HPLC法测定牛黄消炎片中大黄素与大黄酚的含量

HPLC法测定牛黄消炎片中大黄素与大黄酚的含量 , ,年第 , 卷 第 ,期 中 国药 事 , , , , ,, , 消 片,, , 法 测 定 牛 黄 炎 中大 黄素 与大 黄 酚 的含 量 董 丽萍，刘传玲 ，姚 尚辰 ，于 勇 ，宋 吉连 ( 省威海市药品检 山东 验所， , , ,, 威海 , , ; 中国药 品生物制 品检 定所 ) 摘要 : , , 色谱 , 建立牛 黄 消 炎 片 中大黄 素 、大黄 酚 的含 量 测 定 方 法 。采 用 高效 液 相 色谱 法 ，,, ,,, , ,, , ,) ( ,, , , , ,,柱 ，流 动相 为 甲醇一( 磷 酸 (,: , ，流速 为 , , ? , ，检 测 波 长 :, , ,。 大黄素 对 照 品 的线 (, ( , ，, ( ,, , ,, ,，, ,, , , ;大 黄 酚 对 照 品 的 线 性 范 围性 范 围 , , , ,, , 一 , ,, ，平 均 回 收 率 为 ,(, , , (, (, , ( ,, ，, ( , , , ’ (, ,, ,, ,, ,, , ,, ,, ，平 均 回收 率为 , ,, ，,, (, ,,, , 。本 法快速 ，灵敏 ，准 确 。 ，关键词 : ,, ,;牛黄 消 炎片 ;大黄素 ;大黄酚 ,( 中 图分 类 号 :,, , , 码 :, , ,, , , , ), —, ,, 文章 编 号 :, , —文献 标识 , , (, , ,, , —, ,, , ,, , ,, , , , ,,, ,, ,, , , , , , ,, , , , ,, , ,, , ,, ,,,, , , , ,, , , , , , , ,, , ,, , , ,,, , ,,,, , ,, ， , , , , , ,, ,,, , ， , , ,, , , , , , ,, , , , , ,,, , ,, ,, , , , , ,, , , ,， ,, , , ; , ,, ,, , , , , , , , ( ,, ,， ,, , , ,, , , , , , , , , , , ,; ，, ,, , , , ,;,, ,, ，, , , , , ,, , , ,, , , ,, ,, ,， ,,, ,, ,, ,,, ,, ,, ,, , , , , , , , , ,, , , , , , , , , ; , , , , , , ; , ,,, ; ,,, , , , ,, ,, , , ,) , ,,, ,,,, , , , , , , , , , , , , , , , ,, , , , , ; , , , , , , ,, , , , , , ,,，, ,, , , ,, , , , , , , , , , , , , , , , ,, , , , , , , , ,, , , , , , , ,, ,,( , ,, , , , , ,, , ,,, ,, , , ,一 , , , , , , ,( , ,, , , ,,,, , , ,, ,, ,, , , ,; , ,,, , ,, , , ( , ,, ( , :, ) ,, ,, , ,,, ( ?, , ， , , , , , , , , , ,, , , , , ,, , , ( ,, , , , , ; , , , , , , , , ; ,, , ,， , , , , , , , , , ,, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,, , , , ,, ,, , ,, ( , , ( , , 一 ( ,,, , , , , , , , ,, , , , , ， 。 , , , , ， , , , , , , , ; , , , , ( , ， ,, , , , , , , , , ,, , , ( , , ,一 , , (, , , , , , ; , ,; , , , , , , , , , ,, , , , , , , , , , , ( , , , , (,, 一 ( ,, , , , , , , , , , , , , , , , , , ; , , , , , , , , , ,, , , , , , , ,， , , , , ， , ,, ,, ,, ,,,, , ( , , , , (,, ,, ,,; , , ,, , , ，, ,一, , ( , , ,, , , ,,,, ,, ,,, , , ,,, ,,; ,,( , , , , ;, , , ,, , ,，,, ,, , ;, ,, ,,, , ,,,, ,,, , , , , , , ,, , , ;, , ,;; , , , , , ,;,, , , , ,, , , , , , ,, , , ,, , , , 牛 黄消 炎 片 由牛 黄 、珍珠母 、大黄 、雄 黄等七 , ,, , 。 哈 尔滨华 羽 集 团 ，批 号 :,, ,, ) 甲 醇 为 色谱 味药组 成 ，具有 清热 解毒 、消肿止 痛之 功效 ，用 于 纯 ，水为超纯水 ，其余试剂均为分析纯。咽喉肿 痛 ，疔 、痈 、疮疖 等 。该处 方 中的大 黄 ，显 , 方 法与 结果 有 ,, ,微 特征 〔 时不 明显 。本 文 参 考 有 关 文 献〔,，采 ( , , 色 谱条件 用高效 液相 色 定牛 黄消 炎片 中大黄 素 和大 黄 , ,,, , , , , , , 谱 法测 ,,， 色 谱 柱 : , , , , , ( ( ,, × , , 酚 的含 量 ，分离 度好 ，回收率 高 ，在一定 程 度上 能 ,,) ( , ,) ,, ，流动 相 :甲醇 一, , 磷 酸 ( ,: , ，流速 有效控 制 牛黄 消炎 片的质 量 。 ( ,， ,, ,, , , ? , ，检 测 波 长 :,, ,，柱 温 : ，, 仪 器 与试药 ,, , 进样 量 :, , 。 ,, ,, , , ,室 温 ,, , , ,型 组 合 式 全 自动 高 效 液 相 色 谱 ( , , 对 照 品溶液 的制备 , , , , , , , ,,电子天平 。大黄 仪 ，,, , , , , , , , , ， 精 密 称 取 大 黄 素、大 黄 酚 对 照 品 ,,, 素、大黄酚对照品 ( 中国药品生物制品检定所 ，供 ( ,, , ,,，量 ,, ，分别 置 于 ,,,，,, 瓶 中 ，加 甲醇 , , , ,, , ,含量测 定 用 ，批 号分 别 为 , , —, , , ，,, — , 至刻 度 ，然 后精 密 量取 大 黄 素 、大 黄 酚 溶 液 各 , , ,, ，牛黄 消 炎 片 为 市 售 品 ( 都 制 药 集 团 ，,,, ) 药 置 , ,, ,，， 于 , ,,量瓶 中 ，加 甲醇 制 得 每 , 中含 ,,, ,,,;批 号 :, , , ;哈药 集 团世一 堂 ，批号 :, , , , 大黄素 ,, ， , , 大黄酚 ,( , 的对照品混合溶液 。 ， ,,, ， ,:(, , , , , 作者简介 :董 丽萍 ，大学本科 ，主管药师 ;, , , , ), , , , , ,, , ,年第 , 中国药事 ,, ,卷第 ,期 (,, 供试 品溶液 的制 备 (,, , ,,;大 黄 酚 为 线 性 范 围 :大 黄 素 为 ,, (, ,片 取本 品 , ，去包 衣 ，精 密 称 定 ，求得 平 均 ,, , ( , , ,( ,, , ,, , 。重 量 ，取 相 当于 ,片 的平 均 片重 ，精 密 称 定 ，置 ( , , 精 密度试 验 , , , ,，锥 形 瓶 中 ，加 甲醇 , ,,，称 定 重 量 ，加 热 , ,， 取 对 照 品溶 液 ，重 复 进 样 ,次 ，每 次 , , 回流 , ,,，放冷 ，再 称定 重量 ，用 甲醇 补足 失重 , , , (, 测 得大 黄素 峰 面积 的 , ,为 ,, ，大黄 酚峰 面 , , 圆底 烧 瓶 中 ，量 ，滤过 ，取 滤 液 , ,，，置 , ,， , (, 积 的 , ,为 , , 。挥 去 甲醇 ，加 , , , 。的硫 酸 溶 液 , ( ,, ?， ,, ，， ( , , 稳定 性试 验 ,,，再 加 氯 仿 , 超声 处理 , , , , ,，，加 热 流 , ， 批 , , , ，在 取 牛黄 炎片样 品溶 液 ( 号为 , , , )冷却 ，移至分 液漏 斗 中 (分取氯 仿层 。酸液用 氯仿 ，,, 一 ，, ,, , ( ，, , ,分 别 进 样 ,, ，记 录 峰 面 ,，，合 并 氯仿 液 ， 以无 水 硫 提取 ,次 ，每 次 约 , , ( , 一 ) 积 ，大黄 素蜂 面积 的 ,, 为 , , ( , ，大 酸钠脱 水 ，氯 仿 液 移 至 ,, , ,， 锥形 瓶 中 ，挥 去 氯 , (, , , ) 黄 酚峰 面积 的 , , 为 , , ( ,, ，可见 供 试 , 仿 ，残 渣加 甲醇溶解 。定 容至 , ,，量瓶 中 ，即得 ,, 、, 品溶液在 , , 定 。供试 品溶液 。 ( ,,, ， , , 重 忡 (, (, , 阴性对 照溶液 的制备 批 ,,, 取牛 茸消 ? 片 ( 号 为 , , , )平 行 样 品 , ( , 。依 , ,法 取 不 含大黄 的本 品 ,味 药约 , , , ( ( 份 ，按 ,, 试品溶 液制备法 制得 ,份供试 品溶 制得 阴性 对照溶 液 。 ，测得供试 品 中大黄 酚平 均 液 ，按 样 , (, , 空 白对测定法 测定 照 试验 ,, ,, , , , 含量 为 , , , ? ，,, (, ,,, , ;大 黄素 平 取 上述对 照品溶液 、供试 品溶 液及 阴性 对照 品 均 含量为 , (,, ?, ，,, , ,, (, 型艟 耋 一 表妻 ,,,, 。表 明本 , (项 , ，，得 到 高 ,溶 液 ，照 , , 色谱 条 样 ,, 法重 现性好 。效 液相 色谱 ，见 图 ,。图谱 表 明件 ，各 进 彳 此色 条件 下 大 (, , , 回收 率试验 ;黄素 、大黄酚 与其他 成分有较 好分 离 (,性对 照图 采用加 样 回收 法 ，分别 精密 称取 已知含量 的牛 板数按 大 谱与对 照 品色谱 相 同位 置无 干扰 。理 ( 批 ,, , 黄 消 炎 片 ( 号 为 , , , ， 大 黄 酚 含 量 为 ,, 黄酚峰计 算不低 于 ,, 。分离度 符合 曩 卜 , (, , , ，大黄素 含量为 ,, ,, ? , , ,,, ? , ,( , , , )供 , 一 一 呲 懈眺 ? 试 品 ，精 密称 定 ，置 ,,，锥形瓶 中 ，分别精 密加 ( ,，，精 密 加 入 甲醇 入 , ,中对 照 品 混 合 溶 液 , , ( ,, , ,，，按 , ,项 下 制 备 供 试 品 溶 液 ，各 取 ,, , , , , ,, , , 进 样 ，色谱 图 ，计 算 回收率 ，见表 , 。 、表 , 一 , ,, , , , , ( , 对 照 品 ;,(样 品 ;, (阴性 对 照 。 ，,色 图 , 牛 黄 消 炎片 ,, 谱 图 (,, 标准曲线的制备 ，, , , , ，进 精 密 吸取 对 照 品溶 液 , ，, ，, ，,, (项样 ，按 ,, 色谱条 件测定 峰面 积 。以峰面积 为纵 ,? ,， )坐标 ，对 照 品 大 黄 素 、大 黄 酚 浓 度 ( 为横 坐标 计算 ，分别得 到 回归方程 为 : ( ,, , , ,× , 一 (, , , ,, , 黄素 一 , , .