山西太原部分医院阴沟肠杆菌的耐药特征及基因分析.pdf.doc

山西太原部分医院阴沟肠杆菌的耐药特征及基因.pdf.doc 山 西太 原 部 分 医院 阴 沟 肠 杆菌 的 耐药特 征及基 因分 析 , 本 人声明 ， 所 呈交 的 学位 论 文 系 在导 师 指导 下 本 文 独立完 成的 研究成果 。文 中 任何 引 用他人的 成果 ， 均已 做 出 明 确 标 注或 得到许 可 。论 文 内 容 未 包 含 法 律 意 义 上 已 属 于他人的 任何 形 式 的 研究成果 ， 也不包 含 本 人已 用于其 他学位 申 请 的 论 文 或 成果 。与我一同工作的 同志 对本 研究所 做 的 任何 贡 献 均已 在论 文 中 作了 明 确 的 说 明 并表 示谢意 。 本 文 如 违反 上 述 声明 ， 愿 意 承 担 以 下 责任和 后 果 : 论 文 作者签 名 : 嗲 己? , , 苈 畚 脑诮饷芎 笥ψ 袷卮斯 娑 , 论 文 作者签 名 : 移 汐哆 山 西医科 大学硕 士学位 论 文 超 广 谱 , 一内 酰 胺 酶 本 地区 医院 内 感染 提供 科 学依 据 。 测 , , 酶、, , 狹 酶基 因型 并进 行 基 因测 序 分 析 。 , , 软件 分 析 ，所 检 测 的 , 株 阴 沟 肠 杆菌 中 ，主 要分 离自 神 经 外 科、 痰 标 本 阳 性 率最高 为 , ,; 阴 沟 肠 杆菌对美罗培南 的 耐药率最低 为 , , ,，对头 孢 吡肟 、 , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ， , , , , , , , , , 產 , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 瓵, , , , , , , , , , , , , 篈 , , , , , , , , , , , , , ( , , ， , , , , , , , , , , , , ,, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 瑃 , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 是 肠 杆菌科 中 的 常 见 菌， 广 泛 存在于自 然界 中 ， 内 酰 胺 酶, , , , 氖 , 吭 诓欢显 黾 涌 , 。近几 年 , , 狹 型 ? 一内 酰 胺 酶扩 散很 快，到目前 为止 已 达, 多种 ， 给 临床治 疗带 来了 很 大的 困难 ， , , , 虴 , , 在世 界 范围 内 广 泛 报 道 ， 如 南 美、东 欧 、西欧 等 许 多国 家均检 出 该 酶? , , 煌 , 墓, 液偷 厍鳨 , , 亚型 不尽 相 同， 我国 以高 度 耐头 孢 噻肟 而对头 孢 他定敏感的 , , , 脱 苌 , 刚 级嗍, , 壳埃 珻 , — , 虰一内 酰 胺 酶 扩 散很 快， , , , 虴 , , 在肠 杆菌科 细 菌中 分 布 较 为 广 泛 ， 而且可 以 通 过 质粒介 导 、克 隆 菌 阴 沟 肠 杆菌对抗生 素敏 感性 的 分 析 , , 实验 材 料 , , 美罗培南 , , , 、头 孢 吡 肟 , , ， , , ， , , 、头 孢 曲松 , , 、头 孢 他啶 , , ， , , ， , , 、头 孢 噻肟 , 死 , , , , , 、头 孢 噻 肟 , , ， , , , , ， , , , , 、哌 拉 西林 , , ， , , 江苏 姜 堰市新 康 医疗器械 有 限公司 日本 定， 均购于法 国 生 物 梅 里 埃 公司， 严 格 按 仪器操 作手 册 说 明 进 行 。 , , 年 标 准判 断 结, , 软件 进 行 数 据 分 析 。药果 ， 用, , , 敏试 验 采用 , , 梦 蘧 , 薨 粽 喝【 , 海 , 诠 鼙诩 啡 ザ 嘤嗑 , 海 , 妹 薨 艟, 让芡 坑贛, , , — , , , 琼 脂 , , 版提 供的 标 准判 断 结果 。判 断 标 准是 抑菌 圈直径 ?, , 判 断 为 疑 产 , , 。 , 株 阴 沟 肠 杆菌在医院 病 区 的 分 布 , 株 阴 沟 肠 杆菌对种 常 用抗菌药物 的 药敏结 果 见 表 卜, ?疾 , 。 呼 吸 科 ， 为 , ( , ィ, 俅 挝9强 疲, , , , ,。由于这 些患 者常 伴有心 脑血 管 疾 病 、慢 性 阻 塞 性 肺部 疾 病 、外 伤等 基 础 疾 病 ， 由于住 院 时 间较 长 ， 长 期使 用广 谱 抗菌药物 、激 素药物 等 ， 是 造 成阴 沟 肠 杆菌感染 的 主 要原 因。另外 神 经 外 科 、骨 科 创伤性 手 术， 以 及术后 使 用 呼 吸 机 ， 侵入性 操 作如 气 管 切开、静脉插 管 、导 尿 管 、引 流 管 等 较 多应用， 导 致医院 感染 病 例 增高 。 第 二部 分 阴 沟 肠 杆菌 耐药基 因分 析 , , 实验 材 料 阴 沟 肠 杆菌, , 为 产 , , 酶质 控菌株 ， 均购于卫 生 部 临床检 验 中 心 。 天 津 金章 科 技发 展有 限公司 奥 豪斯 国 际 贸 易, 虾 , 有 限公司 上 海 复 生 生 物 研究所 净化 工作台 高 压 灭菌 锅 , 无 菌蒸 馏水 中 ，充, , ? 嘌 , , , 咳, 分 混匀， , , , , , , , 缓冲液， 充分 混匀后 ，微 波 炉 加 热 至 , , ( , ,錎, 制 备 , , ( , , , ×, , , , , , 。, 由, , ，共 , 个 循 环 ， , , 牒, 宸 永 嫉 , , , , , , 浞只 煸 膌 , , , 龋 珼 , , , , 星 碇 , 悄 , 旱 缬 荆 , 缬 净撼逡 何 , ( , 罷 , ， 分 别加 入制 备 好 的 含 , 的 , , , 的 琼 脂糖加 样 孔中 。电泳电压 为, , ，时 间为 , ，, , , , ，电泳结束 后 ，与, , , 进 行 比 对， 阳 性 产 物 在紫 外 照相 分 析 仪下 观 察成红 色 的 荧光 条 带 ， 用凝 胶成像 系 统 拍 照， 记 录 结果 。 , , , 騊 , 反 应 条 件 , , , 取 , , , , , , , 作为 分 子 量 标 记 ， 恒 压 , , ， 电泳, — , , , ( , 呷, , 騊 , 扩 增结果 及基 因测 序 分 析 , , , 型 部 分 测 序 结果 一燃 ‘?一嗵 ,,,埽,,一 甴制一 一?川? ( “;。 出 ;;? 姓 , , , , , 泓 汹 蕊 蛸,?撇 舰 ,且,尽 ,觟 , 、, 、, 和 , : , , 狹 , 群 包 括 , , 甅 一, , , 篊 , ( , , 群 包 括 , , 狹 一, , , , , , , , 、, 、, 、, 、, 、, 和 , : , , 甅 , , 喊 , –, ( , , , , , , , 引 , , 甅 型 的 超 广 谱 , 一内 酰 胺 酶在世 界 范围 内 主 要存在于: 南 非 、远 东 和 东 欧 三 个 地区 。近年 来, , 甅 型 造 成院 内 感染 流 行 。 , ( , , , , , , , , , , , , , : , , , : , , — , , , , ( , , , 【 , , , , ，, , , , , , , , , , , , , , , , , , , 【 , , , , , , , ( , , , ( , , , , — , , , , , , , , , , , 篴 , , , , , : , , , , ( , 瓽 , , , , , , , — , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ( , , , , , — , , , , ?, , , , , , , , , , , , : , , , , ( , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ( , , , , , , , , , ，, , , , ( , , ( , , , , , , , , , , , , , , , 籐, , , , ( , , , ( , , , , , , , , , , , , , , 猂 , , , , 第 二部 分 : , , , , ， , , , 甅 ( , , , , , 瓹 , , , , , , , , , , , , , , , ( , , , , , , , , , ( , , , , , , , , — , , , , , , , , ( , , , , , ( , , , , , , , 【 , , , , , , , , : , , , , , 【 , , , , , , , 琒, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ，, , ( , , , , , , , ，, , , , , , , , , , 瓵, , 琓 , , , , , , , , , , , , ， , , ， , : , , , , ( , , , , , , , , , , , , , , , , , 甁 , 【 , 】 李 家斌 ，李 惠，李 旭 ，等 ( 合肥 市产 超 广 谱 , 荒邗 ,访妇 , 闏, , 型 耐药基 因的 初步分 布 , , : , , , , ( , , 琈 ’, , , , 甅 , , , , 琣 , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , : , , , , ( , , , , — , , , , , 一, , , , 縋 , , , , 珻 , , , , , , , , , , , , 】 ( , , , , , , , , , 阴 沟 肠 杆菌的 耐药机 制 及基 因分 型 , , 作用最强 的 药物 ， 有 时 甚至 成为 惟 一的 药物 选择 。阴 沟 肠 杆菌可 产 生 多种 碳 青 霉 烯 酶， 如 , , , , , 、, , , , 、, , , , , , , 等 , , , , , , , , 暝 诩 永 , , 嵫 且皆 旱 , 例 患 者 , , 饔 冒 形 籔, 改 变 , 一内 酰 胺 类抗生 素与细 菌内 膜 结合的 专, 靶 位 为 青 霉 素结合蛋 白 综 上 所 述 ， 阴 沟 肠 杆菌的 耐药机 制 非 常 复 杂 ， 多种 耐药机 制 可 协 同作用， 造 成阴 沟 肠 — — ( , ， , , , , , , , , , 鱰 , ( , , , , , , , , , , , , , , , , , : , , , , , , ( , , , , , , , , , , 琌 , , , 琁 , , , , , , , , , , , , , , , ( , , , , , , , , , , , 泄 , 郎 , 煅樵又 , , : , , , , ( 荆, , , , , , 【 , 糠肭 浚 , , 复 蟪 Π,,, 头 窝 卓 死 撞 , , 募觳 饧澳鸵? 苑 治 觥 綣 】 ( 中 国 感染 控制 杂 志 ， , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 瓹 , , , ， , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 緾 , , , , , , , , , , , , , , , , , , 琑 , , , , 猯 , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 姓 名 杂 志 ， , , 年 第 , 淼 , 期。