药物分析课件

药物分析课件 新疆医科大学续页 药物的杂质检查 第三章 药物的杂质检查 基本要求 掌握药物中杂质的来源和分类，杂质限量的定义和计算;氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、溶液颜色、易炭化物、澄清度、炽灼残渣、干燥失重、有机溶剂残留量等检查项目的原理和方法。 了解药物特殊杂质的概念及其检查方法。 重点:1(药物杂质来源，限量检查及计算 2(氯化物、重金属、砷盐的检查方法 难点:1.砷盐检查方法原理 2(各类热分析法的原理 第一节 概述 基本要求 掌握药物中杂质的来源和分类，杂质限量的定义和计算 了解药物的纯度和化学试剂的纯度的区别 检查 有效性、均一性、纯度要求、安全性 有效性 药物生物利用度 均一性 含量均匀度、溶出度、重量差异 纯度要求 药物中杂质的控制 安全性 异常毒性、热源、无菌 杂质(forin、impurities)是指药物中存在的无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效，甚至对人健康有害的物质。 1. 有毒副作用的物质 2. 本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质 3. 本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质 一、药物的纯度要求 药物的纯度，是指药物的纯净程度。药物的杂质检查是控制药物纯度的重要方面，也称为纯度检查。是反映药品质量的一项重要指标。 - 1 - 1 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 药物纯度的评定:通常可从药物的结构、外观性状、理化常数、杂质检查和含量测定等方面。 药物的纯度和化学试剂的纯度在要求上不同: 1.一般化学试剂不考虑杂质的生理作用，其杂质限量只是从可能引起的化学变化上的影响来。故一般情况下不能与临床用药的纯度互相代替。 药物只有合格品与不合格品;一般化学试剂分为4个等级(基准试剂、优级纯(GR)、分析纯(AR)、化学纯(CP)、色谱纯、光谱纯。) 随着分离检测技术的提高，通过对药物纯度的考察，能进一步发现药物中存在的某些杂质对疗效的影响或其具有的毒副作用。且随着生产原料的改变及生产方法与工艺的改进，对于药物中杂质检查项目或限量要求也就有相应的改变或提高。 总之，对于药物的纯度要求不是一成不变的，而是随着临床应用的实践和分析测试技术的发展，不断改进，使之更趋完善。 二、杂质的来源与种类 (一)杂质的来源，主要有两个:生产过程和贮藏过程 一是由生产过程中引入。(精制未能完全除去，原料不纯或存在反应不完全，中间产物与副产物)。 (1)原料、反应中间体及副产物 (2)试剂、溶剂、催化剂类 (3)生产中所用金属器皿、装置以及其他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质 二是在贮藏过程中产生。(贮藏过程外界条件影响，或因微生物的作用，发生水解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解和发霉等变化，产生有关的杂质)。 易发生水解反应的结构:酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等 易发生氧化反应的结构:醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键等 (二)杂质的分类 药物中的杂质按来源分为一般杂质和特殊杂质 - 2 - 2 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 1. 一般杂质:是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质，如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、碱、水分、易炭化物、炽灼残渣等。一般杂质其检查方法收载在中国药典的附录中。 2. 特殊杂质:指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入的杂质，如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、甾体激素中的其他甾体。特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质量中。 药物中的杂质按性质分为信号杂质和有害杂质 1，信号杂质:本身无害，但其含量多少可以反映出药物的纯度水平，如含量过多，表明药物的纯度差，提示药物的生产工艺不合理或生产控制存在问题。如:氯化物、硫酸盐。 2，有害杂质:对人体有害，在质量标准中应严格加以控制，以保证用药安全。如:重金属、砷盐、氟化物等。 三、杂质的限量检查 (一)杂质检查的要求:由于杂质不可能完全除尽，也没有必要除尽。所以在不影响疗效和不发生毒性的原则下，既保证药物质量，又便于制造、贮藏和制剂生产，对于药物中可能存在的杂质，允许有一定限量，这一允许量被称为杂质的限量。通常不要求测定其准确含量。《药典》中规定的杂质检查均为限量(或限度)检查(Limit test)。 (二)杂质限量:指药物中所含杂质的最大容许量。 表示方法:通常用百分之几或百万分之几(ppm)来表示。对危害人体健康、影响药物稳定性的杂质，必须严格控制其限量。检查时可用杂质的纯品或对照品在相同条件下来比较。 (三)限量计算: 杂质限量=杂质的最大允许量/供试品量 ×100% 杂质限量=标准溶液体积×标准溶液浓度/供试品量 ×100% 或 L=V×C/S ×100% 也有不用标准液对比，只在一定条件下观察有无正反应出现。 对于一些保持药物稳定性的保存剂或稳定剂，不认为是杂质，但需检查是否在允许范围内。 在药典检查项下除杂质检查外，还包括有效性、安全性两个方面。 - 3 - 3 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 有效性试验是指针对某些药物的药效需进行的特定的项目检查，如药物的制酸力、吸着力、疏松度、凝冻度、粒度、结晶度等。 安全试验是指某些药物需进行异常毒性、热原、降压物质和无菌等项目的检查。 例题1(检查某药物中的砷盐，取标准砷溶液2ml(每1ml相当于1μg的As)制备标准砷斑，砷盐限量为0.0001,，应取供试品的量为 A. 0.20g ?B. 2.0g C(0.020g D. 1.0g E. 0.10g 6 -已知:c,1 μg/ml,1×10g/ml V,2ml L,0.0001% Vc,S,，100%L ,62，1，10,，100%0.0001% ,2.0g 例题2(检查维生素C中的重金属时，若取样量为1.0g，要求含重金属不得过百万分之十，问应吸取标准铅溶液(每1ml,0.01mg的Pb)多少ml, A. 0.2ml B. 0.4ml C(2ml ?D. 1ml E. 20ml LS,V,c ,610，10，1.0,,610，10 ,1 ml (四)杂质检查方法 1. 对照法 限量检查法 (Limit Test) 特点:不需知道杂质的准确含量 2. 灵敏度法 系指在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，不得有正反应出现。 特点:不需对照品 3. 比较法 含量测定法:测定杂质的绝对含量，如测定吸收度、pH值等。 特点:准确测定杂质的量，不需对照品 - 4 - 4 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 练习题 1. 临床所用药物的纯度与化学品及试剂纯度的主要区别是(A) ?A. 所含杂质的生理效应不同 B. 所含有效成分的量不同 C. 所含杂质的绝对量不同 D. 化学性质及化学反应速度不同 E. 所含有效成分的生理效应不同 2(在药物生产过程中引入杂质的途径为(A,B,C,D) A. 原料不纯或部分未反应完全的原料造成 B. 合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成 C. 需加入的各种试剂产生吸附，共沉淀生成混晶等造成 D. 所用金属器皿及装置等引入杂质 E. 由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分解引入的杂质 3(中国药典(1995年版)中规定的一般杂质检查中不包括的项目是(C) A. 硫酸盐检查 B. 氯化物检查 C. 溶出度检查 D. 重金属检查 E. 砷盐检查 小结 1，药物纯度:药物的纯净程度。 2，杂质的来源与种类 来源:生产和贮存 种类:一般杂质和特殊杂质 3，杂质的限量检查 杂质的限量:药物中允许含杂质的最大量 C，V计算: L,，100%S 识记:杂质、一般杂质、特殊杂质、杂质来源、药用纯度与化学纯度的区别 思考题 - 5 - 5 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 1，什么是一般杂质和特殊杂质 2，请解释信号杂质和有害杂质 3，请阐明杂质的限量和药物纯度的含义 4，试说明信号杂质的存在对药物有何影响 - 6 - 6 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 第二节 一般杂质的检查方法 基本要求 掌握一般杂质检查项目的原理和方法 重点:氯化物、重金属、砷盐、铁盐和干燥失重 一、一般杂质检查规则 《药品检验操作标准》规定: 1. 遵循平行操作原则 (1)仪器的配对性 如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过2mm，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致 (2)对照品与供试品的同步操作 2. 正确的取样及供试品的称量范围 ?1g不超过?2%，,1g不超过?1% 3. 正确的比色、比浊方法 4. 检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份 二、氯化物检查法 药物生产过程中，需用盐酸，或原料中间体呈盐酸盐等，易引入氯化物 (一)原理 对照法 HNO,3药物:Cl，AgNO,,,,AgCl白色浑浊3 HNO3对照:NaCl(c,V)，AgNO,,,,AgCl白色浑浊3 (二)检查方法 药典附录 除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25ml(溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性)，再加稀硝酸10m1;溶液如不澄清，应滤过;置50ml纳氏比色管中，加水使成约40m1，摇匀，即得供试溶液。另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10m1，加水使成40m1，摇匀，即得对照浴液。 于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0m1，用水稀释使成50m1，摇匀，在暗处放置5分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比较，即得。 (三)测定条件 - 7 - 7 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 --1. 标准NaCl溶液 10μgCl/ml，50ml溶液中含50,80μg的Cl所显浑浊梯度明显，相当于标准NaCl溶液5,8ml。 2. 反应需在硝酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀硝酸10ml为宜。 (1)加速AgCl浑浊的形成 (2)产生较好的乳浊; (3)避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成。 3. 试剂:硝酸银 4. 供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀 5. 避光、暗处放置5分钟后比浊，因氯化银见光易分解。 6. 比浊方法:同置于黑色背景上，自上向下观察。 7. 平行操作原则 (四)干扰及排除 1. 若供试品有色，需经处理后方可检查。 (1)内消色法:倍量法，如枸橼酸铁铵中氯化物的检查。 P31 (2)外消色法:如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。 2. 当有其它干扰物质存在时，必需在检查前除去 (1)碘中氯化物的检查，可加入一定量的酸和过氧化氢溶液，加热煮沸，使I挥去。 2 (2)碘化物中氯化物的检查 (3)溴化物中氯化物的检查 3. 不溶于水的有机药物 (1)加水振摇，过滤，取滤液进行检查。 (2)加热，放冷，过滤，取滤液进行检查。 (3)溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后进行检查。 4. 有机药物中有机氯杂质的检查，具体情况，具体分析。 三、硫酸盐检查法 - 8 - 8 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 (一)原理 对照法 HCl2,药物:SO，BaCl,,,,BaSO白色浑浊424 HCl对照:KSO(c、V)，BaCl,,,,BaSO白色浑浊2424 (二)测定条件 1. 标准KSO溶液0.1mg/ml，50ml溶液中含0.1,0.5mg的所显浑浊梯度明24 显，相当于标准KSO溶液1,5ml。 24 2. 反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀盐酸2ml为宜。 (盐酸酸性条件防止BaCO，BaPO沉淀生成，pH约=1) 34 3. 试剂:氯化钡 4. 供试液和对照液稀释后，再加氯化钡溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀。 5. 比浊方法:同置于黑色背景上，自上向下观察。 (三)干扰及排除 若供试品有色，也可用内消色法即倍量法处理。 四、铁盐检查法(硫氰酸盐法，巯基醋酸法 BP) (一)硫氰酸盐法 ChP(2000)、USP(24) 1. 原理 对照法 ,,o2，3，3,HClFe,,,Fe,,，，,,药物:，6SCN,,,FeSCN红色3，6Fe 3,HCl3，,，，，，对照:Fec、V，6SCN,,,,,FeSCN红色6 2. 检查方法 药典附录 除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25ml，移置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成 35m1后，加30%硫氰酸铵溶液3ml，再加水适量稀释成50ml，摇匀;如显色，立即与标准铁溶液一定量制成的对照溶液(取各药品项下规定量的标准铁溶液，置50ml纳氏比色管中，加水使成25ml，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成35m1后，加30%硫氰酸铵溶液3ml，再加水适量稀释成50ml，摇匀)比较，即得。 3. 测定条件 - 9 - 9 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 (1)用FeNH(SO)?12HO(硫酸铁铵)配制标准铁贮备液(加入硫酸防止4422 3+3+Fe的水解)，标准铁溶液临用前稀释而成，标准铁溶液10μg Fe/ml，50ml 3+溶液中含10,50μg的Fe显色梯度明显，一般取标准铁溶液1.0,5.0ml。 (2)反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀盐酸4ml 为宜。 (3)试剂:硫氰酸铵。加过量硫氰酸铵，使反应向正反应方向进行 2+3+ (4)检查Fe和Fe 2+3+2+3+(5)铁盐检查时，加氧化剂氧化Fe为Fe。加过硫酸铵可氧化Fe为Fe， 同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。 2+3+ 加硝酸后加热也可氧化Fe为Fe (6)比色方法:同置于白色背景上，自上向下观察。 4. 干扰及排除 (1)为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一致时，可用正丁醇提取后， 分取正丁醇层比色。 (2)具环状结构的有机药物，需经700,800?炽灼破坏处理后再依法检查。 (3)干扰离子的影响 适当增加酸度，用正丁醇提取后。 (二)巯基醋酸法 BP(1998)P33 对照法 3，20%枸橼酸2巯基醋酸mlFe2，药物:,,,,,,,,,,,,Fe2，Fe NH,HO巯基醋酸32,,,,,,,,,,红色 20%枸橼酸2巯基醋酸3，2，ml对照:,,,,,,,,,,,,FeFe NH,HO巯基醋酸32,,,,,,,,,,红色 枸橼酸的作用:使枸橼酸与铁离子形成配位离子，以免在氨碱性溶液中产生 氢氧化铁沉淀。 巯基醋酸:还原剂 本法灵敏度较高，但试剂较贵 五、重金属检查法 - 10 - 10 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 2-在实验条件下能与S作用呈色的金属杂质，如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等 以铅为代表(易积蓄中毒) 中国药典(2000年版)共收载四法。 第一法 溶于水、稀酸和乙醇的药物。 第二法 含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸和乙醇的药物。 第三法 溶于碱，不溶于稀酸。 第四法 重金属限量低的药物。 硫代乙酰胺法 (一)第一法 1. 原理 对照法 条件:醋酸盐缓冲液pH3.5 pH3.5CHCSNH，HO,,,,CHCONH，HS322322 pH3.52，药物:Pb，HS,,,,PbS黄色,棕黑色2 pH3.5，，对照:PbNOc、V，HS,,,,PbS黄色,棕黑色32 适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物。 2. 测定条件 2+(1)用硝酸铅配制标准铅贮备液(加硝酸防止Pb水解)，标准铅溶液临 2+用前稀释而成，标准硝酸铅溶液10μg Pb/ml，适宜比色范围为27ml溶液中含 2+10,20μg的Pb。 (2)本法用2ml pH3.5的醋酸盐缓冲液控制溶液pH值为3,3.5。 (3)显色剂:从ChP(1990)开始改用硫代乙酰胺做显色剂 3. 干扰及排除 (1)供试品如有色，需经处理后方可检查。 A. 外消色法:在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液。 B. 内消色法 C. 改用第四法，微孔滤膜过滤法 3+(2)若供试品中有微量Fe存在，会氧化硫化氢生成单质硫，干扰比色， 3+2+加入抗坏血酸或盐酸羟胺(0.5,1.0g)还原Fe为Fe，可消除干扰。 - 11 - 11 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 3+2-(3)若供试品为铁盐，Fe在盐酸中生成HFeCl ，用乙醚提取除去，6 剩余微量铁在氨碱性溶液中，加KCN掩蔽，然后用第三法检查 。 (4)若药物本身能生成不溶性硫化物时，可加入掩蔽剂消除干扰。如ZnSO4 2+中重金属的检查，要在碱性下加KCN掩蔽Zn后，依第三法检查。 (二)第二法 炽灼残渣法 适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸、乙醇及碱的有机药物。 1. 原理 对照法 500,600?炽灼后的残渣，经处理后，依一法检查。 2. 操作方法 HNO、500,600?炽灼残渣,3样品:置坩埚中,,,,,,,,残渣,,,,,S NHHO调节至pH7.0左右HOHCl、,,322,,,,,氯化物,,,,,,,,,,,,,, pH3.5缓冲液2.0ml,,,,,,,,依一法检查 、、、HNO,HSO,HCl,324对照:空坩埚,,,,,,,,,,,,,,, 、标准()溶液NH,HO,PbNOHO32322,,,,,,,,,,,,,,,,,, 缓冲液pH3.52.0ml,,,,,,,,依一法检查 含钠及氟的有机药物应用铂坩埚、石英坩埚或硬质玻璃蒸发皿(因可腐蚀 瓷坩埚，带入大量重金属) (三)第三法 硫化钠法 适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥 类。 1. 原理 对照法 NaOH2，药物:Pb，NaS,,,,PbS黄色,棕黑色2 NaOH，，对照:PbNOc、V，NaS,,,,PbS黄色,棕黑色32 2. 测定条件 (1)NaOH碱性条件下 (2)显色剂:硫化钠 对玻璃有腐蚀性，应临用新制。 - 12 - 12 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 (四)第四法 微孔滤膜法 (适用于重金属限量低的药物) 适用于含2,5mg重金属杂质及有色供试液的检查。 依一法检查，结果微孔滤膜过滤后比较色斑。 将重金属的硫化物富集于滤膜上。 USP(23)检查重金属时，使用硫化氢试液显色。检查时，除用供试管、对照管，还规定用监控管，三管同法检查。 我国《药品检验操作标准》中规定，检查新产品中重金属时，应用该法。 六、砷盐检查法 (一)古蔡法(Gutzeit) P37 ChP(2000)、BP(1998) 1. 原理 对照法 3,Zn，HCl,H，AsO,AsH,233 遇HgBr2试纸生成黄色,棕色的砷斑，与2ml标准砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较。 2. 操作方法 (1)标准砷斑用2ml标准砷溶液制备 (2)供试品需经有机破坏，则标准砷溶液应平行操作 - 13 - 13 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 3. 测定条件 (1)标准砷溶液临用新配，1μgAs/ml。 (2)酸为反应物，酸量应足够，所以加浓盐酸5ml。 (3)酸性氯化亚锡及碘化钾的作用是 5+3+A. 还原As为As，加快反应速度; --2+B. 碘化钾被氧化生成的I又可被氯化亚锡还原为I，I与反应中生成的Zn2 能形成稳定的配位离子，有利于生成砷化氢的反应不断进行; C. 氯化亚锡与锌作用，在锌表面形成锌锡齐，使氢气均匀而连续地发生; D. 可抑制微量Sb的干扰，在实验条件下，100 μgSb存在不干扰。 (4)醋酸铅棉花的作用是消除锌粒及供试品中少量硫化物的干扰，醋酸铅 棉花60mg装管高度60,80mm。 (5)锌粒应无砷 (6)砷斑不稳定，应立即观察 4. 干扰及排除 (1)供试品若为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐时，加HNO，?，使氧化3 成硫酸盐，以除去干扰，如硫代硫酸钠中砷盐的检查。 3+2+(2)供试品若为铁盐，需先加酸性氯化亚锡试液，将Fe还原为Fe。如枸 橼酸铁铵中砷盐的检查。 (3)具环状结构的有机药物，要先行有机破坏后再进行检查。 常用的有机破坏方法: 碱破坏法:石灰法、无水碳酸钠碱融法 酸破坏法:如葡萄糖中砷盐的检查 (4)本法适用于不含Sb或含Sb量小于100μg的供试品。 SbH(HgBr)HgBrSbH+HBr2+33 Sb可被还原成锑化氢，锑化氢与HgBr试纸作用，产生锑斑，干扰砷斑。 2 小结 1，一般杂质检查规则 2，氯化物检查法 3，硫酸盐检查法 - 14 - 14 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 4，铁盐检查法 5，重金属检查法 6，砷盐检查法 1,古蔡法 , 思考题 1，简述氯化物检查法的原理及方法。 2，简述硫代乙酰胺法检查重金属的原理和方法。 3，试述药物杂质检查的内容。 4，药物重金属检查法中，重金属以什么为代表,有哪几种显色剂?检查的方 法共有哪几种, - 15 - 15 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 (二)Ag-DDC法 检查、含量测定 ChP(2000)、USP(24) 二乙基二硫代氨基甲酸银法 CHS25 NCAg SHC25 对照法 3,Zn，HCl,H，AsO,AsH,233 AsH+6Ag(DDC)?As(DDC)+6Ag(红色)+3HDDC 33 砷化氢与Ag-DDC溶液作用，还原Ag—DDC为红色胶态银，直接比色或于 510nm波长处测定吸收度，进行比较。 用有机碱吸收反应产生的HDDC有利于反应的进行。 USP(24)用吡啶，灵敏但试剂恶臭 ChP(2000)用三乙胺。灵敏度低 本法适用于含Sb量小于500μg的供试品。 (三)白田道夫法(betterdroff) ChP(2000) 含Sb药物中砷盐的检查 如葡萄糖酸锑钠 原理 对照法 - 16 - 16 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 HCl3，5，As、AsSnCl，,,,,2 As(棕褐色的胶态砷) 本法反应灵敏度为20ug(ASO)加入少量二氯化汞，能提高反应灵敏度23 2ug/10ml (四)次磷酸法 BP(2000)p39 原理 对照法 次磷酸(HCl)还原砷盐为棕色的游离砷。 灵敏度低，适用于硫化物、亚硫酸盐及含锑药物的砷盐检查，不产生干扰。 七、炽灼残渣检查法(residue on ignition) 检查不含金属的有机药物或挥发性无机药物中混入的非挥发性无机杂质(金 属氧化物或无机盐类)。 1. 原理 样品炭化后+ HSO湿润?700,800?炽灼至恒重?炽灼残渣(硫酸灰分) 24 限量一般为0.1%,0.2% 无机杂质的硫酸盐(sulphated ash) HSO湿润(低温加热至硫酸蒸汽除尽) 24 炽灼残渣(USP), 硫酸灰分(BP) 2. 操作方法 直火缓缓加热样品，炽灼至恒重的坩埚,,,,,, 至全部黑色、无烟雾，放冷 mlHSO0.5,1湿润，直火加热24,,,,,,,,,,, 700,800?高温灼烧至HSO蒸气除尽,,,,,,,,残渣(恒重)24 残渣及坩埚重,空坩埚重炽灼残渣%,，100%供试品重 注意事项 (1)供试品的取样量应根据炽灼残渣限量和称量误差决定。 (2)含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚。 (3)若残渣需留作重金属检查，则500,600?炽灼至恒重。 (重金属(铅)在高温下易挥发) 检查结果偏低 - 17 - 17 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 (4)加硫酸处理是使杂质转化为稳定的硫酸盐，并帮助有机物炭化。 八、溶液颜色检查法 控制药物中有色杂质限量的方法。 生产、贮藏中产生 ChP(2000)采用三种方法检查。 第一法 目视比色法 即与标准比色液比较的方法，全波长范围定性观察 观察方法 平视 颜色较深时,,从上向下 颜色较浅时, 标准比色液的配制 不同比例KCrO、CoCl、CuSO溶液,,,,,22724 不同量水稀释5种色调标准贮备液,,,,,, 5种色调50个色号标准比色液 黄绿、黄、橙黄、橙红、棕红 第二法 分光光度法 单一波长定量，吸收度不得超过规定值。 第三法 色差计法 全波长范围定量 本法是通过色差计直接测定溶液的透视三刺激值，对其颜色进行定量表述和分析的方法。 测色仪器一般为光电积分型色差计 科学客观 三刺激值即是在给定的三色系统中与待测色达到色匹配所需的三个原刺激量。 自然界的每种颜色都可以用红、绿、蓝三原色按适当比例混合而成。 当目视法难判断色差时，应考虑本法。 九、易炭化物检查法 检查药物中遇HSO易炭化或易被氧化呈色的微量有机杂质。 24 方法:HSO炭化后与对照液比较。 24 对照液:有三类 (1)“溶液颜色检查”项下的标准比色液; (2)由比色用氯化钴液，比色用重铬酸钾液，比色用硫酸铜液按规定方法配成的对照液; - 18 - 18 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 (3)高锰酸钾液 比色:同置白色背景前，平视观察比较。 不得更深 十、澄清度检查法 检查药物中的微量不溶性杂质，用作注射剂的原料药一般应作此项检查。 1(检查方法 对照法 供试品,供试品溶液, 比较规定级号的浊度标准液 2. 浊度标准液的配制 中国药典规定用浊度标准液作为澄清度检查的标准。 反应原理:乌洛托品在偏酸性条件下水解产生甲醛，甲醛与肼缩合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色浑浊。 1.00,硫酸肼溶液与10,乌洛托品溶液等量混合配制浊度标准贮备液(15?1000) 浊度标准原液 550nm处吸收度0.12-0.15 浊度标准液(5个级号)0.5,1,2,3,4 3. 判断 药典中规定的“澄清”，系指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂，或未超过0.5号浊度标准液。 4. 溶剂:水、酸、碱、有机溶剂(乙醇、甲醇、丙酮) 有机酸的碱金属盐类药物强调用“新沸过的冷水” 十一、干燥失重测定法 干燥失重是指药物在规定条件下经干燥后所减失的重量，主要是水分，也包括其它挥发性物质。测定方法: (一)常压恒温干燥法 适用于受热较稳定的药物。干燥温度一般为105?。 干燥失重:第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1h后进行。 炽灼残渣:第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续炽灼0.5h后进行。 注意: 1，供试品应平铺，厚度,5mm，疏松物10mm 2，结晶药物应该研细 3，瓶盖半开，或者放置旁边 - 19 - 19 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 4，取时，先盖瓶盖 (二)干燥剂干燥法 适用于受热易分解或挥发的供试品。 干燥剂:硅胶、浓硫酸、PO 。 25 1，硅胶:吸水率居中，变色硅胶，加有氯化钴(CoCl)，无水氯化钴蓝色，2 吸水后含二分子结晶水呈淡红色。105?干燥后可恢复使用。价廉、方便、 无腐蚀性、可重复，最常用的干燥剂。 2，浓硫酸:吸水率低，有腐蚀性。 3，PO :吸水性好，不能反复使用。 25 (三)减压干燥法 适用于熔点低，受热不稳定或水分难赶除的药物。 除另有规定外，压力应在2.67kPa(20mmHg)以下。 (四)热分析法 热分析法是在程序控制温度下，精确待测物质理化性质与温度的关系，研究其受热过程所发生的晶型转变、熔融、升华、吸附等物理变化和脱水、热分解、氧化还原等化学变化，对物质进行物理常数(如熔点和沸点)的确定、鉴别和纯度检查的方法。亦可用于药物的稳定性研究及制剂辅料的优选。 热重法(TGA) 热重法是在程序控制温度下，测量物质质量与温度关系的一种技术。 记录质量变化对温度的关系曲线即热重曲线。热重曲线的纵坐标为质量(m)， 横坐标为温度(T)或时间(t)。 特点:准确测量物质的质量变化及变化速度、样品用量少、速度快 本法适用于药物结晶水的测定和贵重药物或在空气中极易氧化药物的干燥失重分析。 2. 差热分析法(DTA) - 20 - 20 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 差热分析法是在程序控制温度下，测量待测物质和参比物之间的温度差(?T)与温度(或时间)之间的关系的一种技术。 差热分析曲线记录的纵坐标为样品与参比物的温度差(DT)，DT与热容量差(CR—Cs)成正比，横坐标为温度。 本法可鉴别药物或其多晶形，可检查药物的纯度 3. 差示扫描量热法(DSC) 差示扫描量热法是在程序控制温度下，测量输给待测物质和参比物的能量差与温度(或时间)关系的一种技术。 本法可鉴别药物或其多晶形、纯度检查以及熔点和水分等的测定。 十二、有机溶剂残留量测定法 (95版药典正式收载) 1. 有机溶剂残留量测定法 是用以检查药物在生产过程中引入的有害有机溶剂，包括苯、氯仿、二氧六环、二氯甲烷、吡啶、甲苯及环氧乙烷。 2. 检查方法 中国药典采用气相色谱法检查残留有机溶剂 色谱条件: 固定相:直径为0.25,0.18mm的二乙烯苯,乙基乙烯苯型高分子多孔小球 载气:氮气 - 21 - 21 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 检测器:氢火焰离子化检测器检测 柱温:80,170? 色谱系统适用性试验:中国药典规定，在残留溶剂测定前应作色谱系统适用性试验。 (1)用待测物的色谱峰计算的理论塔板数应大于1000; (2)用内标法测定时，内标物与待测物色谱峰的分离度应大于1.5; (3)用内标法测定时，每个标准溶液(限量待测溶剂与内标液)进样5次，待测物与内标物峰面积之比的相对标准偏差应不大于5,;若用外标法测定，待测物峰面积的相对标准偏差应不大于10, 3. 测定法 残留溶剂的测定有直接进样法(第一法)和顶空进样法(第二法)两种。 第一法 溶液直接进样法 第二法 顶空进样法 适用于挥发性大的组分，可以避免污染柱子(非挥发性组分) 从方法的精密度考虑，二氧六环、吡啶宜用第一法;苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷可用第一法或第二法，环氧乙烷直接用第二法。 色谱条件与系统适用性实验包括下列四项内容。 2,,tR,,n,5.54? 色谱柱的理论塔板数 ,,W1/2,, 2(tt),R2R1R? 分离度,,，要求R,1.5% W，W12 ?重复性,进样5次，要求RSD,2% Wh0.05,T?拖尾因子，其中d为峰极大至峰前沿之间的距离，T应在 0.95,1.05 12d1 - 22 - 22 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 练习题 1. 药物中氯化物杂质检查，是使该杂质在酸性溶液中与硝酸银作用生成氯化物浑浊，所用的稀酸是(B) A. 硫酸 B. 硝酸 C. 盐酸 D. 醋酸 E. 磷酸 2. 中国药典 (2000年版) 规定，检查氯化物杂质时，一般取用标准氯化钠溶 ,液(10µgCl/ml)5,8ml的原因是(D) A. 使检查反应完全 B. 药物中含氯化物的量均在此范围 C. 加速反应 D. 所产生的浊度梯度明显 E. 避免干扰 3. 采用硝酸银试液检查氯化物时，加入硝酸使溶液酸化的目的是(ABCDE) A(加速生成氯化银浑浊反应 B(消除某些弱酸盐的干扰 C(消除碳酸盐干扰 D(消除磷酸盐干扰 E(避免氧化银沉淀生成 4. 当采用比浊法检查氯化物杂质时，若药物本身有颜色而干扰检查的话，应该选用的处理方法为(AB) A(内消色法 B(外消色法 C(比色法 D(差示比浊法 E(差示可见分光法 5. 若要进行高锰酸钾中氯化物的检查，最佳方法是(D) A. 加入一定量氯仿提取后测定 B. 氧瓶燃烧 C. 倍量法 D. 加入一定量乙醇 E. 以上都不对 6. 下列哪些条件为药物中氯化物检查的必要条件(ABC) A. 所用比色管需配套 B. 稀硝酸酸性下(10ml/50ml) C. 避光放置5分钟 D. 用硝酸银标准溶液做对照 E. 在白色背景下观察 6(药物中硫酸盐检查时，所用的标准对照液是(D) A. 标准氯化钡 B. 标准醋酸铅溶液 C. 标准硝酸银溶液 D. 标准硫酸钾溶液 E. 以上都不对 7. 中国药典(2000年版)规定铁盐的检查方法为(A) A. 硫氰酸盐法 B. 巯基醋酸法 C. 普鲁士蓝法 D. 邻二氮菲法 E. 水杨酸显色法 8. 中国药典(2000年版)规定，硫氰酸铵法检查铁盐时，加入过硫酸按的目的是(AB) - 23 - 23 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 3+ A. 使药物中铁盐都转变为Fe B. 防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色 C. 使产生的红色产物颜色更深 D(防止干扰 E(便于观察、比较 9. 某药物(黄色)欲进行铁盐检查，应采用下面哪种方法(E) A. 倍量法 B. 微孔滤膜过滤法 C. 调色法 D. 600,700?炽灼残渣后测定 E. 以上都不对 10. 中国药典收载的铁盐检查，主要是检查(D) 2+ 3+ 2+3+ A. Fe B. FeC. FeD. Fe和Fe E. 以上都不对 11(重金属检查中，加入硫代乙酰胺时溶液控制最佳的pH值是(B) A. 1.5 B. 3.5 C(7.5 D. 9.5 E. 11.5 12(微孔滤膜法是用来检查(C) A. 氯化物 B. 砷盐 C. 重金属 D. 硫化物 E. 氰化物 13. 中国药典(2000年版)重金属检查法中，所使用的显色剂是(BC) A. 硫化氢试液 B. 硫代乙酰胺试液 C. 硫化钠试液 D. 氰化钾试液 E. 硫氰酸铵试液 14. 葡萄糖中进行重金属检查时，适宜的条件是(C) A. 用硫代乙酰胺为标准对照液 B. 用10ml稀硝酸/50ml酸化 C. 在pH3.5醋酸盐缓冲溶液中 D. 用硫化钠为试液 E. 结果需在黑色背景下观察 15. 现有一药物为苯巴比妥，欲进行重金属检查，应采用《中国药典》上收载的重金属检查的哪种方法(C) A. 一法 B. 二法 C. 三法 D. 四法 E. 以上都不对 16. 下面哪些方法为《中国药典》收载的重金属检查方法(ACD) A. 500,600?炽灼残渣后,按一法操作 B. pH3,3.5条件下，加入硫化氢试液 C. 碱性下，加入硫化钠试液 D. 按一法操作，结果用微孔滤膜过滤后观察色斑 E. 以上都对 17. 在药物的杂质检查中，其限量一般不超过百万分之十的是(D) A. 氯化物 B. 硫酸盐 C. 醋酸盐 D. 砷盐 E. 淀粉 - 24 - 24 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 18. 在用古蔡法检查砷盐时，导气管中塞入醋酸铅棉花的目的是(C) A. 除去I B. 除去AsHC. 除去HS D. 除去HBr E. 除去SbH 23 2 319(砷盐检查法中，在检砷装置导气管中塞入醋酸铅棉花的作用是(C) A. 吸收砷化氢 B. 吸收溴化氢 C. 吸收硫化氢 D. 吸收氯化氢 E. 吸收锑化氢 20. 古蔡氏法中，SnC1的作用有(ACD) 2 5+3+A. 使As?As B. 除去HS C. 除去I D. 组成锌锡齐 E. 除去其它杂质 22 21. Ag—DDC法检查砷盐的原理为:砷化氢与Ag—DDC吡啶作用，生成的物质是(E) A. 砷斑 B. 锑斑 C. 胶态砷 D. 三氧化二砷 E. 胶态银 22. 中国药典(1995年版)收载的古蔡法检查砷盐的基本原理是(BE) A. 与锌、酸作用生成HS气体 B. 与锌、酸作用生成AsH气体 23C. 产生的气体遇氯化汞试纸产生砷斑 D. 比较供试品砷斑与标准品砷斑的面积大小 E. 比较供试品砷斑与标准品砷斑的颜色强度 23((1-5)适用于 A. 古蔡氏(Gutzeit)法 B. 二乙基二硫代氨基甲酸银法 C. A和B均可 D. A和B均不可 1(在连接砷化氢发生瓶的导管中装入醋酸铅棉花(C) 2(使用的标准砷溶液为2m1(C) 3(测定结果要与标准砷斑相比较(A) 4(要测定吸收度(B) 5(要用酸碱滴定法(D) 24([1,5]用古蔡氏法检查下列药物中的砷盐时，排除干扰的方法: A. 先用硝酸或溴水氧化 B. 先加酸性氯化亚锑还原 C. 改用白田道夫法 D. 先加氰化钾掩蔽 E. 先加草酸生成沉淀 1. 硫化物(A) - 25 - 25 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 2. 亚硫酸盐(A) 3. 硫代硫酸盐(A) 4. 高铁盐(B) 5. 锑盐(C) 25. Ag—DDC法检查砷盐时，所产生的红色溶液为(C) A. HDDC吡啶溶液 B. Ag吡啶溶液 C. Ag的胶态溶液 D. Ag(DDC)溶液 E. AsAg3溶液 26. ChP(2000)检查葡萄糖酸锑钠中的砷盐时，应选用(B) A. 古蔡氏法 B. 白田道夫法 C. 碘量法 D. Ag—DDC法 27. 葡萄糖中砷盐的检查，需要的试剂应有(BCDE) 2+A(Pb标准液 B(SnCl试液 C(KI试液 D(Zn E(醋酸铅棉花 2 28. Ag-DDC法检查砷盐时，加入碘化钾和酸性氯化亚锡的作用为(ABCDE) 5+3+ A(将As还原为AsB(有利于AsH生成反应 C(抑制SbH的生成 33D(形成Zn-Sn齐以均匀而连续地发生氢气 E(催化加速生成AsH 329. 古蔡氏法检砷，药典规定制备标准砷斑时，应取标准砷溶液(C) A. 1ml B. 5ml C. 2ml D. 依限量大小决定 E. 以上都不对 30. 古蔡氏法检查所用的溶液是(B) A. 强碱性溶液 B. 强酸性溶液 C. 含稀盐酸10ml/50ml溶液 D. 含稀硝酸10ml/50ml溶液 E. 含强氧化剂(硝酸或过硫酸) 31([1—5]所含待测杂质的适宜检测量为 A. 0.002mg B. 0.01,0.02mg C. 0.01,0.05mg 0.08mg E. 0.1,0.5mg D. 0.05, 1. 硫酸盐检查法中，50ml溶液中(E) 2. 铁盐检查法中，50ml溶液中(C) 3. 重金属检查法中，35ml溶液中(B) 4. 古蔡氏法中，反应液中(A) 5. 氯化物检查法中，50ml溶液中(D) 32([1—5] A. 硝酸银试液 B. 氯化钡试液 C. 硫代乙酰胺试液 - 26 - 26 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 D. 硫化钠试液 E. 硫氰酸盐试液 1(药物中铁盐检查(E) 2(磺胺嘧啶中重金属检查(D) 3(药物中硫酸盐检查(B) 4(葡萄糖中重金属检查(C) 5(药物中氯化物检查(A) 33([1—5]可用于检查的杂质为 A. 氯化物 B. 砷盐 C. 铁盐 D. 硫酸盐 E. 重金属 1(在酸性溶液中与氯化钡生成浑浊液的方法(D) 2(在酸性溶液中与硫氰酸盐生成红色的方法(C) 3(在实验条件下与硫代乙酰胺形成均匀混悬溶液的方法(E) 4(Ag-DDC法(B) 5(古蔡法(B) 34([1,5] 杂质检查中所用的酸是 A. 稀硝酸 B. 稀盐酸 C. 硝酸 D. 盐酸 E. 醋酸盐缓冲液 1. 氯化物检查法(A) 2. 硫酸盐检查法(B) 3. 铁盐检查法(B) 4. 重金属检查法(E) 5. 砷盐检查法(D) 35. 炽灼残渣检查法一般加热恒重的温度为(C) A. 500,600? B. 600,700? C. 700,800? D. 800,1000? E. 1000,1200? 36. 炽灼残渣检查后，将残渣留作重金属检查时，炽灼温度应为(A) A. 500,600? B. 600,700? C. 700,800? D. 800,1000? E. 1000,1200? 37. 炽灼残渣的限量一般为(E) A. 1, B. 0.5,,1, C. 0.4,,0.5, D. 0.2,,0.3, E. 0.1,,0.2, - 27 - 27 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 38. 炽灼残渣检查时，炭化后经硫酸处理后灰化至完全的称为(C) A. 灰分 B. 残渣 C. 硫酸灰分 D. 炽灼灰分 E. 残余灰分 39([1,5] A(干燥失重测定法 B(炽灼残渣检查 C(两者皆是 D(两者皆不是 1. 有机物杂质检测法(D) 2. 不溶物的测定法(D) 3. 杂质检查法(C) 4. 有机药物中不挥发无机物的检测法(B) 5. 药物中挥发性物质的检测法(A) 40. 干燥失重测定的方法有(BCDE) A(炽灼(500,600?)法 B(常压恒温干澡法 C(减压干燥法 D(干燥剂干燥法 E(减压干燥剂干燥法 41. 干燥失重测定中应注意哪几个方面(ABCD) A. 供试品平铺在称量瓶中的厚度一般不超过5mm B. 干燥温度一般为105? C. 可用干燥剂干燥 D. 主要指水分和挥发性物质 E. 测定时间不超过3小时 - 28 - 28 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 小结 1、掌握药物中一般杂质检查的原理和方法: ,1,氯化物检查法:原理及干扰色的消除 ,2,重金属检查法: ,a,重金属:指实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质, ,b,四种方法之原理及注意事项 ,3,砷盐检查法 ,a,古蔡氏法:包括原理及试剂作用 ,b,Ag-DDC法:原理4、熟悉特殊杂质的检查方法 识记:杂质限量、干燥失重、炽灼残渣、易炭化物、指示性杂质、重金属。 思考题 1，药物重金属检查法中，重金属以什么代表,有那几种显色剂,检查的方法共有哪几种,,95年版的药典一共收载几法, 2，简述中国药典对药物中氯化物检查法的原理，方法及限量公式, 3，简述硫代乙酰胺法检查重金属的原理和方法 - 29 - 29 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 第三节 特殊杂质检查方法 基本要求 了解药物特殊杂质检查方法 特殊杂质:不同的药物，由于其合成工艺、原料和结构性能等不同，在生产和贮藏过程中可能引入的特有杂质，即特殊杂质。 检查方法 利用药物和杂质在物理性质上的差异 利用药物和杂质在化学性质上的差异 一、利用药物和杂质在物理性质上的差异 物理法 光谱法 色谱法 (一) 物理法 1，臭味及挥发性的差异 2，颜色的差异 3，溶解行为的差异 4，旋光性质的差异(比旋度可以反映药物的纯度) (二) 光谱法 1，紫外分光光度法 2，原子吸收分光光度法(主要用于金属元素的测定) 3，红外分光光度法(主要用于药物中无效或低效晶型的检查) 5，荧光分析法 (三) 色谱法(广泛) 具有分离检测两项功能 1.纸色谱法(常用于极性较大物质的分离分析) 2.薄层色谱法(简便、快速、灵敏度高、不许特殊设备) TLC是药典中最常用的特殊杂质限量检查方法。 常用的方法有 1)在一定供试品及检查条件下，不允许有杂质斑点存在(自身对照法) 2)以待测杂质对照品检测(杂质对照品法) 3)将供试品稀释到适当浓度作为杂质对照品溶液(高低浓度对比法) - 30 - 30 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 4)选用质量符合规定的与供试品相同的药物作为杂质对照品(对照药物法) 3.高效液相色谱法 (分离效能高、在线检测，可以准确测定含量) 1)峰面积归一化法 2)主成分自身对照法(不加校正因子，加校正因子) 3)内标法测定 4)内标法加校正因子法 5)外标法 4.气相色谱法(分离效能高、在线检测，可以准确测定含量) 有机溶剂残留量测定法 挥发性的特殊杂质 二、利用药物和杂质在化学性质上的差异 (化学反应法) (一)酸碱性的差异 (二)氧化还原性的差异 (三)杂质与一定试剂反应产生沉淀 (四)杂质与一定试剂反应产生颜色 (五) 杂质与一定试剂反应产生气体 (六)药物经有机破坏后检查杂质 小结 (一)物理法 1，臭味及挥发性的差异 2，颜色的差异 3，溶解行为的差异 4，旋光性质的差异(比旋度可以反映药物的纯度) (二)光谱法 1，紫外分光光度法 2，原子吸收分光光度法(主要用于金属元素的测定) 3，红外分光光度法(主要用于药物中无效或低效晶型的检查) 6，荧光分析法 (三)色谱法(广泛) - 31 - 31 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 1.纸色谱法(常用于极性较大物质的分离分析) 2.薄层色谱法(简便、快速、灵敏度高、不许特殊设备) TLC是药典中最常用的特殊杂质限量检查方法。 常用的方法有 1)自身对照法 2)杂质对照品法 3)高低浓度对比法 4)对照药物法 3.高效液相色谱法 1)峰面积归一化法 2)主成分自身对照法(不加校正因子，加校正因子) 3)内标法测定 4)内标法加校正因子法 5)外标法 4.气相色谱法(分离效能高、在线检测，可以准确测定含量) 有机溶剂残留量测定法 挥发性的特殊杂质 (四)化学法 1,酸碱性的差异 2,氧化还原性的差异 3,杂质与一定试剂反应产生沉淀 4,杂质与一定试剂反应产生颜色 5,杂质与一定试剂反应产生气体 6,药物经有机破坏后检查杂质 思考题 1,简述特殊杂质检查的方法。 2,简述色谱法在杂质检查中的应用。 - 32 - 32 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 本章小结 1、熟悉药物纯度的概念，熟悉药物中杂质的来源: (1)药物纯度:药物纯净的程度。 (2)来源:主要有两个方面，即生产过程中引入和贮存过程中产生。 2、掌握杂质限量的概念和检查方法，杂质限量的计算: (1)杂质限量:药物中允许含杂质的最大量。 (2)检查方法有(a)对照法(b)灵敏度法(c)比较法 C，V(3)计算: L,，100%S 3、掌握药物中一般杂质检查的原理和方法: (1)氯化物检查法:原理及干扰色的消除 (2)重金属检查法: (a)重金属:指实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质; (b)四种方法之原理及注意事项 (3)砷盐检查法 (a)古蔡氏法:包括原理及试剂作用 (b)Ag-DDC法:原理 4、熟悉特殊杂质的检查方法 (1)一般杂质:自然界分布广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引 入的杂质 (2)特殊杂质:个别药物在生产和贮藏过程中引入的杂质 (3)信号杂质:含量可反映药物纯度水平的杂质 4)常用检查方法:物理法、光谱法、色谱法、化学法 ( 考核知识点与考核目标 (一)药物杂质的概念和性质(一般) 识记:杂质、一般杂质、特殊杂质、杂质来源、药用纯度与化学纯度的区别 (二)杂质的检查方法(重点) 识记:杂质限量、干燥失重、炽灼残渣、易炭化物、重金属。 - 33 - 33 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 理解:杂质限量计算;氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、炽灼残渣、干燥失重、水分、酸碱度、特殊杂质TLC法、HPLC法、GC法检查的基本原理、方法、注意事项。 [本章练习题与答案] 一、简答题 1(简述硫代乙酰胺法检查重金属的基本原理，说明主要试验条件对检查结果的影响，若供试品不溶解于水，可采用哪些方法消除其干扰, 答:硫代乙酰胺法，硫代乙酰胺在弱酸性条件下水解产生硫化氢，与重金属离子生成黄色到棕黄黑色的硫化物均匀混悬液。适用于供试品液澄清、无色，对检查无干扰或经处理后对检查无干扰的药物。若供试品不溶于水，可采用供试品炽灼破坏后检查，如在酸性中不溶可采用在碱性条件下与硫化钠反应，微量金属离子时可用微孔滤膜法。 2(检查溴化物中氯化物杂质时，应怎样排除碘化物、溴化物的干扰, 答:检查溴化物中氯化物时，碘离子、溴离子也与硝酸银形成沉淀，干扰检查。可在供试品中加入一定量的酸和过氧化氢溶液，加热煮沸，使碘离子、溴离子被氧化为碘和溴而挥发，溶液澄清无色后，再依法检查。 3(氯化物检查法为什么要求必须在硝酸酸性溶液中进行, 答:检查在硝酸酸性溶液中进行。加入硝酸可避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成而干扰检查，同时还可加速氧化银沉淀的生成并产生较好的乳浊。 4(简述药品中微量硫酸盐检查法的原理, 答:硫酸盐检查是利用该杂质与氯化钡在盐酸酸性溶液中生成硫酸钡的白色浑浊液，与一定量标准硫酸钾溶液与氯化钡在相同条件下生成的浑浊比较，以判断药物中硫酸盐是否超过限量。 5(用硫氰酸盐检查药品中的铁盐杂质时，为什么要求加入过量的(30%，3ml)硫氰酸胺溶液, 答:铁盐与硫氰酸根离子的反应为可逆反应，因此，加入过量的硫氰酸铵，不仅可以增加生成配离子的稳定性，提高反应灵敏度，还能消除氯化物等与铁盐生成配位化合物所引起的干扰。 - 34 - 34 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 6(用古蔡法检查药物中微量砷盐时，为什么要求加入碘化钾试液和酸性氯化亚锡试液, 答:原理是:金属Zn与酸作用产生新生态的氢，与药物中砷化合生成的砷化氢，遇溴化汞试纸产生黄色的砷斑，与定量标准砷溶液生成的砷斑比较，判断含砷的限量。 氯化亚锡的作用是:使碘还原成碘离子，生成锌锡齐，去极化，使氢连续生成;使五价砷还原成三价砷。 7(用古蔡法检查药物中微量砷盐的原理是什么, 答:古蔡法检查砷的原理是金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中微量砷盐反应生成具有挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑，与一定量的标准砷溶液所生成的砷斑比较，判定药物中砷盐的含量。 8(什么是重金属,chp中规定的四种方法分别适用于哪些药物的重金属检查, 答:重金属系指在实验条件下能与S2-作用显色的金属杂质，如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等。药典中检查方法有:硫代乙酰胺法、炽灼破坏后硫代乙酰胺法、硫化钠法、微孔滤膜法。 9(进行杂质限量检查时如供试品有色应用哪几种方法来解决, 答:分为内消色法和外消色法。内消色法为取供试品两等份，其中一份经处理，消除其中待测离子后加入一定标准量的待测离子作为对照管，另一份作为供试品管，在相同条件下依法操作，检查待测离子是否超过限量。外消色法为加入一定的有色物，如稀焦糖等，不干扰测定。 10(什么是药物的纯度,通常可以从哪些方面来表明和评定药物的纯度, 答:药物的纯度是指药物的纯净程度，它反映了药物质量的优劣。通常可以从药物的结构、外观性状、理化常数、杂质检查和含量测定等方面作为一个有联系的整体来表明和评定药物的纯度。 11(药物中如含有超过限量的杂质，将对药物的理化性质和作用产生哪些影响, - 35 - 35 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 答:如药品中含有超过限量的杂质，可能使药品的理化常数变动，外观性状产生变异，并影响药物的稳定性;杂质增多也使含量明显偏低或活性降低，毒副作用显著增加。 12(药物中杂质的来源主要有哪几个方面, 答:药物中存在的杂质主要来源有两个方面。一是由生产过程引入;二是贮存过程中受外界条件的影响，引起药物理化性质发生变化而产生。 13(药品中铁盐杂质检查可采取哪两种方法,其原理是什么, 答:检查药品中铁盐杂质可采用硫氰酸盐法和巯基醋酸法两种。硫氰酸盐法原理为铁盐在盐酸酸性中与硫氰酸盐生成红色可溶性的硫氰酸铁配离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后进行比色法便可测出供试品中含铁盐杂质是否超过限量。 14(药物中杂质的来源有哪些,试举例说明。 答:药物中杂质主要有两个来源:一是在生产中引入，二是在贮藏过程中产生。例如在合成药物的生产过程中，未反应完全的原料、反应的中间体和副产物，在精制时未完全除去，就会成为产品中的杂质，如以工业氯化钠生产注射用氯化钠，从原料中引入溴化物、碘化物、硫酸盐、钾盐、钙盐、镁盐、铁盐等。药品在贮藏过程中，尤其在贮藏保管不善，或贮藏实践过长，在外界条件如温度、湿度、日光、空气的影响下，或因微生物的作用，可能发生水解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解和发霉等变化。 15(药物中杂质按来源和性质是如何分类的,是如何定义的, 答:药物中杂质按来源分类可分为一般杂质和特殊杂质。一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质。特殊杂质是指在个别药物的生产和贮藏过程中引入的杂质。药物中杂质按其性质还可分为信号杂质和有害杂质。信号杂质本身一般无害，但其含量的多少可以反映出药物的纯度水平，如含量过多，表明药物的纯度差。氯化物、硫酸盐等就属于信号杂质。重金属、砷盐、氰化物等对人体有害，为有害杂质。在质量标准中必须严格控制。 (什么是杂质的限量,什么是杂质的限量检查, 16 - 36 - 36 新疆医科大学教案续页 药物的杂质检查 答:在不影响疗效和不发生毒性的前提下，对于药物中可能存在的杂质，允许有一定的量，药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。药物中杂质的检查，一般也不要求测定其含量，而只检查杂质的量是否超过限量。这种杂质检查的方法叫做杂质的限量检查。在药品质量标准中杂质的检查多数为限量检查。 17(简述氯化物检查法的原理和方法，若为有机氯杂质，可采用哪些方法进行处理破坏, 答:中国药典的氯化物检查法是利用Cl-在硝酸酸性溶液中与硝酸银作用，生成氯化银的白色浑浊液，与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银浑浊液比较，以判断供试品中的氯化物是否超过了限量。 有机氯杂质需先进行破坏处理，使有机氯转变为氯离子，再进行检查。如碱性溶液中水解，氧瓶燃烧法等。 18(中国药典中重金属检查法共有哪些方法,它们的原理和方法是什么,各适用于哪些情况, 答:中国药典共有四法:一:硫代乙酰胺法，硫代乙酰胺在弱酸性条件下水解产生硫化氢，与重金属离子生成黄色到棕黄黑色的硫化物均匀混悬液。适用于供试品液澄清、无色，对检查无干扰或经处理后对检查无干扰的药物。二:先破坏炽灼后检查或取炽灼残渣项下遗留的残渣进行检查。用于在水中难溶，或能与重金属离子形成配位化合物而影响检查的有机药物。三、硫化钠法，用于在酸性条件下药物难溶于水而在碱性条件下可溶的药物。四、微孔滤膜法，用于含2—5ug重金属杂质的检查。 - 37 - 37