8b免疫治疗卵巢上皮性癌的动物实验研究

班，具体日期另行通知。会议主要面向妇产科 医师、病理医师，突出临床与病理联系的特点。会议将邀请 国内外知名妇产科病理学专家对相关学术领域的热点问题 作学术和举行形式多样的学术交流活动。欢迎妇产科 病理学同道踊跃参加。参会者将获得国家级继续教育学分 9分[项目编号：2009-05-03-031(国)]。现继续征文。(1)征 文内容：近年妇产科疾病及肿瘤研究进展；近年病理工作中 的新技术、新方法及体会；妇产科肿瘤基础和病理方面 的研究；妇科肿瘤领域热点和争议问题的讨论；提供妇产科 ．消，息． 临床病理讨论疑难病例。(2)征文要求：凡未在全国性学术 会议及全国性公开刊物上发表的论文均可投稿。论文稿件 请按文题、单位通信地址、邮政编码、作者姓名、正文的顺序 编排。论文摘要1份，500—800字，应包括研究目的、方法、 结果、结论4个部分，文责自负。请将论文以Word通过 Email发送至wuweiwei926@gmail．com；并将打印稿l份寄至 四川省成都市人民南路三段20号四川大学华西第二医院病 理科伍韦韦收，邮政编码：610041(信封上请注明：“第十届妇 产科病理学术会议征文”字样，恕不退稿)，截稿Lt期：2010 年3月30日。联系电话：028-85503875伍韦韦、杨开选；或 010-66939438刘俊杰。 研究证实激素治疗与卵巢癌的相关性 一项在丹麦进行的大规模观察性研究显示，采取激素替 代疗法的女性患卵巢瘤的危险增加。使用激素一年，每 8300名妇女中就会增加约1例卵巢癌患者。 该研究于1995年启动时，共纳入了约l百万名年龄≥ 50岁的妇女。随访8年后，3068名受试者患上了卵巢癌，其 中绝大多数为上皮癌。与从未接受过激素治疗的妇女相比， 当前以任何途径接受任何一种激素治疗的妇女患上卵巢癌 的相对危险为1．38(95％可信区间为1．26～1．51)。研究者 分别对单纯雌激素治疗和雌孕激素联合治疗进行了观察。 他们还考虑到了口服、经皮、经阴道等给药途径的不同，以及 ．国外简讯． 持续性和周期性给药等给药方案的不同。所有这些都与卵 巢癌的发病危险增高相关，且彼此之间几乎没有差异。这种 增高的危险在治疗结束后仍可持续2年左右。 研究者认为，如果这种相关性具有因果关系，那么，8年 随访期间全丹麦有140例卵巢癌是由激素治疗导致的。虽 然这种增高的危险实际上并不大，但是医生在决定是否给予 激素治疗时仍应将其考虑在内。 (本文刊载于《英国医学杂志中文版》 2009年第12卷第5期) 万方数据 化疗后淋巴细胞减少期肿瘤疫苗免疫治疗卵巢上皮性癌的动 物实验研究 作者： 李奇灵， 王运萍， 高尚风， 马军， 冯彩霞， 王月玲， LI Qi-ling， WANG Yun-ping ， GAO Shang-feng， MA Jan， FENG Cai-xia， WANG Yue-ling 作者单位： 西安交通大学医学院第一附属医院妇产科,710061 刊名： 中华妇产科杂志 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF OBSTETRICS AND GYNECOLOGY 年，卷(期)： 2009，44(11) 引用次数： 5次 参考文献(9条) 1.Antony PA.Paulos CM.Ahmadzadeh M Interleukin-2 dependent mechanisms of tolerance and immunity in vivo 2006 2.Ghiringhelli F.Menard C.Puig PE Metronomic cyclophosphamide regimen selectively depletes CD_4~+ CD_(25)~+ regulatory T cells and restores T and NK effector functions in end stage cancer patients 2007 3.Taieb J.Chaput N.Schartz N Chemoimmunotherapy of tumors:cyclophosphamide synergizes with exosome based vaccines 2006 4.刘荣军.郑秀娟.熊思东 小鼠淋巴细胞减少症模型的建立及其免疫学意义[期刊论文]-中国肿瘤生物治疗杂志 2006 5.李奇灵.王英.王运萍 GM-CSF基因修饰的卵巢癌细胞NuTu-19/GM-CSF的构建[期刊论文]-西安交通大学学报（医学 版） 2008 6.Voehringer D.Liang HE.Locksley RM Homeostasis and effector function of lymphopenia-induced " memory-like" T cells in constitutively T cell-depleted mice 2008 7.郑秀娟.张镭.林怡 紫杉醇与肿瘤疫苗联合应用对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤的治疗效果[期刊论文]-中国肿瘤生 物治疗杂志 2006 8.孙立新.孙立公.闫丽隽 卵巢癌化疗前后Th1和Th2类细胞因子的表达及意义[期刊论文]-实用妇产科杂志 2007 9.杨寿.许德明.何惠娟 卵巢癌患者外周血Th1/Th2细胞因子的变化趋势及其临床意义[期刊论文]-中国妇幼保健 2007(22) 相似文献(10条) 1.期刊论文 梁婧.荣凤年.李岩 树突状细胞与卵巢癌的免疫治疗 -国际肿瘤学杂志2008,35(8) 树突状细胞(DC)是目前发现的体内功能最强的专职抗原提呈细胞,可在体内外激活初始T细胞,并有效诱发细胞毒性T淋巴细胞反应,在抗肿瘤免疫中发 挥重要作用.近年来采用DC疫苗进行抗肿瘤治疗已成为肿瘤生物治疗领域的热点之一.DC抗肿瘤机制及DC疫苗在卵巢癌治疗中的应用等研究也取得了很大 进展. 2.期刊论文 彭晓梅.PENG Xiao-mei 卵巢癌的肿瘤疫苗治疗 -国际肿瘤学杂志2006,33(6) 肿瘤疫苗成为治疗卵巢癌的新方法之一.它通过肿瘤细胞或抗原物质刺激机体的主动免疫,诱导特异性细胞和体液免疫达到抗瘤目的,在目前的试验中 表现出了部分有效性、安全性和耐受性.现综述近年来有关卵巢癌的肿瘤疫苗治疗研究进展. 3.期刊论文 康玉.徐丛剑.刘惜时.张新华.吴超群.钟翠平.顾健人 可控性树突状细胞活疫苗产生抗卵巢上皮性癌免 疫应答的实验研究 -中华妇产科杂志2004,39(10) 目的研究可调控存活状态的树突状细胞(DC)活疫苗在体内产生的抗肿瘤免疫效应.方法 (1)将大鼠骨髓来源的DC与转导有自杀基因Ⅰ型单纯疱疹病毒 胸苷激酶基因(HSV1-TK)的卵巢上皮性癌细胞株NuTu-19细胞,以聚乙二醇法融合制成DC活疫苗.以流式细胞仪、共聚焦激光显微镜分析DC活疫苗的生物学 特性;RT-PCR技术、蛋白印迹法鉴定DC活疫苗中TK基因的表达;四甲基偶氮唑蓝比色法测定更昔洛韦(GCV)对DC活疫苗的杀伤效应.(2)在体内实验中,将大 鼠分为活疫苗组、活疫苗+GCV组、死疫苗组、DC+NuTu-19/TK组、GCV组和对照组.各组大鼠经二次免疫后,或以乳酸脱氢酶释放法检测脾T淋巴细胞的细胞 毒活性,或再给予NuTu-19细胞攻击后观察肿瘤的发生与生长情况.活疫苗+GCV组在给予NuTu-19细胞攻击后1周开始腹腔注射GCV,将疫苗在体内灭活.结果 (1)DC活疫苗高表达表面分子主要组织相容性复合物-Ⅱ类分子OX6、共刺激分子B7-2、整合素OX62和细胞间黏附分子ICAM-1,其阳性率分别为 (87.6±3.4)%、(71.1±9.3)%、(68.0±7.4)%和(77.1±2.0)%;DC与NuTu-19/TK细胞的融合率为(23±14)%;DC活疫苗中TK基因呈阳性表达.(2)活疫苗组大 鼠脾T淋巴细胞对NuTu-19细胞的杀伤活性为(61.8±8.3)%,明显高于死疫苗组的(26.0±3.8)%(P<0.05).与对照组相比,活疫苗组大鼠的肿瘤发生率明显降 低(分别为100%、80%),成瘤时间明显延迟[分别为(39±8) d、(70±16) d],肿瘤体积明显缩小[分别为(806±553) mm3、(89±53)mm3,(P<0.05].(3)活疫 苗+GCV组中仅有部分未与肿瘤细胞融合的DC存活,总杀伤率达73%.结论携带有自杀基因HSV1- TK的 DC活疫苗,在体内可产生明显的抗肿瘤免疫效应,并可 通过HSV1- TK/GCV系统调控其存活状态. 4.期刊论文 梁华茂.姜洁.孔北华.马道新.江森 白细胞介素12和共刺激分子B7-1联合修饰肿瘤细胞疫苗诱导抗肿瘤 免疫治疗的实验研究 -中华妇产科杂志2003,38(6) 目的探讨经白细胞介素12(IL-12)和共刺激分子(costimulatory molecule)B7-1基因联合修饰的肿瘤细胞疫苗诱导机体抗肿瘤免疫反应,对大鼠卵巢 上皮癌腹腔转移瘤的治疗效果.方法采用酶切、去磷酸化、连接、重组的方法,构建携带B7-1基因的逆转录病毒表达载体pLmB7-1SN ,以脂质体介导法,建 立高表达细胞株NuTu-19/B7-1、NuTu-19/IL-12及双基因联合表达细胞株NuTu-19/IL-12-B7-1,并以转染空载体pLXSN的细胞NuTu-19/Neo为对照组.观察各 组细胞在大鼠体内的致瘤性;将经丝裂霉素C处理的各组肿瘤细胞,以皮下接种方式免疫动物,观察其对卵巢癌腹腔转移大鼠模型生存期的影响,及对大鼠脾 淋巴细胞增殖及诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性的作用.结果本研究构建pLmB7-1SN成功.建立的NuTu-19/B7-1、NuTu-19/IL-12和NuTu-19/IL-12- B7-1细胞株中mB7-1和mIL-12稳定表达.与对照组细胞相比,各组肿瘤细胞在动物体内的致瘤性有不同程度下降.B7-1组[NuTu-19/BT-1(B7-1单独免疫)]和 IL-12组[NuTu-19/IL-12(IL-12单独免疫)]大鼠的脾淋巴细胞增殖指数(PI)分别为2.4和4.6,后者与对照组(PI=1.05)相比,差异有显著性(P<0.05),而联合 组[NuTu-19/IL-12-B7-1(IL-12+B7-1联合免疫)]PI为10.2,与对照组和B7-1组、IL-12组相比,差异有极显著性(P<0.01).诱导CTL杀伤活性的作用,B7-1组 (15.0%)和IL-12组(31.5%)明显强于对照组(2.6%)(P<0.05,P<0.01);而联合组(52.4%)与对照组、B7-1组及IL-12组相比,差异均有显著性(P<0.05).B7-1组 或IL-12组荷瘤动物生存期均有所延长(分别为56.2 d和59.8 d),但与对照组(53.4 d)相比,差异无显著性(P>0.05),而联合组(66.0 d)与对照组相比,差异 有显著性(P<0.05). 结论 IL-12和B7-1联合制备的肿瘤细胞疫苗,通过刺激CTL增殖、成熟和增强CTL对肿瘤细胞的识别及杀伤活性,诱导机体抗肿瘤免疫 反应, 对提高卵巢癌的治疗效果具有重要意义. 5.期刊论文 昌晓红.崔恒.冯捷.杨文兰.李艺.付天云.叶雪.祝洪澜.程洪艳.成夜霞.郭惠方.CHANG Xiao-hong.CUI Heng.FENG Jie.YANG Wen-lan.LI Yi.FU Tian-yun.YE Xue.ZHU Hong-lan.CHENG Hong-yan.CHENG Yei-xia.GUO Hui-fang 卵巢癌6B11抗独特型微抗体诱导抗肿瘤免疫应答的体外实验 -北京大学学报（医学版）2005,37(5) 目的:研究6B11抗独特型微抗体在体外抗肿瘤免疫情况,探讨其作为卵巢癌疫苗的可能性.方法:分离人外周血单个核细胞,用6B11抗独特型微抗体刺激 并培养.采用3HTdR参入法、51Cr细胞毒实验分别观察淋巴细胞增殖情况和细胞毒作用,ELISA方法测定用6B11微抗体刺激后培养上清液中IFN-γ水平的变 化,流式细胞术检测微抗体刺激后淋巴细胞表型的改变.结果:6B11抗独特型微抗体可以刺激人外周血淋巴细胞的增殖,最佳刺激剂量为20 mg/L;并对 OC166-9表达阳性的卵巢癌细胞系有细胞毒作用;用6B11微抗体刺激后培养上清液中IFN-γ水平升高;淋巴细胞的表型表现为,疫苗刺激后CD3+的细胞明显 增高, CD4+的细胞也增加, CD8+的细胞增加不明显.CD4+/CD8+的比率明显增高,差异有统计学意义.结论:6B11抗独特型微抗体在体外可诱导机体产生特异 体液免疫和细胞免疫反应,为抗独特型微抗体疫苗的临床应用提供了一定的实验依据. 6.期刊论文 康玉.徐丛剑.刘惜时.吴超群.钟翠平.顾健人 DC融合瘤苗治疗大鼠腹腔播散性卵巢癌 -现代妇产科进 展2005,14(4) 目的:研究树突状细胞(DC)与卵巢癌融合的融合瘤苗对大鼠腹腔播散性卵巢癌的治疗作用,并观察其体内应用的安全性.方法:用聚乙二醇法将 Fischer344(F344)大鼠骨髓来源的DC与卵巢癌上皮细胞株NuTu-19细胞在体外融合制备融合瘤苗(DC-NuTu-19).流式细胞术检测DC-NuTu-19的免疫相关表 型.将DC-NuTu-19接种于F344大鼠皮下,观察它在体内的成瘤性.用乳酸脱氢酶释放法检测经过DC-NuTu-19免疫的大鼠脾细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对NuTu- 19细胞的杀伤作用.复制腹腔播散性卵巢癌的F344大鼠模型,观察DC-NuTu-19对它的治疗作用.结果:DC-NuTu-19高表达主要组织相容性复合物-II(MHC- II)分子OX6、共刺激分子B7-2、细胞间粘附分子ICAM-1和大鼠DC的标志性抗原整合素OX62.与NuTu-19相比,DC-NuTu-19在大鼠体内成瘤率降低,成瘤时间 延迟,两组平均瘤重具有统计学差异(P<0.05).经DC-NuTu-19免疫的大鼠脾CTL对NuTu-19细胞的杀伤活性显著增高(P<0.01).与对照组相比,经DC-NuTu- 19治疗后大鼠的病情发展速度减缓,生存期明显延长(P<0.01).结论:卵巢癌DC融合瘤苗能显著提高大鼠CTL杀伤活性,诱导高效而特异的抗卵巢癌免疫效应 ,延长患有腹腔播散性卵巢癌大鼠的生存时间. 7.外文期刊 Reinartz.S.Boerner.H.Koehler.S.Von.Ruecker-A.Schlebusch.H.Wagner.U Evaluation of immunological responses in patients with ovarian cancer treated with the anti-idiotype vaccine ACA125 by determination of intracellular cytokines--a preliminary report. In a first clinical trial, 45 patients with advanced ovarian carcinoma and recurrences were treated with the murine monoclonal anti-idiotypic antibody (Ab2) designated ACA125 for active immunotherapy. The monoclonal antibody (MAb) ACA125 mimics a specific epitope of the tumor-associated antigen CA125 expressed by most malignant ovarian tumors. Patients with CA125-positive tumors are immunologically tolerant to CA125, which could be overcome by the use of an anti-idiotypic antibody as a surrogate for the tumor antigen CA125. An immunological response to the anti-idiotype ACA125 in these patients was associated with a statistically significant survival prolongation. Humoral immunity to ACA125 was assessed by induction of anti-anti-idiotypic antibodies (Ab3) directed against CA125. Using flow cytometric detection methods we observe alterations of the intracellular cytokines IFN-gamma, IL- 2, and IL-4 at the single-cell level during the course of immunization. There was a strong increase of intracellular IFN-gamma and IL-2 characteristic for a Th1 cell type immune response after treatment with ACA125. A delayed induction of Th2 type response, which promotes antibody-mediated immunity by B cells, could also be detected. The understanding of the kinetics of Th1 and Th2 responses could be important to improve treatment schedules for effective immunotherapy with anti-idiotype vaccines. 8.外文期刊 Dorigo.O.Shawler.DL.Royston.I.Sobol.RE.Berek.JS.Fakhrai.H Combination of transforming growth factor beta antisense and interleukin-2 gene therapy in the murine ovarian teratoma model. The immunosuppressive protein transforming growth factor beta (TGF-beta) inhibits the activation of various immune effector cells including cytotoxic T lymphocytes and may therefore inhibit the efficacy of immunostimulatory interleukin-2 (IL-2) gene therapy. In this study, we investigated the effect of TGF-beta downregulation on IL-2 gene therapy in the intraperitoneal model of murine ovarian teratoma (MOT). MOT cells, like many human ovarian carcinomas, were found to produce TGF-beta. Production of TGF-beta by MOT cells was suppressed using a TGF-beta antisense plasmid vector (pCEP4/TGF-beta antisense). Subcutaneous immunization of C3H mice with a mixture of IL-2 gene-transduced fibroblasts and TGF-beta antisense-modified MOT cells induced significantly better protection against a subsequent intraperitoneal tumor challenge compared with immunization with unmodified MOT cells alone [11/16 (69%) vs 4/21 (19%) tumor-free animals, P < 0.01]. Immunization with either a mixture of IL-2 gene modified fibroblasts and unmodified MOT cells [2/12 (17%) tumor-free animals] or TGF-beta antisense-modified MOT cells alone (0/13 tumor free animals) failed to induce significant protection compared with immunization with unmodified MOT cells. These data show that combined TGF-beta antisense and IL-2 gene therapy is required to generate effective antitumor responses in the MOT model. Our findings suggest that tumor cell expression of immunosuppressive factors may inhibit cytokine immunogene therapy and may have potential implications for the development of future clinical immunogene therapy protocols. Copyright 1998 Academic Press. 9.外文期刊 Galili U.Chen ZC.DeGeest K Expression of alpha-gal epitopes on ovarian carcinoma membranes to be used as a novel autologous tumor vaccine. OBJECTIVE: Poor presentation of tumor-asso