的药用价值高。黎颖在《甘露醇的性质、生产与发展建议》中提到:甘露醇(虫草酸)由于能部分吸收、并发生代谢，是一种较强的自由基清除剂，以及其渗透性脱水和利尿的作用。 2.1.2.3 虫草多糖 虫草多糖是一类高分子复合物，在蛹虫草中含量为4,10%，是蛹虫草中含量最高的主要药理活性物质。它的抗癌活性和免疫活性已引起人们的极大兴趣。从1977年开始，日本和中国的科研人员开始对虫草多糖开展研究，已从天然冬虫夏草以及人工培育的虫草真菌中分别分离纯化出了多种多糖组份，并对其理化性质和药理活性进 3 长春工业大学本科毕业论文 行了详细研究。 大量研究表明，虫草多糖有着多种生物活性功能，被医学界和药物学界认为是当 [9]前世界上非常好的免疫促进剂之一，具有广泛的药理作用:可活化巨噬细胞刺激抗体产生，提高人体免疫能力，改善呼吸系统，可使肾上腺重量、血浆皮质醇、醛固酮 [10]及肾上腺内胆固醇含量增加，有促进肾上腺的作用，抑制肿瘤生长，并具有抗肿瘤、抗辐射、降血糖和脂蛋白、止咳、化痰、润肺和延缓衰老等药理作用，此外,虫草多糖还能抗心律失常，抗心肌缺血，扩张外周血管，降压，降血脂，抑制血小板聚集。 [11] 李连德等在《虫草多糖研究进展(综述)》中总结道:多糖是存在于自然界的醛糖和酮糖通过糖苷键连在一起的多聚物，是一切有生命的有机体必不可少的成分，同维持生物机能密切相关。多糖作为药物始于1943年，并广泛作为广谱免疫抑制剂。多糖是非特异性的免疫调节剂(生物效应调节剂BRM)，它主要影响网状内皮系统(RES)、巨噬细胞、淋巴细胞、白细胞以及RNA、DNA、蛋白质的合成、CAMP(环化腺苷-磷酸)的含量，抗体的生成、补体的形成以及干扰素的诱生，并具有抗肿瘤、抗炎、抗凝血、抗病毒、抗放射、降血糖、降血脂等活性。 2.1.2.4 超氧化物歧化酶(SOD) 超氧化物歧化酶Orgotein (Superoxide Dismutase, SOD)，别名肝蛋白、奥谷蛋白，简称SOD。SOD是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产 [12]生的有害物质。对人体不断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。SOD被视为生命科技中最具神奇魔力的酶、人体内的垃圾清道夫。SOD是氧自由基的自然天敌，是机体内氧自由基的头号杀手，是生命健康之本。 [13]赵勇在《超氧化物歧化酶(SOD)的应用研究进展》中验证:超氧化物歧化酶(SOD)广泛存在与一切生物机体内，通过催化超氧阴离子自由基发生歧化反应、减轻或消除超氧阴离子自由基对机体的损害。超氧化物歧化酶还可以被应用在医药、食 [14]品、农业和化妆品等领域。 2.1.2.5 麦角甾醇 麦角甾醇是生产维生素D的前体，也是生产激素类药物的中间体，可用来生产2 [15]可的松、黄体酮，有维生素D的作用。邓玉清等人在《微生物麦角甾醇的研究进2 展》中印证了:角固醇是微生物细胞膜的重要组成部份，对确保细胞膜的完整性，膜结合酶的活性，膜的流动性，细胞活力以及细胞物质运输等起着重要作用。 [16] 高虹等人在《巴西菇麦角甾醇抗肿瘤活性及作用机理初探》结果表明:巴西菇子实体中提取的麦角甾醇在剂量10mg/kg?d、50mg/kg?d和100mg/kg?d时的瘤重抑制率分别为62.75%、77.61%和79.18%，说明麦角甾醇有较强的抑瘤活性。 2.1.2.6 其他成分 除上述成分外，还包含多种微量元素以及虫草素在内的腺苷、尿苷、尿嘧啶、腺嘌呤等物质。腺苷是一种遍布人体细胞的内源性核苷，可直接进入心肌经磷酸化生成 4 长春工业大学本科毕业论文 腺苷酸，参与心肌能量代谢，同时还参与扩张冠脉血管，增加血流量。腺苷对心血管系统和肌体的许多其它系统及组织均有生理作用。腺苷是用于合成三磷酸腺苷(ATP)、腺嘌呤、腺苷酸、阿糖腺苷的重要中间体。蛹虫草富含硒，硒被称为微量元素中的抗癌之王，是谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—PX)的必需组分，GSH-PX可引起人体不断产生可致癌自由基的破坏。此外，蛹虫草子实体中含有的氨基酸、维生素对蛹虫草的功效开发也有一定作用。 2.1.3 药用价值 2.1.3.1 提高免疫力 蛹虫草子实体中含有的虫草多糖是提高免疫力的最主要的原因。虫草的82.2%为不饱和脂肪酸，此外，尚含有维生素B、麦角脂醇、六碳糖醇、多种生物碱等，具12 [17]有调节免疫系统功能，提高细胞能量、抗疲劳的功效。徐廷万等实验得出:人工蛹虫草胞外多糖可增强免疫功能被抑制的非特异性免疫功能和体液免疫功能，还有抗疲 [18]劳作用。戴瑛等实验得出:蛹虫草提取物可调节小鼠机体组织的免疫功能，可以缓解由于内毒素或类似物质造成的肺部炎症，具有一定的肺保护作用。刘海燕、魏本征[19]等也通过实验表明:柞蚕蛹虫草对小鼠机体的非特异性免疫功能有明显的增强作用。 2.1.3.2 抗癌作用 蛹虫草有良好的抗癌作用，而发挥最大功效的就是蛹虫草子实体中的虫草素。。孙艳等通过对荷肝癌小鼠的实验得出，人工蛹虫草子实体具有抑癌作用，除直接作用 [20]外，还可使宿主特异性免疫功能增强而获得明显的免疫保护效应。孙科峰等实验表明:蛹虫草子实体可明显延长S180 腹水型小鼠的生存率,对S180 实体瘤小鼠的肿块生长有一定的抑制作用;对S180 荷瘤小鼠的肿瘤免疫活性因子TNF-β和IL-2 有明显 [21]的促进作用。汤新强等将人工蛹虫草胞外多糖与治疗剂量的卡铂合用，可增强卡铂的抗肿瘤作用。 2.1.3.3 抑菌、抗炎作用 虫草素对葡萄球菌、链球菌、鼻疽杆菌、炭疽杆菌、猪出血性败血症杆菌等均有抑制作用。蛹虫草煎剂对须疮癣菌、絮状表皮癣菌、石膏样小芽孢癣菌、羊毛状小芽孢癣菌等真菌及鸟结核杆菌、枯草杆菌、鼻疽杆菌等结核杆菌也均有抑制作用。宾文[22]等实验表明，人工培养蛹虫草多糖具有抗炎作用，对细胞免疫没有明显的影响。 2.1.3.4 镇静、抗惊厥作用 [23] 陈桂宝等研究表明，蛹虫草有明显的镇静、耐缺氧、抗炎等作用，对异丙肾上 [24]腺素诱发小鼠心肌耗氧量增加也有明显的保护作用。陈敬民等发现蛹虫草能明显减少小鼠的自主活动,拮抗戊四氮所致的小鼠惊厥和一定程度协同戊巴比妥钠诱发小鼠睡眠,表明蛹虫草具有镇静催眠作用。 5 长春工业大学本科毕业论文 2.1.3.5 抗衰老作用 年龄的增长和某些体外因素会造成机体和皮肤组织自由基产生超过机体正常清除自由基的的能力，从而使皮肤组织造成伤害，导致衰老。由于SOD能够清除自由基，因而可以延缓衰老。人之所以会衰老，老化迹象一点一滴出观，如色素沉淀、体力衰退、是因为体内产生氧化作用，所谓“氧化作用”就类似于生锈，抗氧化剂的补充有助于降低氧化的速度，减慢衰老的脚步。 [25] 王琦等实验结果表明，蛹虫草能明显降低老年大鼠体内的过氧化脂质(LPO)含量和自由基水平，进而保护细胞免受O-损害，延缓器官和整个机体的衰老。张桂2 英等也做了这方面的实验，结论是柞蚕蛹虫草具有提高老龄大鼠超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和明显降低LPO含量的作用。 2.1.3.6 降血脂 [26] 赵鹏等用不同剂量的蛹虫草菌丝体粉对大鼠的灌胃实验得出:蛹虫草菌丝体具有降低血脂的作用。 2.1.3.7 其他作用 除以上功效外，蛹虫草子实体还有其他功能，例如:抗病毒、抗菌、明显抑制肿瘤生长、干扰人体RNA 及DNA合成，预防治疗脑血栓、脑溢血、肾功能衰竭，利尿，同时还有抑制血小板积聚防止血栓形成，消除面斑，抗衰防皱的功效。 2.2 天然色素 色素可分为天然色素和合成色素两大类。而来源于天然植物的根、茎、叶、花、果实和动物、微生物等的色素，称为天然色素。由于天然色素对人体无毒无害，营养价值高，且有些具有一定的生物活性，而从添加量上看食用色素在食品中占的比例很小，一般为产品，饮料、酒类、糕点、糖果、医药等的千分之几、万分之几甚至是十万分之几。 2.2.1 天然色素的种类 天然色素按来源和性质，可分为植物、动物、微生物和矿物色素。矿物色素大多对人体有害，现已不再用于食品着色，动物、微生物色素的应用也较少。天然植物色素可根据化学结构，形态来源和溶解性进行分类，最常用的方法是按照化学结构来分类。 2.2.1.1 多酚类色素 多酚类色素主要包括:茶黄色素、多穗柯棕、儿茶黑色素、金樱子棕等。 2.2.1.2 类胡萝卜素类 类胡萝卜素是一类重要的天然色素的总称，属于化合物。普遍存在于动物、高等植物、真菌、藻类和细菌中的黄色、橙红色或红色的色素，主要是β-胡萝卜素和γ- 6 长春工业大学本科毕业论文 胡萝卜素，因此而得名。不溶于水，溶于脂肪和脂肪溶剂，亦称脂色素。主要包括:番茄色素(番茄红素)、天然胡萝卜素、混合类胡萝卜素、玉米黄、胭脂俗橙色素、藏红花色素、栀子黄色素、栀子绿色素、辣椒红色素、甜椒红色素、辣椒橙色素、南瓜黄色素、沙棘黄、密蒙黄色素、柑橘披黄色素、苜蓿色素、万寿菊色素、柑橘黄、枸杞色素、银杏黄色素、苦瓜色素、蒲公英色素等。 2.2.1.3 酮类色素 酮类色素主要包括:姜黄色素、姜黄油树脂、姜黄、姜黄素、郁金色素、郁金香红色素等。 2.2.1.4 醌类色素 醌类色素主要包括:茜草红色素、紫草红、紫草色素、紫蓝红色素、紫草素、虎杖色素、凤仙花红色素、决明子红色素等。 2.2.2 天然色素的性质 2.2.2.1 副作用小，安全性高 绝大多数天然色素来自动物、植物组织。因此无毒副作用，安全性高。天然植物色素大多为花青素类、类胡萝卜素等，因此天然色素不但是无毒无害的物质，而且还含有很多人体必须的营养物质和微生物物质，例如番茄红色素，β-胡萝卜素等。 2.2.2.2 色调比较自然，能较好的模仿天然物的颜色 植物色素的着色色调比较自然，既可增加色调，又与天然色泽相近，是一种自然 [27]的美。植物色素在植物体中含量较少，分离纯化较为困难，其中有的共存物存在时还可能产生异味，因此生产成本较合成色素高。 2.2.2.3 部分天然色素对热、氧、金属及pH值等敏感，稳定性较差 2.2.2.4 天然色素的种类繁多，性质复杂 2.2.3 天然色素的结构特点 按照化学结构不同可分为四吡咯类色素(如叶绿素)、类胡萝卜色素(如辣椒红色素)、花青类色素(如葡萄红色素)、黄酮类色素(如高粱红色素)、醌类色素(如紫草色素)、其它类色素(如焦糖色素、姜黄色素、甜菜红色素等)。 2.2.3.1 四吡咯类色素 [28] 目前应用于食品着色的四吡咯类色素主要有叶绿素、血红素、胆红素和蓝藻素。这类色素的基本结构都是由四个吡咯环的α-碳原子通过次甲基相连而构成的复杂 2+2+2+2+共轭体系，该共轭体系一般与金属离子(Mg、Fe、Cu、Zn)结合。四吡咯环共轭结构比较稳定，这类色素的性能主要由共体系结合的金属离子和衍生的外围结构决定。 2.2.3.2 类胡萝卜色素 系共轭烯烃(或共轭烯烃的含氧衍生物)，能有效的防止自由基对脂质内侧生物 7 长春工业大学本科毕业论文 [29]膜的损害，而且还是有效的氧自由基捕获器。例如:β-胡萝卜素食维生素A的前 [30]体，可提高机体的免疫功能，可防治中风、心血管疾病的作用;番茄红素可以清除自由基，并能有效预防前列腺癌的发生，还可以激活免疫细胞，防止心脑血管疾病的发生;玉米黄色素是单线态氧，可防止脂质过氧化反应的链式传递，从而可以清除膜内的自由基，维持生物膜的完整性;栀子黄色素具有抗氧化能力和解热、消炎、利胆的功效。 2.2.3.3 类黄酮类色素 黄酮类色素是带有C-C-C的水溶性酚类物质，可以切断体内产生衰老和疾病的636 过氧化链式反应。黄酮类色素还可以保护血管，调节血管的扩张，防止动脉硬化和栓塞。 2.2.3.4 花色苷类色素 花色苷类色素由糖苷和糖组成，一般情况下为水溶性，能强烈的吸收紫外线，使 [31]细胞分化和其他生命过程正常进行，还可以预防冠心病和心急缺损等。徐清海《天然色素的提取及其生理功能》中提到:从我国食药两用的紫苏中提取的紫苏色素，有解毒、散寒、行气和胃的功效。 2.2.3.5 醌类色素 醌类色素因其结构中有多个酚羟基，所以具有一定的抗氧化活性以及抗菌、抗癌、抗病毒的作用。 2.3 天然色素提取方法 2.3.1一般提取法 [32]蛹虫草子实体天然色素的提取一般是采用研磨的方法。通常先用石英砂协助研磨，再加入丙酮作助磨剂浸提后得到天然色素。由于不同研究者用的提取方法不同，所以蛹虫草子实体中天然色素的得率也不同。 [33] 张志军等人称取1g蛹虫草子实体的样品，加入0.5g石英砂后研磨，并同时加入20mL丙酮作为助磨剂，在研磨15min之后，将所得的混合物直接用于浸提处理。稍后再室温下振荡30min，之后经过4000r/min的离心机离心10min，最后取得蛹虫草子实体中的天然色素提取液。最后经紫外-可见光吸收光谱法测得天然色素的产量为718μg/g。 适用范围:溶于丙酮的色素 2.3.2 酸热提取法 2.3.2.1 原理 主要是由于酸热法使用了对细胞壁中原来结构紧密的某些成分(多糖和蛋白质等)具有强力疏松作用的盐酸，并配合沸水处理及速冷处理，使细胞壁结构得以破坏，胞 8 长春工业大学本科毕业论文 内物质溶出。 2.3.2.2 特点 该法设备简单、能耗小、成本低 2.3.2.3 适用范围 对热和pH值不敏感的色素 [34] 参照郭鹏飞等的方法，每克蛹虫草子实体的样品加2mol/L盐酸10mL，在室温下浸泡40min，随后在沸水浴中处理4min，迅速冷却后，再3000r/min的离心机中离心10min，弃上清液后，将沉淀用蒸馏水洗涤2次后加20mL丙酮，室温下振荡30min以浸提虫草子实体中的天然色素，然后再在4000r/min条件下离心15min，得上清液即为天然色素的浸提液。最后经紫外-可见光吸收光谱法测得天然色素的产量为2736μg/g。 2.3.3 微波提取法 2.3.3.1 原理 [35]微波所产生的电磁场使被萃取的部分向萃取溶剂界面扩散速率加快。例如在用水做溶剂时，在微波场下，水分子高速转动成为激发态，而当水分子本身释放能量回到激态时，它所释放能量传递给其它物质分子，加速其热运动，缩短被萃取分子由物料内部扩散到萃取溶剂界面的时间，从而使萃取速率提高数倍，同时还降低了萃取温度，最大限度的保证了萃取质量。 2.3.3.2 特点 用微波法提取可以缩短生产时间, 降低能源溶剂的消耗,同时可以提高提取物的纯度 2.3.3.3 适用范围 对热稳定的色素 [36] 参照赵大球等的方法，称取一定量的样品，之后以丙酮为提取剂，料液比1?20g/mL，将其混匀后置于微波炉中。在微波功率为140W的提取条件下，提取3min。在微波提取后，于室温下振荡30min，经离心机离心后得天然色素的浸提液。最后经紫外-可见光吸收光谱法测得天然色素的产量为696μg/g。 2.3.4 超声波提取法 2.3.4.1 原理 [37] 超声波提取法利用超声波的空化作用加速植物有效成分的溶出，另外超声波的次级效应, 如机械振动、乳化、扩散、击碎、化学效应等也能加速欲提取成分的扩散释放，并充分与溶剂混合，利于提取; 超声波的粉碎、搅拌等特殊作用，可打破植物细胞壁，以使溶媒尽快渗透到植物细胞中，溶出其中有效成分。 2.3.4.2 特点 超声波法在提取过程产生强烈的振动、空化、搅拌，与传统提取方法相比具有生 9 长春工业大学本科毕业论文 产周期短、无需加热、产率高、条件温和有效成分不被破坏等优点 [38] 参照姬小明的方法，称取一定量样品，以丙酮为提取剂，在料液比为1?20g/mL的情况下, 避光条件下用超声波提取1h，超声后在室温下振荡30min，最后经离心后，取上清液得天然色素的浸提液。最后经紫外-可见光吸收光谱法测得天然色素的产量为628μg/g 2.3.5 超临界CO萃取法(SFE) 2 2.3.5.1 原理 临界压力之上的超临界流体具有溶解许多物质的能力的性质, 利用处于临界温度、 [39]将其作为萃取剂，从液体或固体中萃取分离出特定成分的新型分离技术。 2.3.5.2 特点 无化学溶剂消耗和残留、无污染, 避免了色素在高温下的热裂化，保护了色素的天然活性，保持了天然色素的色泽、香气纯正。同时提取工艺简单，能耗低，萃取剂便宜，提取的产品具有纯度高，无毒副作用等优点。 2.3.5.3 适用范围 番茄红素、β-胡萝卜素、紫草色素、玉米黄色素 [40] 据文献报道，超临界CO萃取技术在天然色素萃取中的应用研究主要有番茄红2 素、β-胡萝卜素、紫草色素、玉米黄色素等的提取。如:在40MPa下，得到65% 番茄红素和35% 胡萝卜素 ; 超临界CO萃取技术萃取紫草色素含杂质少，色价高，产2 品色质好，避免了有机溶剂萃取的溶剂残留问题; 在34.47MPa下得到番茄红素为38. 8% 的最大提取率; 所得玉米黄色素的性能指标优于传统方法，萃取率高且不含残留溶剂，产品指标符合国家标准等。 2.3.6 有机溶液提取法 2.3.6.1 原理 相似相溶 2.3.6.2 特点 萃取剂便宜，设备简单，操作简单易行，提取率较高，但用其提取的某些产品质 影响产品的应用范围。 量较差，纯度较低，有异味或溶剂残留， 2.3.6.3 适用范围 水溶性、醇溶性的花色苷类、黄酮类、脂溶性色素 [41] 据姚成立等的研究报告提出:提取高梁红色素是用0.1%的盐酸水溶液浸泡2h，除去杂质和杂色后，再用7%的乙醇水溶液在40?下浸提，然后过滤、浓缩、干燥而得。利用有机溶剂如甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等提取姜黄得姜黄色素。将虾壳用盐酸浸泡24h 后过滤，滤渣用95%乙醇浸泡,提取液经蒸馏后得到浓缩的粗制虾青素提取物。 10 长春工业大学本科毕业论文 2.3.7 酶法提取法 2.3.7.1 原理 纤维素酶可是纤维素、半纤维素等物质降解，引起细胞壁和细胞间质结构发生局部疏松、膨胀等变化，从而增大胞内有效成分向提取介质的扩散，促进色素提取效率的提高。 2.3.7.2 特点 条件温和、有效成分理化性质稳定等优点 2.3.7.3 适用范围 红花黄色素 2.4 蛹虫草子实体天然色素的测定方法 2.4.1 紫外-可见光吸收光谱法 紫外--可见分光光度法是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的 [42]吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。此方法具有灵敏度高、准确度好、选择性优操作简便、重现性好，分析速度好、应用广泛等特点。波长长(频率小)的光线能量小，波长短(频率大)的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。 2.4.2 高效液相色谱法(HPLC) [43] 高效液相色谱法是一种以液体为流动相的现代柱色谱分离分析技术。该技术具有分离效率高、分析速度快、用样量少、灵敏度高、流出组分可收集, 兼具分析和制备等优点，适应于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物分离分析。对于热不稳定性或极性大的天然色素来说，HPLC 是一种有效的分离分析方法。 [44] 赵明波等建立了菊科植物红花中的主要有效成分羟基红花黄色素A的HPLC定量分析方法。HPLC技术在天然色素成分分析中的应用研究主要有玉米黄素、β-玉米黄素、叶黄素、番茄红素、α，β- 胡萝卜素的分析。如:玉米黄素、叶黄素、番茄红素与β-胡萝卜素用NovapakC18(4.6mm×150mm)色谱柱，流动相为乙腈-甲醇-二氯甲烷(体积比70:20:10);β-胡萝卜素、VE、VD用正相L Porasil柱，反相VydacTP 54柱，流3 动相为己烷-二异丙醚-10%二异丙醚己烷溶液，梯度甲醇-水(体积比93:7);玉米黄素，叶黄素，β-玉米黄素，α，β-胡萝卜素，用C185 Lm色谱柱，流动相为乙腈-甲醇-二氯乙烷(体积比60 B35 B5)，含0.1%BHT、0.1%三乙胺和0.05mol/L醋酸铵;玉米黄素用C18柱，流动相为甲醇-四氢呋喃(体积比95B5)，流速为1.0mL/min。 2.4.3 薄层色谱法 薄层色谱，或称薄层层析(thin—layer chromatography)，是以涂布于支持板上的 11 长春工业大学本科毕业论文 支持物作为固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分离、鉴定和定量的一 [45]种层析分离技术。这是一种快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质的特别有效的层析方法，一般是将固定相(如硅胶)薄薄地均匀涂敷在底板(或棒)上，试样点在薄层一端，在展开罐内展开，由于各组分在薄层上的移动距离不同，形成互相分离的斑点，测定各斑点的位置及其密度就可以完成对试样的定性、定量分析的色谱法。 [46] 薄层层析有许多优点:它保持了操作方便、设备简单、显色容易等特点，同时展开速率快，一般仅需15,20分钟;混合物易分离，而且还可以使用如浓硫酸、浓盐酸之类的腐蚀性显色剂。薄层层析的缺点是对生物高分子的分离效果不甚理想。 2.5 研究内容及研究意义 蛹虫草作为我国名贵且传统的强壮滋补品，在历史上很早就引起了重视和应用。近年来由于国家的重视和商业经济的需求，对蛹虫草的生产、研究和应用取得了迅速发展。蛹虫草天然色素作为蛹虫草子实体中的生理活性物质之一，也是研究的重点。所以，随着对蛹虫草子实体中天然色素研究的不断深入，利用蛹虫草子实体中天然色素开发的保健品，功能性食品添加剂和药品的市场前景为人研究者们所看好。为了研究出有利于人们身体健康的、经济效益高的蛹虫草子实体中天然色素的深加工产品，就需要我们广大的食品科学家、生物学家和医学家们的共同努力，从而带动整个研究的快速发展。 本实验就蛹虫草子实体中天然色素的提取进行了进一步的研究，不仅以天然色素的提取产量为目标，还考虑到后续的处理方面，在尽可能多的提取出蛹虫草子实体天然色素的基础上，通过提取方法的优化，在提取过程中完成了对天然色素的初级提取分离操作。本实验为以后进一步研究蛹虫草子实体天然色素的结构奠定基础，也进一步为开发蛹虫草子实体天然色素产品提供了理论依据以及广阔的市场经济前景，其实验数据及实验方法也为其他领域的研究提供了平台和参考。 12 长春工业大学本科毕业论文 第三章 试验部分 3.1 材料与设备 3.1.1 原材料 蛹虫草子实体，经粉碎后，干燥条件下保存备用。 3.1.2 主要仪器 (1)YJ1002型电子天平，上海精密科学仪器有限公司; (2)FQ-250DB型数控超声波清洗器，昆山市超声波仪器有限公司; (4)721紫外可见分光光度计，上海亚容生化仪器厂; (5)DK-98-?型电子恒温水浴锅，天津市泰斯特仪器有限公司; (6)G8023CTL-K3名秀光波微波炉，佛山市顺德区格兰仕微波炉电器有限公司; (7)101A型电热鼓风干燥箱，中国天津泰斯特仪器有限公司; (8)DH6-914385-?电热恒温鼓风干燥箱，上海新苗医疗器械制造有限公司; )HZQ-F160全温振荡培养箱，太仓市华美生化仪器厂。 (9 3.1.3 主要试剂 (1)甲醇(分析纯) (2)丙酮(分析纯) (3)盐酸(分析纯) (4)乙醚(分析纯) (5)石油醚(分析纯) 3.2 试验方法 3.2.1蛹虫草子实体中天然色素的提取工艺 3.2.1.1 酸热浸提法 按每克样品加2mol/L盐酸10mL，室温下浸泡40min，在沸水浴中处理4min，迅速冷却，3000r/min离心10min，弃上清液，将沉淀用蒸馏水洗涤2次后加20mL丙酮，室温下振荡30min以浸提天然色素，然后再在4000r/min条件下离心15min，得上清液即为天然色素的浸提液。 3.2.1.2 超声波法 称取一定量样品，丙酮为提取剂，料液比1?20(g/mL)，避光条件下超声波提取1h，为了保持超声温度恒定，采用分段超声，10min为一个提取阶段。超声后室温下 13 长春工业大学本科毕业论文 振荡30min，离心后取上清液得天然色素的浸提液。 3.2.1.3 微波法 称取一定量样品，丙酮为提取剂，料液比1?20(g/mL)，混匀后置于微波炉中。在微波功率为140W的提取条件下，提取时间3min。微波提取后，于室温下振荡30min，离心得天然色素的浸提液。 3.2.1.4一般研磨法 称取1g样品，加入0.5g石英砂研磨，同时加入20mL丙酮作为助磨剂，研磨时间为15min，所得混合物直接用于浸提。室温下振荡30min，4000r/min离心10min得天然色素的提取液。 3.2.2蛹虫草子实体中天然色素提取工艺的优化(酸热法) 图3.1 天然色素提取工艺 3.2.2.1 单因素试验 (1)盐酸浓度对蛹虫草子实体中天然色素提取率的影响 分别按每克样品加0.01mol/L、0.02mol/L、0.03mol/L、0.04mol/L、0.05mol/L、0.06mol/L盐酸溶液按照酸热提取法的提取工艺过程进行实验，从而确定适宜的盐酸 14 长春工业大学本科毕业论文 浓度。 (2)盐酸用量对蛹虫草子实体中天然色素提取率的影响 分别按每克样品加0.5mol/L的盐酸溶液5mL、10mL、15mL、20mL、25mL、30mL，按照酸热提取法的提取工艺过程进行实验，从而确定适宜的盐酸用量。 (3)热处理时间对蛹虫草子实体中天然色素提取率的影响 按照酸热提取法的提取工艺过程，分别在沸水浴中处理1min、2min、4min、6min、8min、10min，从而确定适宜的热处理时间。 3.2.2.2 响应面优化实验 根据Box-Behnken的中心组合试验设计原理，综合单因素影响试验结果，选取盐酸浓度、盐酸用量、丙酮浸提时间对天然色素提取影响显著的3个因素，在单因素试验基础上采用三因素三水平的响应面分析方法，因素与水平见表3.1，Box-Behnken Design 试验设计表见表3.2。 表3.1 酸热法响应面试验因素水平表 因素 水平 -1 0 1 盐酸浓度(mol/L) 0.2 0.5 1 盐酸用量(mL) 5 10 15 热处理时间(min) 2 4 6 表3.2 Box-Behnken Design 试验设计表 试验号 盐酸浓度盐酸用量 热处理时间色素产量 (mol/L) (mL) (min) (μg/g) 1 0 -1 1 2 1 1 0 3 1 0 -1 4 0 1 1 5 -1 1 0 6 0 0 0 7 1 -1 0 15 长春工业大学本科毕业论文 8 -1 -1 0 9 0 0 0 10 0 0 0 11 0 -1 -1 12 -1 0 1 13 0 0 0 14 0 1 -1 15 -1 0 -1 16 0 0 0 17 1 0 1 3.2.3 蛹虫草菌丝体天然色素的检测 3.2.3.1标准曲线的绘制 准确称取β,胡萝卜素对照品10.0mg置于100mL棕色容量瓶中，加氯仿20mL溶解，继续加氯仿至刻度，摇匀。准确量取10.00mL溶液置于100mL棕色容量瓶中加氯仿稀释至刻度，摇匀。分别吸取0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL溶液置于25mL棕色容量瓶中加氯仿至刻度，以0(00mL为空白，在455nm的波长处测定吸收度。 3.2.3.2 色素的检测 提取色素之后，将提取液适当稀释，用分光光度计在475nm处测定吸光度。 3.2.4 蛹虫草子实体中天然色素的性质研究 3.2.4.1 光照对天然色素稳定性的影响 将天然色素提取液分别置于阳光直射、室内自然光和避光条件下保存24h、48h、72h，测定吸光度的变化。 3.2.4.2 温度对天然色素稳定性的影响 将天然色素提取液分别置于25、60、80、100?下保存1h 、2h 、3h 、4 h ，测定吸光度的变化。 3.3 结果与讨论 3.3.1 β,胡萝卜素标准曲线的绘制 16 长春工业大学本科毕业论文 图3.2 β,胡萝卜素标准曲线 图3.2表示,在455nm处测吸光值，以β,胡萝卜素浓度(μg/mL)为横坐标，吸光值吸光度平均值为纵坐标，得线性回归方程为Y,0.1672X+0.0021, 相关系数r=0.9999。结果表明β,胡萝卜素在0.8μg/mL~4.0μg/mL范围内，吸收度值与浓度呈良好的线性关系。 3.3.2 蛹虫草子实体天然色素提取方法的比较 3.3.2.1 提取方法的选择 由图3.3可知，酸热法的提取效果是最好的，其主要原因可能是，酸热法使用了盐酸，而盐酸对细胞壁中某些紧密的结构具有强力疏松作用，在同时经过盐酸浸泡、沸水加热的工艺之后，细胞壁的结构被破坏，胞内的物质溶出。酸热法与研磨法、超声波法及微波法相比，最显著的优点是设备简单、成本低、能耗小。 17 长春工业大学本科毕业论文 图3.3提取方法的比较 3.3.2.2 浸提溶剂的选择 图3.4 不同浸提溶剂的选择 由图3.4可知，丙酮的色素提取产量最高，石油醚的色素提取产量最低，分析其原因，丙酮是强极性有机溶剂，比弱极性有机溶剂如乙醚等提取色素产量更高。 3.3.3酸热法提取蛹虫草子实体中天然色素的单因素分析 3.3.3.1盐酸浓度对蛹虫草子实体中天然色素提取率的影响 18 长春工业大学本科毕业论文 图3.5 盐酸浓度对色素产量的影响 实验结果表明(如图3.5)，盐酸浓度在0.05,0.06mol/L范围内，随着盐酸浓度的降低，色素产量逐渐增大，0.05mol/L时色素产量最大。 3.3.3.2盐酸用量对蛹虫草子实体中天然色素提取率的影响 图3.6 盐酸用量对色素产量的影响 19 长春工业大学本科毕业论文 实验结果表明(如图3.6)，随着浓度的增大，色素产量逐渐降低，说明盐酸浓度过大对色素有一定的破坏作用;盐酸浓度太小，色素产量较低，说明破壁效果不明显。 3.3.3.3 热处理时间对蛹虫草子实体中天然色素提取率的影响 图3.7 热处理时间对色素产量的影响 实验结果表明(如图3.7)，热处理时间在0,4min时，色素产量逐渐增加，4min时色素产量最大，热处理时间继续增加, 色素产量开始降低。 3.3.4响应面优化酸热法提取蛹虫草子实体中的天然色素 3.3.4.1 响应面试验结果 表3.3 Box-Behnken Design 试验设计结果 试验号 盐酸浓度盐酸用量 热处理时间色素产量 (mol/L) (mL) (min) (μg/g) 1 0 -1 1 1743 2 1 1 0 952 3 1 0 -1 1009 20 长春工业大学本科毕业论文 4 0 1 1 2080 5 -1 1 0 515 6 0 0 0 2746 7 1 -1 0 824 8 -1 -1 0 501 9 0 0 0 2746 10 0 0 0 2745 11 0 -1 -1 1498 12 -1 0 1 528 13 0 0 0 2746 14 0 1 -1 1567 15 -1 0 -1 589 16 0 0 0 2747 17 1 0 1 918 采用Design Expert 7.0 软件对表3.3试验数据进行回归分析，由此可求出影响因素的一次效应、二次效应及其交互效应的关联方程，对酸热提取法提取蛹虫草子实体中天然色素的影响因素进行更深入的研究和条件优化，并做出响应面图。多元回归拟合分析得到天然色素的色素产量与各因素变量的二次方程模型为: 色素产量(ug/g)= 2746.00+196.2* A+68.50* B+75.75* C +28.50*A*B-7.50*A*C+67.00*B* 222 C-1504.50* A-543.50* B-480.50* C 3.3.4.2 回归方程方差分析 回归方差分析见表3.4，用上述回归方程描述各因素与响应值之间的关系时，其因变量和全体自变量之间的线性关系显著，模型的显著水平远远小于0.05，此时Quadratic回归方差模型极显著。从回归方程各项的方差分析结果还可以看出方程的失拟项较小，表明该方程对试验拟合情况好、误差小，因此可用该回归方程代替试验真实点对试验结果进行分析和预测。从表3.6还可以看出,对色素产量影响的大小依次为盐酸浓度、热处理时间、盐酸用量。 21 长春工业大学本科毕业论文 表3.4 方差分析表 方差来源 平方和 自由度 均方 f值 p值 显著性 模型 1.30 9 1.45 90.37 <0.0001 A-盐酸浓度(mol/L) 3.08 1 3.08 19.16 0.0032 ** B-盐酸用量(ml/g) 1 37538.00 2.33 0.1703 37538.00 C-热处理时间(min) 45904.50 1 45904.00 2.86 0.1349 AB 3249.00 1 3249.00 0.20 0.6666 AC 225.00 1 225.00 0.014 0.9092 BC 17956.00 1 17956.00 1.12 0.3257 2A 9.53 1 9.53 592.81 <0.0001 ** 2B 1.24 1 1.24 77.36 <0.0001 ** 2C 9.72 1 9.72 60.47 0.0001 总残差 1.12 7 16077.00 失拟误差 1.12 3 37512.33 75024.6<0.0001 ** 7 纯误差 2.00 4 0.50 总和 1.32 16 注:* * .P , 0 . 0 1 ，差异极显著;* .P , 0 . 0 5 ，差异显著。 3.3.3.3 响应面曲面分析 RSM 方法的图形是特定的响应面(Y)与对应的因素X1、X2、X3构成的一个三维空间在二维平面上的等高图，每个响应面对其中两个因素进行分析，另外一个因素固定在零水平。从中可以直观地反映各因素对响应值的影响，从试验所得的响应面分析图上可以找到它们在提取过程中的相互作用。回归优化响应面图分别见图3.8。 22 长春工业大学本科毕业论文 盐酸浓度与盐酸用量对天然色素提取率影响的响应面和等高线图 23 长春工业大学本科毕业论文 盐酸浓度与热处理时间对天然色素提取率影响的响应面和等高线图 24 长春工业大学本科毕业论文 盐酸用量与热处理时间对天然色素提取率影响的响应面和等高线图 3.8 图 25 长春工业大学本科毕业论文 图3.8直观地反映了各因素对响应值的影响，比较图中6个图可知:盐酸浓度对天然谁说的色素产量的影响最为显著，表现为曲线相对较陡;而盐酸用量、热处理时间表现为曲线较为平滑，随其数值的增加或减少，响应值变化较小。根据所得到的模型， 可预测在稳定状态下的最优工艺条件为在室温条件下，盐酸浓度0.05mol/L,盐酸用量10mL，热处理时间5min。此条件下，天然色素的产量为2747.71μg/g。 3.3.3.4 验证实验 为了检验实验结果是否与真实情况相一致，根据上述结果进行近似验证实验，考虑到实际操作的便利，将最佳工艺条件修正为室温条件下，盐酸浓度0.,05mol/L，盐酸用量10mL，热处理时间5min,在此条件下进行3 次平行实验天然色素的色素产量为2743.01μg/g。与理论预测值相比，其相对误差约为0.171%。而且重复性也很好，说明优化结果可靠。 3.3.5 蛹虫草子实体中天然色素的性质研究 3.3.5.1 光照对天然色素稳定性的影响 图3.9 光照对天然色素稳定性的影响 由图3.9可知，日光对类胡萝卜素有明显的破坏作用，而室内自然光及放置在暗处对天然色素的影响相对较小，所以用天然色素着色的食品在储存和运输过程中应尽量避免阳光直射，以保持食品色泽。 26 长春工业大学本科毕业论文 3.3.5.1 温度对天然色素稳定性的影响 图3.10 温度对天然色素稳定性的影响 由图3.10可知，天然色素随着温度的升高，降解速度加快，温度对天然色素有一 定的破坏作用。 27 长春工业大学本科毕业论文 第四章 结论与展望 4.1 结论 (1)本实验以用蛹虫草子实体中天然色素的提取率为标准，比较了四种提取方法，其中因酸热提取法操作简易，条件易控制，结果精准，提取率最高，成为最适合的提取方法。提取后利用紫外-可见分光光度法检测天然色素。 (2)在单因素试验的基础上，经响应面优化实验确定了提取用虫草子实体中天然色素的最佳工艺条件为:盐酸浓度0.05mol/L,盐酸用量10mL，热处理时间5min,并以丙酮为提取溶剂，用量为10mL。在此条件下，天然色素的提取率为2747.71μg/g。 (3)对于天然色素的稳定性，日光对天然色素有明显的破坏作用，温度升高对天然色素有一定的破坏作用。 4.2 展望 综合蛹虫草子实体中天然色素的上述药理作用，蛹虫草子实体不仅有抗肿瘤、降血糖、抗衰老、提高免疫力的作用，还能够抗炎及治疗肝的病毒性感染。 本实验取得了一些成果，但仍然有需要提高和完善的地方，比如在检测方法上，分光光度法检测蛹虫草子实体天然色素含量存在一定的缺陷，因此还需要进一步摸索更准确的蛹虫草子实体天然色素含量测定方法;对于工业化生产中蛹虫草子实体天然色素的提纯，还需要寻找更经济的方法和材料等。本实验来源于社会的需求，在技术上已经具有一定的基础，随着人工培养蛹虫草产业规模的不断扩大，作为培养附属产物的固体培养基的产出量也会越来越大。因此该研究课题具有良好的开发价值，其产业化必然会带来良好的社会效益和环境效益。 随着对蛹虫草子实体天然色素的生物活性研究进一步深入，天然色素的生物活性机理及功效因子将会更加明确，它的应用领域也必将会更加拓宽。但是，由于多天然色素本身的结构很复杂，种类繁多，其结构的测定和分离纯化有较大的难度，有些子实体天然色素的药理作用还与许多其它因素有关，给色素的研究及应用带来许多挑战，这需要相关行业的人士来共同应对。 近些年，人们的健康保健意识逐渐增强。天然色素作为保健食品的成分也将会成为人们研究的重点。我国天然色素资源丰富，应用历史悠久，具有巨大的开发前景。通过对蛹虫草子实体天然色素的构效和量效关系的研究，人们将会利用我国丰富的多糖资源，生产出高附加值的保健食品，以提高人民身体素质、增进健康、提高生活质量。 28 长春工业大学本科毕业论文 致 谢 在这里首先要感谢我的导师王志兵老师。王志兵老师平日里工作繁多，但在我做毕业设计的每个阶段，论文从选题、构思、资料收集到最后定稿的各个环节给予细心的指引和教导，使我对于蛹虫草子实体天然色素的提取有了深刻的认识，并最终得以完成毕业论文。我的设计较为复杂烦琐，但是王老师仍然细心地纠正论文中的错误。除了敬佩王老师的专业水平外，王老师严谨的治学态度、丰富渊博的知识、敏锐的学术思维、精益求精的工作态度、积极进取的科研精神以及诲人不倦的师者风范是我毕业生的学习楷模，并将积极影响我今后的学习和工作。同时也非常感谢给予我支持的邱芳萍老师为我的试验提供了实验场所和仪器设备。论文是在长春工业大学食品功能研究所完成的，在整个设计和实施过程中，学长学姐对论文的开展提出了许多宝贵的意见和建议，使我受益匪浅。 其次还要感谢大学四年来所有的老师，为我们打下牢固专业知识的基础;同时还要感谢所有的同学们，正是因为有了你们的支持和鼓励。此次毕业设计才会顺利完成。 然后感谢长春工业大学四年来对我的大力栽培。在四年的大学生涯里，还得到众多老师的关心支持和帮助，在此谨向老师们致以衷心的感谢和崇高的敬意。 最后，我要向在百忙之中抽时间对本文进行审阅、评议和参加本人论文答辩的各位老师表示感谢。 29 长春工业大学本科毕业论文 参考文献 [1]林群英,宋斌,李泰辉等.蛹虫草研究进展[J].微生物学通报，2006,33(4):154-157 [2]陈顺志.冬虫夏草和北虫草研究进展[J].中国生化药物杂志,1995,5(16):242-245 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“三严三实”第三次专题学习研讨会，是按照中央指示精神和集团公司党组统一部署开展的重要会议，旨在通过扎实推进专题学习教育，与抓巡视整改相结合，转变认识，谋划发展。 本次专题学习研讨会主题聚焦“严以用权，真抓实干，实实在在谋事、创业、做人，树立忠诚、干净、担当的新形象”，各单位主要领导率先垂范，结合自身学习和工作实际，谈理解，讲认识，查摆问题，分析原因，明确下一步工作思路和举措，涤荡了灵魂，启发了思路，收到了较好的效果。 33 长春工业大学本科毕业论文 “这次专题学习研讨气氛很好，大家收获都很多，这次让事业部各成员单位的主要领导也参与进来，为下一步各单位召开第三专题学习研讨，打下了很好的基础。” 熊群力在研讨讲话中，对学习研讨和通信事业部组建运行以来取得的成绩给予充分肯定，并着重从四个方面谈了认识，提出了希望和要求。 第一，专题学习研讨，准备充分，很务实。 研讨中很多同志能够结合单位实际，把自己摆进去，分析很具体、态度很端正、组织很，开得很成功。但是，一定要正确认识，专题学习研讨结束了，并不意味着“三严三实”教育工作结束。评价这次教育工作有没有效果，关键还在于看各单位改革发展的成效，看问题的整改是否到位。大家要化“三严三实”精神为改革发展的行动，不断在通信领域加强事业部的活力、控制力和影响力。从这个意义上说，“三严三实”为大家提供了思想动力，而下一步的发展则是“三严三实”教育成果的检验。 第二，总体运行情况良好，符合预期。 通信事业部组建至今，已经拿出了一个发展规划，组织管理也有一定作为，基本上已经作为一级组织形象开始发声，这证明集团公司“三级架构、两级经营”的理念没有错，更坚定了我们推行板块化、事业部和子集团发展模式的信心。 34 长春工业大学本科毕业论文 第三，规划做好，事业才能扎扎实实地往前发展。 通信事业部组织力量完成了规划初稿，还需要进一步结合十八届五中全会新的精神，进一步思考、细化，明确以军事通信为核心、以军民融合发展为主线的发展思路。未来的规划，要能在一定程度上代表我军通信业务的发展，代表军民融合通信的发展走向和水平，可以从技术、市场、经济、现代企业制度建设以及党建和企业文化建设等五个主线条做好规划。 第四，通信事业部还要加快发展的步伐。 改革的步伐要加快，站位、卡位的步伐也要加快，如科技创新体系建设、资源整合和布局，以及党的建设、思想文化建设。只有加快发展步伐，才能使得通信事业部作为一级组织尽快明晰起来，从而及时抓住机遇，尽快形成发展合力，体现事业部的价值。 樊友山在听取了中科芯(58所)领导班子成员研讨发言后指出，中科芯(58所)党委此次专题学习研讨会总体上是成功的，推动了班子的作风建设，班子思想统一、积极向上，作风状态、精神面貌有了很大的变化，运行状况较以往上了一个台阶。不过，仍然有思想认识上的问题需要给予高度重视，有些领导在查摆问题时触及到了肌肤还没有触及到灵魂，对问题分析的深度还不够。 针对中科芯(58所)下一步工作和发展，樊友山提出四方面要求: 35 长春工业大学本科毕业论文 一是以“三严三实”专题教育为契机，全面加强党的建设，把纪律和规矩挺在前面，从而端正作风，净化思想意识，凝聚广大干部职工的智慧和力量。在此过程中要提高党委掌控全局、把握发展方向的能力，在构建现代企业制度过程中充分发挥党委的政治核心作用; 二是认真谋划中科芯(58所)的战略定位，努力提升研发能力，和以研发能力为基石的核心竞争力。要认真谋划如何凭借自身的芯片技术、掩模技术在智慧城市、智慧小镇等产业领域里形成有中国电科特色的、有中科芯特色的产业; 三是切实以市场运作规律为目标来加强中科芯(58所)的机制建设，并以此提升人才队伍建设水平。要在下一步产业发展过程中体现领军人物、核心技术骨干的利益，要适应集成电路产业的市场规律来构建相应的机制; 四是善于用市场运行的规律来调整运作方式，全面提升管理水平和运作水平。要全力以赴抓好智慧中科芯园区建设，通过以智慧中科芯园区建设为试点，探索集团公司信息化建设3.0版，真正实现协同设计、协同发展;为集团公司物联网发展模式提供探索，形成整体的基于中国制造2025、“互联网+”的智慧运作区域;要思考出基于互联网概念的运作模式，满足可互动、可体验、可展示的要求。 党组成员、副总经理王政(兼任通信事业部管委会主任)，在专题学习研讨会上分享了他对“严以用权”的认识，并向事业部提了几点要求: 36 长春工业大学本科毕业论文 一是继续深入学习习近平总书记系列重要讲话和十八届五中全会精神，重新审视并做好事业部的“十三五”发展规划; 二是统一思想、坚定信心，推进通信事业部的各项工作; 三是确保2015年通信事业部经营目标的全面实现，着手部署好2016年的工作; 四是按照“三严三实”要求，加强党风廉政建设，班子成员要切实履行好一岗双责。 作为全程督导“三严三实”专题教育工作，并参加本次学习研讨的第三推进组组长陈永俊和第四推进组组长王菊明，对两个单位的学习研讨给予了高度评价，认为会前准备工作充分，撰写发言稿认真，会上能够畅所欲言、不拘形式，坚持问题导向，以正反两面为镜子，对严以用权认识深刻，与本单位的改革发展结合紧密，研讨内容丰富，会议达到了预期效果，是一次高质量、深层次的会议。 通信事业部总经理涂天杰、中科芯(58所)总经理刘岱在表态发言中表示，一定要按照这次专题学习研讨的精神，牢记使命和责任，坚持从严从实的作风，以实际行动做实各项工作，为集团公司高质量进入世界500强和“国内卓越、世界一流”目标的实现贡献力量。 37 长春工业大学本科毕业论文 宝钢举行党委中心组“三严三实”第三次专题学习研讨 “严以用权，首先要弄清楚权力是谁赋予的，权力要有约束，有权不能任性。严以用权不是不作为、不担当，权力与责任是对等的。党员领导干部要用好手中的权，反对消极懈怠无所作为，要以饱满的精神状态接受‘冬常态’的考验，带领员工，推动宝钢深化改革和转型发展。”11月6日，宝钢集团公司党委书记、董事长徐乐江在党委中心组“三严三实”第三次专题学习研讨会上谈学习体会，并对党员领导干部提出要求。围绕严以用权，宝钢集团公司领导班子成员结合宝钢当前的生产经营现状、分管工作实际和个人思想作风实际，深入研讨如何用好手中的权力，推动宝钢二次创业。徐乐江主持会议，宝钢集团公司总经理陈德荣出席会议。 按照党中央部署、国资委党委要求和宝钢党委的安排，在宝钢领导人员中开展“三严三实”专题教育。今年6月、9月，党委中心组分别围绕严以修身、严以律己开展了专题学习研讨。第三次专题学习研讨的主题是:严以用权，真抓实干，实实在在谋事创业做人，树立忠诚、干净、担当的新形象，坚持敢于担当的履职准则，解决“肩膀过硬”问题。集团公司专门编发了学习材料，集团公司领导班子成员带头学，并要求各单位在自学基础上，召开一次专题组织生活进行学习讨论。同时，还及时组织传达学习了党的十八届五中全会精神，组织学习了《中国共产党廉洁自律准则》和《中国共产党纪律处分条 38 长春工业大学本科毕业论文 例》等相关文件，深刻领会、准确把握两部党内法规的主要条款和精神实质，为开展好此次“严以用权”主题的研讨做好准备。 集团公司工会主席朱义明作《宝钢管理者问卷“三严三实”专题教育专项调查情况报告》。调查报告显示，大多数基层员工认为所在单位能够按照“PDCA+认真”要求，将“三严三实”专题教育做扎实、做细致、做到位。“三严三实”专题教育开展以来，宝钢领导人员在“严以律己”方面改变较为明显，大多数能够做到“严以用权”，落实中央八项规定精神，深化作风建设成效较为显著。报告也反映了一些问题，有基层员工反映领导干部中还存在“凭关系办事，不讲规矩，内外有别，公私不分”、“独断专行、家长作风、搞‘一言堂’”等问题。还有员工们建议，领导人员落实“三严三实”要“一级做给一级看”，防止“一级说给一级听”。希望领导能以身作则，多一点鼓励、指导，少一点形式主义，能融入群众之中，共同面对问题、解决问题。 陈德荣围绕“宝钢新一轮战略发展、存在的困难和挑战，领导干部应以怎样的精神状态，敢于担责、干事创业”谈学习体会。陈德荣指出，严以用权首先要弄清权从哪里来、权该为谁用、权应怎么用等问题，自觉提升践行严以用权的自觉性。“严以用权”包含了四层含义:坚持用权为民;按规则、按制度行使权力;把权力关进制度的笼子里;任何时候都不搞特权、不以权谋私。严以用权，必须要畏权如用火。领导人员要充分认识到公权滥用、公权私用的危害性，管住自 39 长春工业大学本科毕业论文 己的欲望，管好手中的权力。严以用权，必须要民主使用权力。领导人员必须要坚持民主集中制原则，严格落实“三重一大”决策制度。这不仅是工作方法问题，更是执政能力、执政水平和党性修养的体现。严以用权，必须还要体现勇于担当。严以用权的落脚点是必须用好权，要认识到严以用权与敢于担当是辩证统一。权力意味着责任，权力越大责任也越大。不能为官不为。要围绕“上下同欲者胜”，拿出干事创业的精神状态，把严以用权落实到应对行业严冬，转型发展、创新创业等实际工作中去，切实做到严以用权的同时勇于担当、善谋善成。严以用权也是对公司治理水平的反映。在公司治理层面，严以用权的落脚点应该是如何建立起科学有效的管理架构、决策机制和责任机制。陈德荣表示，要充分发挥表率作用，始终保持攻坚克难的勇气，正视问题不回避、承担责任不推诿、直面矛盾不上交，严以用权，敢于担责、干事创业，团结领导班子成员，在深化国企改革的大背景下，积极应对复杂多变的市场形势，激发广大干部群众干事创业的积极性、主动性和创造性。 集团公司副总经理周竹平围绕“在新一轮发展中，如何真抓实干，推进企业调整改革、转型发展”谈学习体会。宝钢正处在深化改革、转型发展的关键时期，能否顺利实现公司深化改革和转型发展目标，一支作风清廉、业务精熟、勇于创新、严以用权的干部队伍是关键因素之一。要以这次专题教育为契机，引导各级领导人员把“三严三实”要求转化为改进作风、敢于担当、干事创业的强大动力，为公司的深化改革和转型发展提供强有力的政治保证。周竹平结合自己分管的工 40 长春工业大学本科毕业论文 作和宝钢实际，对宝钢深化改革和规划工作的认识和初步设想作了阐述。他表示，新的经济形势、产业趋势和市场环境，赋予宝钢“二次创业”以新的改革发展背景和内涵，宝钢要积极探索新的改革思路、提出新的变革举措，在深化改革中凤凰涅槃、再创辉煌。 伏中哲、戴志浩、赵周礼等党委中心组成员作了互动交流发言。他们表示，严以用权就是要牢固树立正确的权力观。领导干部要始终想到手中的权力是人民赋予的，要始终把公司利益、员工利益放在第一位。认真对待手中的权力，要时刻提醒自己为谁掌权，为谁服务。按原则、按制度行使权力。严以用权既是党性修养的内在要求，也是为官做人，干事创业的关键所在。领导干部对手中的权力要始终保持如履薄冰的谨慎，坚决守住干净为官的底线。严以用权不是不作为，而是为官有为，保持昂扬向上的精神状态，以上率下，上下同欲，为二次创业作出更大贡献。 徐乐江从三个方面谈学习体会。第一，党员领导干部要清醒地认识到手中的权力是谁赋予的。通过“三严三实”教育，结合中央巡视组向宝钢反馈的情况，党员领导干部要提高对权力的认识，要坚持权为民所用、为公所用。第二，有权不能任性。《中国共产党廉洁自律准则》和《中国共产党纪律处分条例》等相关文件的出台，是党中央从制度建设的角度，要求党员干部严守廉洁从业底线，不敢腐、不能腐、不想腐。徐乐江要求各级党组织过一次组织生活，认真学习，让《准则》和《条例》真正成为党员和领导干部的自觉行动。第三，权 41 长春工业大学本科毕业论文 力就是责任，有权必须担当。必须履职尽责，为官有为，坚决反对消极懈怠，无所作为。徐乐江指出，权力和责任是对等的，严以用权，不是不担当、不作为，遇到难题绕道走，而是要以饱满的精神状态，应对困难的决心，迎接“冬常态”的考验。坚定信念，率先垂范，带动各级管理者和员工，在宝钢当前面临的前所未有的挑战中，走出一条路来，推动宝钢深化改革和转型发展。 集团公司党委中心组成员，总部部门负责人、二级单位党委书记参加了学习研讨。国资委党建局组织处魏征同志参加会议。 国开行党委中心组举行“严以用权”专题学习研讨 国开行党委书记、董事长胡怀邦11月10日在京主持召开党委中心组学习(扩大)会议。党委班子成员联系对照正反两方面典型，围绕“严以用权，真抓实干，实实在在谋事创业做人，做忠诚、干净、担当的‘好干部’”这一主题，紧扣国开行实际，把自己摆进去，进行专题学习研讨。正在国外访问的国开行党委副书记、行长郑之杰提交书面发言。党委副书记、监事长刘梅生，党委委员、副行长李吉平、王用生、袁力，党委委员、纪委书记周清玉，党委委员、副行长丁向群、张旭光出席会议并作学习研讨发言。中央国家机关纪工委委员、办公 42 长春工业大学本科毕业论文 室主任张俊森，中组部有关部门同志应邀到会。国开行总行有关部门负责同志列席会议。 胡怀邦带头作学习研讨发言。他强调，能否严以用权是对领导干部对党忠诚、个人干净、敢于担当的考验。就国开行而言，严以用权是用好金融资源、服务经济社会发展的必然要求。领导干部必须过好权力关，把严以用权落到实处。一是为民用权，树立正确的权力观。必须牢记“权为民所赋，权为民所用”，带着感情做好民生工作，把国家的惠民政策落到实处。二是依法用权，按照规章制度行使权力。自觉尊法学法守法用法，建立权力清单、责任清单、行为清单，严肃查处违法违规用权行为。三是尽职用权，担当起谋事创业之责。进一步强化责任意识和担当意识，推进国开行改革发展，更好地服务国家战略。同时加强干部考核工作，坚决整治庸政懒政怠政不作为现象。四是公正用权，处理好公与私的关系，为全行干部员工作出表率，在行内营造风清气正的政治生态和从业环境。五是阳光用权，主动自觉接受监督。党委班子成员要带头配合巡视，主动接受巡视监督;全行每一位领导干部也都应积极配合巡视监督，让权力在阳光下运行。 郑之杰在书面发言中指出，严以用权是领导干部为官从政的基本准则，是践行“三严三实”的关键，必须树立正确的权力观，做到“四有四用”。一是心中有法，依法用权;二是心中有民，秉公用权;三是心中有戒，廉洁用权;四是心中有责，勤勉用权。国开行作为国有开发性金融机构，肩负着代表国家和人民行使金融权力的重要职责， 43 长春工业大学本科毕业论文 必须正确认识和对待金融机构的权力，更好地运用金融来服务经济社会发展。下一步，一是加强学习，增强履职用权的本领;二是扎实推动业务发展，有效防控风险;三是加强制度建设与监督，切实把依法治行从严治行落到实处。 刘梅生在发言中指出，我们的党作为执政党，权力来自人民，用权就是要为国家为人民谋利益。党员领导干部，一是应当立根固本，为民用权。要坚定理想信念，不断加强学习、勇于实践，真正担当起权力赋予的责任。二是应当遵章守纪，严以用权。要正确对待权力、规范使用权力，不断提高党性修养，自觉接受监督，切实做到务实、公正用权。三是应当忠诚担当，谋事创业。当前，我国经济下行压力依然较大，国开行服务国家战略可谓任务重、责任大，党员领导干部必须率先垂范，发挥带动作用，切实承担起应尽的职责。 出席会议的其他党委班子成员结合工作和思想实际，依次作学习研讨发言。大家一致认为，严以用权是领导干部作风的核心问题，是每个领导干部的第一道门槛和第一堂必修课。作为国开行党委班子成员，必须树立正确的权力观，坚持为民用权、公正用权、依法用权、廉洁用权，把权力关进制度的笼子里，任何时候都不搞特权、不以权谋私，做忠诚、干净、担当的“好干部”，积极推进开发性金融为服务国家战略作出更大贡献。 最后，胡怀邦对国开行前一段“三严三实”专题教育工作进行总结，并对下一步工作进行部署。他要求，要继续抓好“三严三实”专 44 长春工业大学本科毕业论文 题教育后续工作，配合好中央巡视有关工作。一是强化学习教育长效机制，坚持不懈抓学习。继续深入学习习近平总书记系列重要讲话和十八届四中、五中全会精神，加强主观世界改造，强化思想自觉。二是以高度政治责任感全力配合开展好专项巡视工作。三是继续突出问题导向，抓好整改落实。坚持即知即改、边学边查边改，制定整改台账，落实责任人和时限要求，实时更新。四是切实加强党建和落实“两个责任”，加强民主集中制，加强干部队伍和基层党组织建设，强化监督和党章党纪意识，始终把纪律挺在前面。五是全力以赴完成年底各项工作任务，编制好国开行“十三五”业务发展各项规划，更好发挥开发性金融服务国家战略的独特作用。 王宪魁:争做“三严三实”好干部树立忠诚干 净担当新形象 5月18日上午，黑龙江省委举办“三严三实”专题教育党课，正式启动全省县处级以上领导干部“三严三实”专题教育。省委书记王宪魁以《争做“三严三实”好干部，树立忠诚干净担当新形象》为题带头讲专题党课。他强调，习近平总书记提出的“三严三实”要求，彰显着马克思主义执政党的政治品格，体现出共产党人的价值追求，丰富了管党治党的思想理念，是加强党员干部党性修养、深入推进新 45 长春工业大学本科毕业论文 形势下党的建设的重要遵循。各级领导干部要认真学习习近平总书记系列重要讲话精神，充分认识和把握“三严三实”的重大意义、深刻内涵和实践要求，在党言党、在党忧党、在党为党、在党护党，自觉践行“三严三实”，着力解决“不严不实”突出问题，永远保持自身先进和纯洁，争做“三严三实”好干部，树立忠诚干净担当新形象。 陆昊主持专题教育党课。杜宇新、陈润儿、黄建盛、张效廉、马学义、杨汭、陈海波、杨东奇、郝会龙、李海涛在哈尔滨主会场听党课。 王宪魁强调，“三严三实”意义重大、影响深远，充分体现出党中央从严从实的治党理念。践行“三严三实”是永葆党的先进性和纯洁性、建设马克思主义执政党的内在要求，必须站到党的事业全局来认识和看待，把“三严三实”要求贯穿于党的建设全过程，不断提高党的建设科学化水平。践行“三严三实”是落实“四个全面”战略布局、推进党的各项事业发展的根本保证，必须坚持严字当头、实字托底，以严的作风律己，以实的作风谋事，推动各项事业不断取得新进步、实现新发展。践行“三严三实”是贯彻党的群众路线、持续深入推进作风建设的重要举措，必须始终牢记作风建设永远在路上，着力解决“不严不实”问题，使好的作风成为党员干部的思想自觉和行为习惯。践行“三严三实”是发扬党的优良传统、提高党员干部党性修养的迫切需要，必须牢牢把握“三严三实”这一管党治党要求，加强党员干部教育管理，永葆共产党人政治本色。 46 长春工业大学本科毕业论文 王宪魁强调，“三严三实”内涵深刻、博大精深，切实明确了领导干部从政的基本要求。严以修身，这是领导干部从政的基础，必须锤炼品行拧紧“总开关”。把修身作为一生的必修课，加强党性修养，坚定理想信念，提升道德境界，追求高尚情操，树立正确的世界观、人生观和价值观。修身先树理想，坚持正确的政治路线、政治立场、政治方向、政治道路，坚定对中国特色社会主义的道路自信、理论自信、制度自信。修身重在立德，自觉陶冶道德情操、锤炼道德意志、筑牢道德防线，始终坚守共产党人的精神家园。修身必扬正气，讲修养、讲道德、讲人格，带头弘扬新风正气，自觉抵制歪风邪气，做良好社会风气的倡导者和先行者。 严以用权，这是领导干部从政的核心，必须树立正确权力观。对手中权力有战战兢兢、如临深渊、如履薄冰的谨慎，确保行使不偏向、不变质、不越轨、不出格。用权要为民，时刻牢记手中权力的本质，切实为人民掌好权、负好责。用权守规矩，把握法定职权必须为、法无授权不可为的基本要求，不越位、不错位、不缺位，按规则、按制度用权，真正为国家和人民谋利益。用权受监督，用制度管权管事管人，自觉接受人民监督，不断提高透明度，让阳光照进权力运行的每一个角落。 严以律己，这是领导干部从政的根本，必须守住原则底线。把增强遵规守纪的自觉性放在首位，常思“严”之益、常念“纵”之害，自己管好自己、自己管住自己。心中要始终有党，坚决贯彻执行《党 47 长春工业大学本科毕业论文 章》，牢记自己第一身份是共产党员，第一职责是为党工作，把自觉维护党中央权威、始终同党中央保持高度一致落实到具体工作中。心中要始终有戒，戒贪欲、戒嗜好、戒妄为，牢记权力不可私用、不可乱用、不可滥用，始终做到“思”而有所顾忌、“行”而不忘法纪。心中要始终有责，担负起党风廉政建设责任，不仅自己心存敬畏、手握戒尺，而且还要抓好班子、管好队伍，遵守党纪国法，做到为政清廉。 谋事要实，这是领导干部从政的前提，必须立足实际谋划发展。深入基层接地气，从实际出发谋划事业和工作，使点子、政策、符合实际情况、符合客观规律、符合科学精神。谋事要深入调查研究，省级领导同志要以身作则，各地各部门主要领导要亲力亲为，在了解情况上多多益善，在把握问题上穷根究底，在认识规律上努力攻关，在完善措施上群策群力。谋事须一切从实际出发，把上级要求和本地实际紧密结合起来，把解决具体问题与解决深层次问题结合起来，把局部利益放在全局利益中去把握，把眼前需要与长远谋划统一起来，拿出符合客观实际、干部群众认同的管用招法来解决矛盾、推动工作。谋事应功成不必在我，对打基础、利长远的工作，对定下来的、看准了的事情，一任接着一任干、一张蓝图抓到底。 创业要实，这是领导干部从政的关键，必须主动作为苦干实干。脚踏实地、真抓实干，勇于直面矛盾，善于解决问题，努力创造经得起实践、人民、历史检验的实绩。创业要敢于担当，把发展牢牢抓在 48 长春工业大学本科毕业论文 手上，以积极向上、奋发有为的工作状态，坚定不移转方式调结构、抓产业上项目，推动龙江可持续发展。创业应攻坚克难，敢于负重前行、较真碰硬，多到矛盾突出的基层去，多到问题较多的一线去，真正成为带领群众战风险、渡难关的主心骨。创业必狠抓落实，以空谈为耻、以实干为荣，真正干在实处、走在前列，争当想干事、敢干事、干成事的实干家和创业家。 做人要实，这是领导干部从政的保证，必须坚守忠诚坦荡为人。继承和发扬“三老”好传统好作风，以实实在在的行动，做出实实在在的业绩，给群众带来实实在在的利益。争做老实人，把做老实人的那股劲融入工作、学习、生活的各个方面，把心思多用在谋发展、促改革、惠民生上，甘做思想务实、生活朴实、作风扎实的老实人。敢说老实话，坚持真理、尊重事实，讲真话、讲实话，切实做到言行一致、知行统一。多干老实事，以大局为重、以发展为要、以民生为大，对工作尽力，对岗位尽责，对事业尽心，以求真务实的作风赢得群众拥戴。 王宪魁强调，“三严三实”以知促行、知行合一，不断凝聚起推动发展的强大力量。一是营造好环境，切实保持良好政治生态。严守政治纪律和政治规矩，把守纪律、树正气作为一种文化，润物无声、潜移默化于领导干部的工作生活之中。树立正确用人导向，把“三严三实”要求贯穿干部选拔任用全过程，落实好干部标准，从严把好选人用人关，切实把政治强品德好、敢担当能干事、脚踏实地埋头苦干 49 长春工业大学本科毕业论文 的干部选用起来。严肃党内政治生活，严格贯彻执行民主集中制，用好批评和自我批评这个税利武器，形成健康向上、生动活泼、团结一致的同志式的党内生活氛围。二是提振精气神，切实增强思想自觉和行动自觉。始终保持积极进取、昂扬向上的朝气，始终保持解放思想、开拓创新的勇气，始终保持只争朝夕、时不我待的锐气，在各自岗位上干出实实在在的业绩。三是展现新作为，切实推动各项事业发展。坚持两点论、两分法，既要看到前进道路上存在的问题、面临的挑战，又要看到发展的潜力、光明的前景，把“三严三实”要求贯彻到改革发展稳定各个方面，坚定不移抓好中央和省委重大决策落实。进一步加大优化发展环境力度，让企业在龙江发展感受到公平正义、生产经营秩序有充分保障。 王宪魁强调，开展“三严三实”专题教育，是从严管党治党的一项重要举措，也是关系党的建设全局的一项重要工作。各级党委(党组)要切实把开展“三严三实”专题教育作为重大政治任务，融入领导干部经常性学习教育，突出问题导向，贯彻从严要求，坚持以上率下，注重整章建制，着力做好开展专题党课、专题学习研讨、专题民主生活会和组织生活会、抓好整改落实和立规执纪等关键动作，切实解决不严不实的突出问题，务求取得实实在在成效。 其他现职副省级领导同志，在哈省管副厅级以上干部，省委党校省管干部主体培训班学员在主会场听党课。各市(地)副厅级以上干 50 长春工业大学本科毕业论文 部，县(市、区)党政正职，省直管县(市)处级以上干部在分会场收听收看党课。 51