复方中药降血脂作用及减肥作用的研究

复方中药降血脂作用及减肥作用的研究 每此麈业学握2011,20(i0):20—23 ActaAgriculturaeBoreali—occidentalisSinica 复方中药降血脂作用及减肥作用的研究 傅晨,欧阳五庆,尚朋朋,王璩 (西北农林科技大学动医学院,陕西杨凌712lOO) 摘要:研究一种复方中药对小鼠的降血脂作用及减肥作用.分别在常效,预防,拮抗和治疗4个阶段末,测 定对照组和药物组小鼠血清中甘油三酯(TG),总胆固醇(TCH)和高密度脂蛋白一胆固醇(HDL—c)的浓度;测 量两组小鼠的体质量和体脂质量,计算脂肪系数;取小鼠腹部肠系膜脂肪组织做石蜡切片,观察脂肪细胞差 异.常效和预防阶段,药物组TG,TCH浓度有所降低但不明显(P>O.05);在拮抗和治疗阶段,药物组TG, TCH浓度显着低于对照组,而HDL—C浓度显着高于对照组(P<O.01);给药后,药物组小鼠的体质量和脂肪 系数显着降低(P<O.05),且肠系膜脂肪细胞明显缩小.该复方中药具有显着的降血脂及减肥作用. 关键词:复方中药;降血脂;减肥 中图分类号:R151.1文献标志码:A文章编 号:1004—1389(2011)10-002004 EffectsoftheCompoundTraditionalChineseMedicine onFatReducingandWeight_loss FUChen.OUYANGWuqing. (CollegeofVeterinaryMedicine,Northwest SHANGPengpengandWANGJing AgcFUniversity,YanglingShaanxi712100,China) Abstract:TostudytheeffectofacompoundtraditionalChinesemedicine(TCM)onreducingblood lipidandfatofmice,theconcentrationofTG,TGHandHDL—Cinbloodseru moftwogroupsofmice weremeasuredatthenormal,prevention,antagonismandtreatmentstage;bodyweight,fatweight weremeasuredandfatindexwascalculatedindifferentgroups;paraffinsectionswerealsomadefrom mesentericadiposetissueofmice,themorphologica1differencesofadipocytewereobservedinthe groups.TheconcentrationofTGandTGHofdruggroupweresignificantlylowerthancontrolgroup atantagonismandtreatmentstage,whileconcentrationofHDL—Cremained higher(P<O.01);after administration.bodyweightandfatindexweresignificantlyreduced(P~0.05 ),andthesizeofmesen— tericadipocyteobviouslyshrinked.ThecompoundTCMcontributessignific antlytoreducingblood lipidandlosingweight. Keywords:CompoundTCM;Fatreduce;Weight—loss 中医学中无高脂血症病名,但类似高脂血症 的一些症侯,则散见于历代医学资料中,如痰证, 心悸,眩晕,胸痹,真心痛,中风等范畴,引起高脂 血症的病因病机:一是过食膏梁肥甘厚味,损伤脾 胃,运化失司,痰湿内生,而发本症;二是脏腑运化 水湿,化生精微功能减退_1].与西医不同的是,在 中医中,脾是具有运化水谷功能的脏腑,论其作 用:它能消化饮食,又能统摄周身血液,调节血液 循环引.因此,要降低血脂,有赖于脾发挥正常的 运化能力.本试验将对复方中药的降脂及减肥作 用进行研究. 收稿日期:2010—10-20修回日期:20101209 基金项目:陕西省重大科技创新专项基金(K332020916). 第一作者:傅晨,女,在读硕士,从事生理学研究.Email:fu—dayday.@163.com 通讯作者:欧阳五庆,男,教授,博士生导师,主要从事新兽药开发,细胞生物学和泌乳生理研究.Email:oywq506@sina.eom 傅晨等:复方中药降血脂作用及减肥作用的研究?21’ 1材料与方法 1.1动物 35日龄昆明种雌性小鼠4O只,购自第四军 医大学. 1.2试剂与仪器 甘油三酯(TG)测定试剂盒(酶终点法),总胆 固醇(TCH)测定试剂盒(酶终点法),高密度脂蛋 白一胆固醇(HDL—C)测定试剂盒(PTA—Mg抖沉淀 法)均购自温州东瓯津玛生物科技有限公司.西 布曲名购自陕西森弗生物技术有限公司. 数显恒温水浴锅(常州国华电器有限公司,型 号HH一6),紫外分光光度计(德国Jena仪器 股份公司,SPECORD50),低速台式离心机(长沙 湘仪离心机仪器有限公司,型号TDZ4一WS),电 子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司,型号 BS224S). 1.3药物 复方药物浸膏(荷叶,海藻,黄芪,白术,茯苓, 山楂). 1.4饲料 基础饲料:面粉380g/kg,玉米粉200g/kg, 麸皮160g/kg,豆粕150g/kg,鱼粉40g/kg,骨 粉30g/kg,酵母,食盐,鱼肝油和微量元素添加 剂各10g/kg.高脂饲料:在普通日粮的基础上, 添加200g/kg猪油即得高脂日粮?3]. 1.5方法 1.5.1分组及试验方法将40只小鼠随机分成 对照组和药物组,每组20只.称量体质量后,按 下面的顺序进行试验. 基础测定:试验前对2组小鼠进行眼眶取血 测定.常效处理:2组均饲以基础饲料,药物组每 只同时灌服复方中药0.25mI/d,2周后眼眶取 血测定.预防处理:停服复方中药,2组均饲喂高 脂饲料,2周后眼眶取血测定.拮抗处理:2组均 继续饲以高脂饲料,药物组每只同时灌服复方中 药0.25mL/d,2周后眼眶取血测定.治疗处理: 2组均饲以基础饲料,药物组每只同时继续灌服 复方中药0.25mL/d,2周后眼眶取血测定. 1.5.2血液样品的处理及测定取出的血液入 试管倾斜静置2h后,2000r/rain离心10rain, 取上清液得血清,按照生化试剂盒的说明书操作, 用紫外分光光度计分别测出血样中甘油三酯 (TG),总胆固醇(TCH)和高密度脂蛋白一胆固醇 (HDL—C)在500,600nm波长处各自的吸光值, 按以下算式求出这3种物质在样品中的浓度 (retool/L): CT一(AT×Cs)/As 式中:C为样品浓度,A为样品吸光值,Cs 为标准品浓度,A为标准品吸光值. 1.5.3脂肪系数的测定试验结束后,称量小鼠 体质量,然后处死,剖腹取体脂(肠系膜及肾周脂 肪垫)并称质量,计算脂肪系数(脂肪系数一 体脂质量/体质量). 1.5.4脂肪细胞观察2组小鼠取肠系膜脂肪 组织一小块,用体积分数为2.5甲醛溶液固定, 石蜡切片,HE染色I4],在20倍物镜下观察脂肪 细胞大小,并拍照. 1.5.5统计学处理用Excel2009软件对所测 数据进行处理,数据以”平均数?标准差”示. 用SPSS13.0统计软件作数据分析,采用t检验, 组间比较采用独立样本检验显着性. 2结果与分析 2.1复方中药对小鼠各阶段血脂浓度的影响 2.1.1对血清TG的影响由表1和图1可知, 正常小鼠在给药后血清TG浓度略有降低;停药 并给予高脂饲料后,可延缓TG浓度的增高,与对 照组相比PG0.05;继续饲喂高脂饲料并灌服药 物,可使TG显着下降(PGO.01);停喂高脂饲料 后,TG下降更为显着(PGO.01). 2.1.2对血清TCH的影响由表1和图2可 知,正常小鼠在给药后对血清TCH浓度影响不 大;停药并给予高脂饲料后,对TCH浓度增高的 延缓作用与对照组相比不显着(P>0.05);继续 饲喂高脂饲料并灌服药物,可使TCH显着下降 (P<0.01);停喂高脂饲料后,TCH下降更为显 着(P<0.01). 2.1.3对血清HDL—C的影响由表1和图3 可知,常效处理时药物组小鼠血清HDL—C含量 水平与对照组基本一致(P>0.05);停药并给予 高脂饲料后,对照组小鼠血清HDL—C浓度有所 下降,而药物组反见升高,差异显着(P<0.05); 继续饲喂高脂饲料并灌服药物,药物组小鼠血清 HDL—C浓度继续上升,并显着高于对照组(P< 0.01);停止饲喂高脂饲料后,药物组小鼠血清 HDL—c浓度水平有所回落,但依旧显着高于对照 组(PGO.05). ? 22?西北农业2O卷 项目 Item C TGTCHHDL— 对照组药物组对照组药物组对照组药物组 ControlgroupDraggroupControlgroupDraggroupControlgroupDraggrou p 注:对照组和药物组之间不同小写字母表示差异显着(P<O.05),不 同大写字母表示差异极显着(P-~O.01). Note:Betweenthecontrolgroupanddruggroup,differentlowcaselettersindi catesignificantdifference(P<0.05),differentcaptial lettersindicatesignificantdifference(P<O.01). 2.2复方中药对小鼠脂肪系数的影响 从表2可看出,该复方中药可以显着降低小 鼠的体质量,体脂质量,降低小鼠的脂肪系数 (Pd0.05). 醐牡 剐g .重 鞲耋 要墨 岛 嘏至錾 图1各阶段小鼠血清TG浓度的变化 Fig.1ChangesofTGconcentrationinmouse bloodserumateachstage 图2各阶段小鼠血清TCH浓度的变化 Fig.2ChangesofTCHconcentrationinmouse bloodserumateachstage 2.3复方中药对小鼠肠系膜脂肪细胞大小的 影响 由图4可以看出,在相同大小的放大倍数及 视野中,对照组小鼠腹部肠系膜脂肪细胞的数量 少于药物组,药物组的小鼠腹部肠系膜脂肪细胞 明显小于对照组.说明该复方中药能减少脂肪细 胞内脂肪含量,从而使细胞缩小. 图3各阶段小鼠血清HDL—C浓度的变化 Fig.3ChangesofHDL-Cconcentrationinmouse bloodserumateachstage A.对照组Controlgroup;B.药物组Druggroup 图4小鼠腹部肠系膜脂肪细胞光学显微镜照片(200×) Fig.4Microscopicobservationonmorphologyof mesentericadipocytesofcontrolgroucolumnindicatesignificantdifference( P<0.05) 3讨论 血清中甘油三酯及胆固醇含量是减肥降脂功 能常用的评价指标].高密度脂蛋白是心血管病 的保护因素,可减少患冠状动脉心脏病的危险,因 此其越高越不容易患心血管疾病,低则患病风险 增加].本研究表明,在常效处理阶段,药物组小 鼠的血清TG,TCH和HDL-C浓度均差异不大, 说明在正常饮食的条件下,复方中药的降脂作用 不明显;给药后,药物组TG,TCH浓度相对于对 照组均显着降低,而血清HDL—C浓度显着升高, 说明该复方中药具有显着的降血脂作用. 从对小鼠脂肪系数和脂肪细胞的影响结果来 看,本研究的复方中药具有减肥作用,能够降低小 鼠的体质量和脂肪系数;究其根本,是因为药物减 少脂肪细胞内脂肪的浓度,致使脂肪细胞缩小,从 而达到减肥目的. 本研究采用的复方药物中,荷叶所含主要有 效成分为荷叶生物碱_7],为中医常用的药物,《本 草纲目》载:”荷叶服之,令人瘦劣,单服可以消阳 水浮肿之气”;海藻中富含海藻酸,能通过阻碍胆 固醇的吸收和促进肝脏内胆固醇消耗,降低人体 内的胆固醇[8;黄芪性微温,味甘,归脾,肺经,具 健脾补中,益气固表等功能,具有促进机体代谢, 抗疲劳,促进血清和肝脏蛋白质更新的作用,还能 降血脂和降低血压[9;白术苦温而善于燥湿,含有 白术多糖,白术挥发油等化学成分,具有健脾益 气,燥湿利水等多种功效…】叩;茯苓甘淡而善于渗 湿,亦能益气健脾;白术茯苓合而用之,一燥一渗, 健脾除湿,相辅相成_】;山楂具有消食健胃,行气 散癖的功效,可治疗饮食积滞,高血脂症等[1. 本复方药物选用具有益气健脾,调理脾胃和减肥 降脂作用的中药,能够显着改善高脂血症小鼠的 症状,具有明显的减肥和降血脂作用. 参考文献: Eli洪行球,沃兴德,何一中,等.半夏降血脂作用研究EJ].浙江 中医学院,1995,19(2):28—29. E23张莉,李志西,杜双奎,等.桑椹醋减肥与抗疲劳作用的动 物试验[J].西北农林科技大学:自然科学版,2007, 35(7):227-230. [3]谢亮,孙超,彭永佳,等.AG490对肥胖模型小鼠脂代 谢及相关基因表达的影响EJ].西北农林科技大学:自 然科学版,2009,37(9):34—38. [4]王万云.脂肪组织制片方法探讨[J].中国当代医药,2010, 17(4)z134. [5]李博,李志西,魏瑛.麸皮及黑曲对玉米醋减肥降血脂作 用的影响[J].西北农林科技大学:自然科学版,2009, 37(2):194-198. [6]关章顺,吴俊,喻泽兰,等.荷叶水提物对人体高脂血症的 降脂效果研究[J].郴州医学高等专科学校,2003, 5(3):3-6. ET]许腊英,毛维伦,仁向东.荷叶降血脂的开发研究EJ].湖北 中医杂志,1996,18(总123):42—43. [8]程晓元.海藻胖男人减肥食物[J].农产品市场周刊,2008, 47:27. [9]吕越.张丽萍.黄芪煎剂降脂作用实验研究I-j].时珍国医 国药,2007,18(11):2613. E3o]单体中,汪以真.白术的生物学功能及其应用前景EJ]. 中国饲料,2005,18:25—27. [?]贾波,邓中甲,黄秀深.白术茯苓汤及其配伍对脾虚大鼠 胃肠激素的影响[J].成都中医药大学,2002,25(2): 13-I6, 1-12]吴士杰.李秋津,肖学风,等.山楂化学成分及药理作用的 研究[J].药物评价研究,2010,33(4):316—319.