高效液相法控制清开灵口服液质量

高效液相法控制清开灵口服液质量 抚顺师范高等专科学校毕业 学生姓名: 赵蕊 指导教师: 李峰 系别: 生化系 专业: 生物实验技术 年级: 2006年 评阅人: 提交时间: 年 月 日 高效液相法控制清开灵口服液质量 【摘要】 目的建立清开灵口服液中黄芩苷的含量测定方法。方法通过方法学考察，建立HPLC法测定清开灵口服液中黄芩苷含量的方法。结果黄芩苷在0~30 μg范围内线性关系良好，平均回收率为96.84%，RSD为0.87%(n,6)。结论 该法分离效果好，结果准确、可靠。 【关键词】 清开灵口服液; 黄芩苷; 高效液相色谱法 Determination of Baicalin in Qingkailing Oral Solution by HPLC Abstract:ObjectiveTo measure the content of Qingkailing Oral Solution by HPLC. MethodsHPLC was used.ResultsA good linear relationship was obtained within the range of 0~30μg，and the average recovery was 96. 84%, RSD,0.87% (n=6) .ConclusionThe method can separate effectively, and the result is accurate and reliable. Key words:Qingkailing Oral Solution; Baicalin; HPLC 清开灵口服液,1,，经临床验证具有清热解毒、镇静安神等功效，符合各种热证形成的病机，对各种发热之疾病均有明显疗效。本处方由胆酸、珍珠母、黄芩苷、栀子、金银花等8味药材组成，已用于临床多年，其疗效确切,2,。 黄芩为方中主药，用于清泻三焦火热，其主要有效成分为黄芩苷，故选择黄芩苷作为含量测定指标控制清热解毒口服液的质量。本文拟采用HPLC法测定清热解毒口服液中芩苷的含量。 1 器材 Waters 2487系列高效液相色谱仪(美国);Waters 515高效液相色谱工作站(美国);Satorius电子天平(瑞士);DL超声波清洗器(宁波市石浦海天电子仪器厂);JP型架盘天平 (太仓市东亚天平仪器有限公司)。 清开灵口服液(自制);黄芩苷110715-200514(中国药品生物制品检定所);甲醇为液相色谱用试剂，水为去离子二次重蒸馏水，其它试剂均为纯。 2 方法与结果 2.1 色谱条件色谱柱:IOSOHOC18(150 mm×4.6 mm，5 μm)(日本);流动相?甲醇四氢呋喃 0.055%磷酸(40?10?60);检测波长:278 nm;柱温:35?;流速:0.80 ml/min。理论板数>4500。 2.2 供试品溶液的制备精密量取本品1 ml，置离心管中滴加6mol/L的盐酸溶液1滴，摇匀，离心(每分钟4000转)置澄清，弃去上清液，沉淀加70%乙醇适量，置水浴中振摇使溶解，转移置50ml容量瓶中，放冷，用70%乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置5ml量瓶中，用70%乙醇稀释至刻度，摇匀作为供试品溶液。 2.3 对照品溶液的制备精密称取在100?减压干燥至恒重的黄芩苷对照品，加70%乙醇制成每1ml含30μg的溶液，作为对照品溶液。 2.4 线性关系的考察分别精密吸取浓度为10 μg/ml的黄芩苷对照品溶液4.0，8.0，12.0，16.0，20.0 μl，注入高效液相色谱仪，测定其峰面积。 1 黄芩苷对照品标准曲线数据 4 8 12 16 20 样品量μl 163256 317398 489401 615203 638312 峰面积 以黄芩苷的含量为横坐标，黄芩苷的峰面积为纵坐标绘制标准曲线，所得数据经回归得方程为:y,38929x，5682.2，r,0.998。 测定结果表明，进样量在0~30 μg范围内，进样量与峰面积线性关系良好。 2.5 重现性实验按拟定的含量测定方法，取对照品溶液10μl，按规定条件连续进样6次，测得黄芩苷峰面积如下: 1 2 3 4 5 6 测定次数 402530 392010 397610 402468 414803 405768 峰面积 结果表明，五份供试品测定值的相对标准偏差为1.13%，本法具有较好的重线性。 2.6 回收率实验 分别精密吸取供试品溶液与回收液各10μl，注入液相色谱仪测定，计算回收率。 1 2 3 4 5 6 检测次数 30.2 30.2 21.2 21.2 10.4 10.4 加入量μl 28.79 31.0 19.71 20.1 10.5 10.44 实际测定μl 93.3 100.52 93.0 94.8 99.0 100.4 回收率% 试验表明:平均回收率为96.84%，RSD为0.87%，本法具有较好的回收率。 2.7 含量测定 取供试品溶液照上法进行含量测定，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算出供试品中黄芩苷的含量，即得。 根据测定结果，暂定清开灵口服液中每支(10 ml)所含黄芩苷不得少于35 mg。 3 结论 本研究以黄芩苷作为定量指标，采用高效液相色谱法对清开灵口服液中黄芩苷的含量进行了测定。结果表明，其HPLC定量分析方法简便、易行，且灵敏度高，重现性好，可用于其制剂中黄芩苷的定量分析。 【参考文献】 ,1, 国家药典委员会. 中国药典，?部,S,.北京:化学工业出版社，2005:609。 ,2, 朱山寅，张关顺，赵亚疑，等. 清热解毒口服液中黄芩苷高效相色谱定量法的改进,J,.江西中医学院学报，2004，16(4):46。