反相高效液相色谱法测定季德胜蛇药片中重楼皂苷i的含量

反相高效液相色谱法测定季德胜蛇药片中重楼皂苷i的含量 反相高效液相色谱法测定季德胜蛇药片中重楼皂苷I的含量 反相高效液相色谱法测定季德胜蛇药片中重楼皂苷I的含量 【摘要】 目的建立反相高效液相色谱法测定季德胜蛇药片中重 楼皂苷I的含量。采用Agilent Zorbax SB C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm);流动相为乙腈,水(45?55);流速1.0 ml/min， 柱温30?，检测波长为210 nm。结果重楼皂苷I在0.009 645,0.964 5 mg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系，r=1.000 0;平均加样 回收率为99.21,，RSD为0.75,(n,9)。结论该法简便、准确， 重复性较好，可用于测定季德胜蛇药片中重楼皂苷I的含量。 【关 键词】 重楼皂苷?;季德胜蛇药片; 高效液相色谱 Abstract:ObjectiveTo develop an HPLC method for determination of Chonglou Saponin I in Jidesheng Sheyao tablets. Methods The HPLC method was used with Agilent Zorbax SB C18 column(4.6 mm×250 mm，5 mm), the mobile phase was acetonitrile-water (45?55) and the flow rate was 1.0 ml/min. The detection wavelength was 210 nm. ResultsThe method had good linear relationship within the range of 0.009 645,0.964 5 mg/ml. The average recovery was 99.21%(RSD=0.75%，n=9).ConclusionThe method is simple，accurate and reliable. It is appropriate for the determination of Chonglou Saponin I in Jidesheng Sheyao tablets. Key words:Chonglou Saponin I; Jidesheng Sheyao tablets; HPLC 季德胜蛇药片由七叶一枝花、蟾酥皮、蜈蚣、地锦草等药味制成， 具有清热、解毒、消肿止痛的功效，用于治疗毒蛇、毒虫咬伤。该品 种为中药保护品种，目前收载于《中华人民共和国卫生部药品标 准?中药成方制剂》第15册,1,，其中尚无含量测定方法。因其处 方中的七叶一枝花的活性成分具有抗肿瘤、消肿止痛、抑菌、镇静、 镇痛、止血等作用,2,，本实验采用反相高效液相色谱法，选择七叶 一枝花中的重楼皂苷I作为指标性成分，对该片剂的质量进行控制。 1 仪器与试药 Agilent1100高效液相色谱仪(包括在线脱气机，二 元梯度泵，自动进样器，柱温箱，DAD检测器);重楼皂苷I对照品为中国药品生物制品检定所提供(批号110731-200511，供含量测定用)。季德胜蛇药片由江苏精华制药有限公司提供(规格0.4 g，批号060607，060608，060618，060733)。乙腈为色谱纯，水为去离子蒸馏水，其余试剂均为分析纯。 2 方法与结果,3, 2.1 色谱条件 色谱柱:Agilent Zorbax SB C18柱(4.6 mm×250 mm，5μm);流动相:乙腈-水(45?55);流速1.0 ml/min;检测波长210 nm;柱温30?;进样量20 ml。 2.2 对照品溶液的制备 精密称取经40?减压干燥2 h的重楼皂苷I对照品适量，加甲醇溶解并稀释制成每毫升中含0.1 mg的溶液，即得。 2.3 供试品溶液的制备 取本品20片，研细，精密称取2.0 g，置100 ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 ml，密塞，称定重量，超声处理40 min(功率250 W，频率40 kHz)，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。 2.4 阴性对照溶液的制备 按处方比例制备不含重楼的阴性样品，照供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。