止咳口服液主要成分的定性定量检测

止咳口服液主要成分的定性定量检测 止咳口服液主要成分的定性定量检测 2002年第lJ卷第3期 止咳口服液主要成分的定性定量检测 钱广鸿,王震 (江苏省海安县人民医院,江苏海安226600) 中图分类号:R927.11文献标识码:A文章编号:1006—4931(2002)03—0057—01 摘要目的:建立止咳13"服液的质量控制方法.方法:采用化学反 应鉴矛1渚和薄层色谱渚分矛1对止咳1:7服液中的黄酮类成分和马兜 铃进行定一_生鉴别,井用分光先度法对总黄酮(以芦丁计)进行含量 测定:蛄果:定性方法灵敏,可靠,定量方法简便,准确.结论:此拟 定可以有效地控制其质量一 关键词止咳口服液;总黄酮;马兜铃 止咳口服被是我院应用近20年的中药复方制剂,由扛板归,侧 柏叶,马兜铃,鱼腥草等组成,具有清肺利水,润肺止咳功效.对风热 感冒引起的咳嗽疗效确切,对上呼吸道感染等引起的咳嗽及百日咳 有效.笔者曾经对其工艺进行了研究.,为了更有效地控制其质量, 笔者采用化学反应鉴别法对其中的黄酮类成分,采用薄层色谱法对 其中的马兜铃进行定性鉴别,采用分光光度法对其中的主要成分总 黄酮I芦丁计)进行定量测定,结果表明能有效地控制其质量. 1实验材料,仪器与试剂 1+1实验材料 止咳口服液f本院自制『.马兜铃酸A对照品,芦丁对照品,马 兜铃对照药材(中国药品生物制品捡定所J I2仪器与试剂 53WB微机型紫外可见分光光度i_(上海光学仪器厂J,电光分 析天平(上海天平仪器厂『,三用紫外仪(上海顾村电光仪器 广),硅胶G预制板(青岛海洋化工厂),微量进样器f上海医用激光 傲器厂),其它试药,试剂均为分析纯 2方法和结果 2I化学反应鉴别 2I1供试液的制备 取止唛口服液5ad,用正丁醇萃取两次,每次10mL,分取正丁 醇液.台并.水浴蒸于,用甲醇5mI溶解残渣,作为供试液. 2I2盐酸一镁粉反应 取供试液各lmL,分置两支试管中,其中一支加^少量镁粉, 并墒加浓盐酸数滴,同置于水浴上加热lalin后.取出观察,不加盐 酸镁粉的溶液为橙黄色.加盐酸镁粉变为红棕色. 2l3醋酸镁反应 将供试液2滴分别滴于同一滤纸上,其中一点加1%醋酸镁己 醇溶液I滴,干燥后置紫外灯下观察,不加醋酸镁乙醇溶液的为天 蓝色,加醋酸镁己醇溶液的为黄绿色. 22薄层色谱鉴别 221供试液的制备 取止咳口服液5mL.用正丁醇萃取两次,每次10mL,分取正丁 醇液,合并.水浴蒸干,用乙醇5alL溶解残渣,作为供试液. 22.2对照品溶液的制备 取马兜铃酸A对照品,加乙醇制成每Iml含05mg的溶液作 为对照品溶液. 223对照药材溶液的制备 取马兜铃对照药材30g,加乙醇50alL,置水潜上加热回流 1h,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇5alL,使溶解,作为对照药材溶液. 22.4阴性供试液的制备 药品检测 按处方称取除马兜铃外的药材,同工艺制成口服液,同供试液 的制备法制成阴性供试液. 22.5薄层色谱鉴别实验 吸取上述4种溶液各101zL,分 别点于同一硅胶c薄层板(105~C活 化1h)上,甲苯一乙酸乙酯一甲酸 一 水(20:15:2:1)的上层液为展开 剂,展开,取出晾干,置紫外灯下 (356nm)下检视,结果见图1. 2.3检查 相对密度应不低于110(按 2000年版《中国药典》附录中相对密图 度测定法);pH值应为35,55(按 I对照品渡 2对照药材供试液 3供试品液 4马兜锌鹏性对照液 马兜锌的薄层譬别图谱 2000年版《中国药典》附录中DH值澳l定法);其他应符台2000年 版《中国药典》台剂项下有关的各项规定. 24含量测定方法 24.1标准曲线制备 精密称取120减压干燥至恒重的芦丁标准品20alg,置 100mL量瓶中,加甲醇适量溶解.置水浴上温热溶解,加甲醇稀释 至刻度,摇匀,精密吸取标准溶液00,l0,20,30,4.0, 50,6OraL,分别置25mL量瓶中.各加水至6mL.加5%亚硝酸钠 溶液1mL,摇匀.放置6rain.加10%硝酸铝溶渡lmL,摇匀,放置 6mln,加氢氧化钠试液10mL,再加水稀释至刻度,摇匀,放置 15min照分光光度法.在510nm波长处测吸收度,得c一?A关系 曲线,其回归方程为c=01804+77.8535?A09999,可见 芦丁对照品溶液在8—48p,g/mL浓度范围内呈线性关系 2.42加样回收试验 精密吸取样品5mL.置100mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀 后,精密吸取5mL分别置6个25mL量瓶中,其中5衍分男精密加 八无水芦丁对照品溶液(215?Ixg/mL)10,20,30,4.0,5.0mL, 摇匀,照样品测定项下操作.测得含量,计算回收率,结果见表1 表I回收单试验结果 24.3样品的含量测定 袁2止畦口服液舍量剥定结果 药品检测2002年第11卷第3期 氧氟沙星注射液细菌内毒素检查的研究 黄枝优 (广西百色地区民医院,广西百色533000) 中图分类号:R927.11文献标识码:B文章编号:1006—4931(2002)03—0058—01 摘要目的:探讨用鲎试荆桂查氧氟沙星注射液细菌内毒素的可 方法:对家兔热原检查夸格的氧氟沙星注射液作细酋内毒素 行性. 捡查的干扰试验:结果:氧氟沙星对鲎试荆的细菌内毒毒检查无干 扰.结论:鲎试剂可用于氧氟沙星注射液的细菌内毒素检查. 关键词氧氟沙星汪甜液;细菌内毒素检查;干扰试验 氧氟沙星是新型氟喹诺酮类抗苗药.抗菌谱广,对G菌, G一菌,赝氧菌均敏感,因而临床应用广泛2000年版《中国药典》规 定,氧氟沙星注射液的热原检查采用家免法.至于能否用细菌内毒 素检查法代替家兔击,尚未见文献报道.在此,笔昔拟通过比较鲎 试剂(TAL】在已知含量的内毒素水溶液中的反应和在含有相同台 量内毒素的氧氟沙星注射液中的反应,探讨用TAL检查氧氟沙星 注射液中细菌内毒素的可行性. 1实验材料 TAL【0lmL/支,灵敏度(l:05EU/mL.批号:000808lI细菌 内毒素工作标准品(批号:0011172】;细菌内毒素检查用水,无热原 安瓿,无热原吸头(均由湛江安度斯生物有限公司提供】;TAk (0.1mL/支,:05EU/mL,批号:001215,厦门鲎试剂厂生产】;氧 氟抄星注射液(规格:10OraL:200m<g,本院灭菌制剂室生产,家兔法 热原检查符合规定) 电热恒温水潜箱(-IP京医疗设备厂J,旋祸混合器(上海医科大学 仪器厂),微量移液器(中外合资上海求精生化试剂仪器有限公司】. 2实验步骤和方法 21细菌内毒素限值(L】的确定和样品最大有效稀释倍数 (吖VD)的计算 L=K,MMVD=L/ 式中,为按规定的给药途径,在临床上无任何不良反应的内毒索 阉剂量,静脉绐药时K:5(3EU/kg;吖为热原检查的兔注射剂量或成 』~的最大剂量,氧氟沙星注射液的兔注射剂量M=10mL/k~.因此,氧 氟沙垦注射液细菌内毒素限值=肼=5.0/10=0.5EU/ml:若选 用灵敏度=05EU/mL的TAL,样品的最大有效稀释倍数盯= ),即样品溶液不需稀释可直接作供试液. L/,X.=0.5/0.5=1(倍 22TAL灵敏度的复核 根据所用TAL的灵敏度标示值,用细菌内毒素检查用水将细 菌内毒素工作标准品溶解,在旋涡混合器上混匀(15rain】,并按1:2 等比稀释法将细菌内毒素稀释成浓度为2,k,,05,0.25k的 系列细菌内毒素溶液,按药典法'进行鲎试验,结果TAL的灵敏度 与其标示值相符. 23干扰试验 按TAL复核试验项下方法,用细菌内毒素检查用水和未检出内 毒素的氧氟沙星注射液分别将同一支细菌内毒素工作标准品制成 23.,,0.5,0253,四种浓度的内毒素溶液,每一浓度平行做4 支.另取细菌内毒素检查用水和含2的内毒素涪液分别作一支阴性 对照(c)管和阳胜对照fPc)管,置(37?1j?水浴Ih.结果见表1 表l氧氟沙星细菌内毒素柽查的干抚试验结果 结果判断:标准内毒素反应终点应在2k,0.5,否则干扰试验 无效.样品稀释液反应终点高于2,则表明样品稀释液对_r^L有 抑制作用;低于05,则袁明有增强作用;反应终点为2? 0.25h,表明样品对TAL既无抑制作用,也无增强作用,亦即无干扰 作用.从表1中可看出,采用两个不同厂家的TAL作干扰试验,结 果相同,即:Pc管为阳性,NC管为阴性,反应终点为,说明氧氟涉 星对_rAL无干扰作用. 24实际应用 选用=05EU/mL的经灵敏度复核台格的TAL,对5个批号 的氧氟沙垦注射液作细菌内毒素检查,这些样品经家兔热原检查 均合格,每种样品设5支反应管,其中供试品管(MVD=l倍】2支, 阴性,阳性,供试品阳性对照管各1支.让上述反应管中TAL按规 定条件反应.结果:样品管,阴性对照管全部为阴性,阳性对照管, 供试品阳性对照管全部为阳性. 3讨论 供试品干扰试验,5种不同批号样品的细菌内毒素检查和供试 氧氟沙垦对TAL无干扰作用.细菌内 品家兔法热原对照试验表明, 毒素检查法具有快速,准确,经济,操作简便等优点,因此,用它代 替家兔法对氧氟沙星注射液进行热原检查是可行的. 参考文献: 『11国家药典委员套.中华人民共和国蓟典(二部1【M】北京:他学工业 出版社.20o0:712.附录86. (收稿日期:2001—03—06:修回日期:2001—06—06) 精密吸取样品2mL,置100mL量瓶中,加承稀释至刻度,摇匀,经过多次实践,本研究的定性,定量分析,重现性好,可作为本 精密吸取5mL,置25mL量瓶中,加水lmL,摇匀,照标准曲线制备制剂的质控方法. 项目下的方法,自加"5%亚硝酸钠溶掖lmL"起,依法测定吸收度,参考文献: 计算总黄酮含量,结果觅表2【11栈广鸿t王囊.王永度止哇服液的工艺也化研充【lJ_中画药房, 3讨论2000,11(5):21 31因本制剂中的扛板归,侧柏叶,鱼腥草均含有黄酮类化台物., 故以总黄酮的含量作为考察依据 3.2本研究中对马兜铃的薄层色谱鉴别,斑点清晰,分离较好.笔 者曾试图对制剂中鱼腥草的挥发油进行薄层鉴别,但效果不好,可 能与工艺中鱼腥草没有单独提取挥发油有关. 58 2】中华人民共和国卫生部药典喜员套中华人民共和国药典(一部)IM1 北京:广东科技出版社,化学工业出版社,19951604. 3】江苏新医学院中药太辞典【M】上海:上海科枝出t~t:O-1991:869 13751439. (收稿日期:2001—04—10:修回日期:2001一o9—18) 中国药业ChinaPharmaceuticals