微生物综合实验

nullnull植物根际促生菌筛选与促生作用的初步验证 人：郭丹丹 延安大学生命科学学院微生物综合试验答辩null背景 植物根际促生菌是从植物根部分离出的微生物,借助其代谢过程或代谢产物,以改善植物生长条件,尤其是营养环境。如固定空气中的游离氮,参与土壤中养分的转化,增加有效养分,分泌激素,刺激植物根系发育,抑制有害微生物活动等。农业生产中大面积应用化肥、农药提高作物产量的同时,也产生了极大的环境问,并且使生产成本提高。随着现代生物科学技术的进步,人们对应用微生物来代替化肥和农药寄予了厚望,从而对植物与根际促生菌关系的研究给予了高度重视。null实验目的 通过采集植物根部及层土壤来收集和筛选具有解磷、解尿素，固氮的混合细菌群，并初步验证其对玉米的促生作用。实验步骤实验步骤1.筛菌： 根际采样 悬液配置 培养基的制作 筛选 2.验证实验： 分别作用于长势相同的玉米苗，相同条件下一段时间后，观察 ，测量，称重。设置对照组 null实验材料与方法 材料： 文汇山，延安大学周边等地生长良好的植物根部土壤及其植物根 （枣树，草坪等） 。玉米种子（任宽提供）。 培养基： 蒙金娜无机磷培养基:葡萄糖10g，(NH4)S04 0.5g，NaCI 0.3g，KCI 0.3g，FeSO4·7H2O 0.03g，MnSO4·4H2O 0.03g，MgSO4·7H2O 0.3g ，磷矿粉（ca3(po4)2）10g，蒸馏水1000ml，琼脂20g ， pH7.0-7.5。 无氮培养基：甘露醇（或葡萄糖）10g，磷酸二氢钾0.2g，七水合硫酸镁0.2g，氯化钠0.2g二水合硫酸钙0.2g，碳酸钙5g，蒸馏水 1000mL，pH7.0—7.2。 分解尿素培养基：KH2PO4 1.4g，NaH2PO4 2.1g，MgSO4·7H2O 0.2g，葡萄糖10.0g，尿素1.0g ，琼脂15.0g，蒸馏水1000ml ，pH7.0-7.4。 null实验材料与方法 根际土壤悬液的制备： 将采集的带根土样用小刀把根外大部分的土块去除，将根系从土壤中取出，轻轻抖动除去散松的附在根上的土粒，将采取的土壤和根放在无菌袋中迅速带回实验室，制成根际土壤悬液。 称取5.0g根系，放入盛有100毫升无菌水的三角瓶，震荡约15分钟，洗下的土制成根际土悬液。 菌液的制备及促生验证： 用接种环取无机磷培养基和尿素培养基中的菌落各5环于装有5ml无菌水的两个试管中震荡，无氮培养基的固氮菌采用移液枪吸取上清0.2ml加到4.8ml试管混匀。将三试管菌株各自进行高倍稀释至10-5，保存备用。 挑选质量，大小，形态基本相同的玉米种子若干，进行萌发。取7个三角瓶各加入150g灭过菌的土壤，待种子萌发后将玉米种在三角瓶中，并编号(A~G)各三瓶做重复实验。按照菌液浓度递减给A~F号加三种菌液，每次各1ml。G号加无菌水对照。连续培养21天。 实验结果与实验结果与分析1.根际解磷，解尿素，固氮混合细菌的筛选 用选择培养基筛选所采集的枣树根际土壤中的解磷，解尿素，固氮的混合细菌，获得在无机磷培养基上能产生溶磷圈的细菌，说明这些细菌具有解无机磷的能力； 在分解尿素培养基上生长旺盛的细菌，说明这些细菌具有解尿素的能力； 在不含氮的培养基上能够生长，说明这些细菌具有固氮能力。实验结果与分析实验结果与分析2. 三种菌混合作用对玉米生长的作用 经过28天的培养，测定到玉米的生长情况如下：null株高，茎粗，湿重分别经t检验得出本次试验加了三种混合菌的植株与没加菌的植株有极显著差异，添加了固氮，解磷，解尿素的混合菌群有明显的作用效果。null编号顺序为G,F,E,D,C,B,A.nullnullnull后续展望后续展望这些有促生作用的细菌的分离，鉴定，生理生化特征及促生机制都有待进一步深入研究。 将这些微生物制成土壤元素活化剂用来提高植物元素利用率 利用这些细菌之间的协同作用使植物更好的生长运用于农作物 本实验由于很多实际因素影响，不足之处，还请见谅。null谢谢实验小组成员： 赵沁方（组长） 谢路 侯芒芒 白腾飞 吴波 王红芳 郭小慧 郭丹丹 张雪艳