饵料中的维生素B6对日本沼虾部分免疫功能的影响

饵料中的维生素B6对日本沼虾部分免疫功能的影响 饵料中的维生素B6对日本沼虾部分免疫功 能的影响 一 安徽农业科学.Joumal0fAnhuiA.Sei.2009.37(17):80一8026责任编辑张扬林责任校对况玲玲 饵料中的维生素B6对日本沼虾部分免疫功能的影响 王亚斌,张亚娟2,王军(1. 保定市环境监测站,河北保定07lo02;2.河北大学生命科学学院,河北保定o71o02) 摘要[目的]探讨饵料中维生素对日本沼虾部分免疫功能的影响.[方法]在温度为l823?,pH值为(7.50?0.1O)的条件下,研究 了饵料添加不同水平的维生素(O,40,80,160,240)对日本沼虾部分免疫功能的影响.[结果]随着饵料中维生素含量的增加, 日本沼虾肌肉中活性氧含量下降,维生素含量为8omr,/l【g时,其活性氧含量降至最低水平,但随着维生素含量的继续增加,其活性 氧含量迅速上升.饵料中添加一定量的维生素B6可明显提高日本沼虾肌肉中SOD的活性,当添加量为80Hkg时,SOD活性显着高于 对照组.[结论]添加一定量维生素可明显提高日本沼虾肌肉中SOD的活性,能够清除机体内由于缺乏维生素产生的活性氧自由 基,减轻自由基对机体的伤害,从而提高日本沼虾机体的免疫力. 关键词日本沼虾;维生素;活性氧;超氧化物歧化酶 中图分类号Q955文献标识码A文章编号0517—6611(2?9)17一O8O25—02 嘲0f?恤IlliIljIIFeed伽I0fhI懈n?咖for朋缸m?册删棚 弛NG咖etal(EnvironmentalM0ni嚷StationofBaoding,Bao,ttebei071002) AI,stract 【ObjectiveJTherese~mhaiIltoexploretheeffectofVBbinfeedonsomeinglllnefunctionforMacrobr~ 嘲.[Method】Under theeonditiomoften~eratureat16—23?andpH0f(7.50?0.1O),山eeffectofVwin1differentlevels(0,40,8o,160and240?I【g)in feedonpartofimrr~mefunctionforM.n/p~nensestudied. 【ResultJAlongwiththeincreaseofVcontentinfeed,theactiveoxygeni:~ntelltin rr~eleofM.懈decreased,the~etiveoxygencontentpedtotheminimallevelwheneonlentwas80kg,h0’vever,tIleactive oxygencontentmised~cklywiththeincreaseofVcontentcontinuously.acertain籼tofVB6infeedcouldobviouslyIleiIenSODactivity in吐len?lscleofg.嘲0nense,tlleSODactivitywassig出candybierthanthatofcontrolgroupasMditionquantitywas8cIIkg.[lusi伽【] Addingacerta~iountofVB6infeedcouldobviouslyheightenSODactivityinthemuscleofg.删御,andwasable幻1-b~nlovetileaetlveoxygen radicalsthatwasproducedtolackofVB6inbody,andlightentlIedaHlageofradicalsOnorganism,80thatthe~mityofM.蝴body couldbeimproved.’ 脚, Macrobrachiumwe;vi南民;Activeoxygen;Su~roxidedismumse 维生素在动物体内物质代谢中起着重要的作用.虾类 等单胃动物一般不能自身合成或合成的维生素量很少,难以 满足机体.的生理需要,必须从饲料中获得….而维生素 主要以辅酶的形式参与蛋白质和氨基酸的代谢,是动物必需 的生长因子_l-2J.近年来对于维生素在水产动物营养方 面的研究主要集中在生长和生理生化指标的影响以及需要 量等方面,对于免疫等其他方面的研究较少.日本沼虾 (Mo~robra&iumrdpponense)是我国和日本特有的淡水虾类,属 我国淡水渔业资源的重要组成部分.近年来,日本沼虾养殖 在全国范围内迅速发展,其饲料也为人们越来越关注.但目 前针对日本沼虾饲料配方的研究以蛋白质,氨基酸,脂肪酸, 糖类等营养物质为主,而对维生素,无机盐,以及一些微量营 养素方面的研究相对较少.笔者就饵料中不同水平的维生 素对日本沼虾部分免疫功能的影响进行初步探讨,以期 对日本沼虾的人工养殖提供参考. 1与方法 1.1材料试验所用的日本沼虾均购自河北白洋淀,水族 箱中驯养1周,驯养期间每日定时过量投喂人工饵料3次 (9:00,16:00,20:00),残饵及粪便于下次投喂前吸出,养殖用 水为曝气自来水,水中放置遮蔽物,防止虾互相蚕食. 基础饵料的配方参照l?~himaru等对日本沼虾的试验配 方J,其主要成分为鱼粉,豆油,面粉,豆粉,玉米面,复合维 生素和复合无机盐,含量分别为412,31,227,237,52,21,20 (复合维生素成分和复合无机盐成分参考文献[4]).基 础饵料中添加维生素配制成不同维生素水平的饵料,饵 料中维生素的含量分别为0,40,80,160,240~,/kg. 作者简介王亚斌(1975一),男,河北保定人,工程师,从事生态环境保 护研究. 收稿日期2009-03.17 1.2方法 1.2.1日本沼虾养殖.驯化结束后选取个体相近[平均体 重为(1.54?0.015)g,平均体长为(3.39?0.1t7)em]的日本沼 虾随机分为5组,每组2个平行,每个平行30尾.对照组每 日定时过量投喂基础饵料,其余组投喂含不同水平的维生素 的饵料.养殖水温为(18,23)cC,pH值为(7.50?0.10), 养殖时间28d.养殖结束用液氮速冻,一84?低温冰箱中 保存. 1.2.2活性氧测定.参考Nareelo等5的方法.取虾的肌肉 0.05g,加入1ml磷酸缓冲液(pH值7.2),超声波冰浴匀浆, 10000r/rain4?离心25min,取上清液50放入1.5rnl离心 管中,加入200?{Bss培养基和100浓度0.3%的Nm”, 培养2h后加入200甲醇,5000r/rain4?离心15min,弃 上清液,用浓度70%的甲醇洗净后置于低温烘箱中干燥,用 700浓度2mol/LKOH和800二甲基亚砜溶解沉淀后,于 620n[n测定光吸收值. 1.2.3超氧化物歧化酶(SoD)活力测定.参考静天玉等【6J 改进的邻苯三酚自氧化率法.取虾的肌肉0.10g,加入1.5 rnl磷酸缓冲液(pH值6.5),超声波冰浴匀浆,10000r/rain4 ?离心25rain,取上清液进行酶活.所得数据均用 SPSS10.0软件进行分析处理,P<0.05为存在显着差异. 2结果与分析 2.1维生素对日本沼虾组织中活性氧的影响由图l可 知,随着饵料中维生素B6含量的增加,日本沼虾肌肉中活性 氧含量下降,饵料中维生素B6含量为80nlqg时,日本沼虾 肌肉中的活性氧含量降至最低水平,并显着低于对照组(P< 0.cI5),但随着饵料中维生素B6含量的继续增加,日本沼虾肌 肉中活性氧含量迅速上升,并极显着高于对照组(P<0.01). 活性氧是生物体内通过单电子还原产生的化学性质活泼的 安徽农业科学2OO9生 物质,是机体内最常见的自由基,具有强有力的杀菌作用,但 过多的活性氧可引起自由基链式反应,把其他物质(DNA,蛋 白质和多元不饱和脂肪酸等)变成自由基,从而引起脂质过 氧化,造成DNA链断裂和氧化损伤等-7j,会对机体造成伤 害.试验中与对照组相比,饵料中添加低浓度的维生素B6 可明显降低机体内活性氧的产生,其中80mg/kg的浓度组使 得机体中活性氧含量降至最低水平并显着低于对照组(P< 0.(15).冯秀妮研究结果表明,饲料中添加维生素B6能够促 进机体蛋白质的合成,加速氨基酸的代谢和生成,提高机体 的营养状况[引.王宏伟等研究表明,在饵料中添加适量的微 量元素锰可降低日本沼虾体内的超氧阴离子自由基,提高虾 体的免疫机能_9J.但过量添加维生素导致日本沼虾机体 活性氧自由基水平显着升高,自由基代谢异常. 墨 釜们 鑫 鲁 毛 星 维生素&含量Pyridoxinecontc~t?~g/kg 图1维生素对日本沼虾肌肉中活性氧的影响 ng.1Effectspl,rid’l饵lROSinthenlulidl~i0fM.嘎印锨棚船 2.2维生素对日本沼虾肌肉中SOD的影响抗氧化酶 是无脊椎动物机体非特异性免疫的一个重要方面,在机体活 性氧自由基清除过程中处于关键地位,在防御过量活性氧自 由基的毒性方面起重要作用Ll...当SOD活性降低时,生物 体内会出现自由基量过多,导致疾病产生.该试验结果表 明,饵料中添加一定量的维生素可明显提高SOD的活性, 提高日本沼虾机体的免疫力.当添加量为80ne/’时,SOD 活性与对照组相比达到最高(P<0.05),但随添加量的进一 步增加,SoD活力显着下降(图2). 3结论与讨论 健康的生物体,其内环境中自由基的产生与消除处于动 态平衡状态,这主要是由于SOD具有消除自由基的功能,其 消除能力与SOD含量和活性有关【l.该试验结果表明,当 饵料中添加80nl(g的维生素时,可显着提高日本沼虾 (上接第8021页) C9j韩学文,杨建新,陈学军.澳大恤_森林可持续经营与森林认证的启示 [J].世界林业研究,2OO7,20(5):40—43. 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