常用的急性肝损伤动物模型

中国病理生理杂志 , · · 实验技术 · 常用的急性肝损伤动物模型 新疆昌吉州卫生学校药理教研室 昌吉市 。。 徐 苹 刘华屏 劳 在我国 , 肝炎是一种常见病 。 建立实验性 肝损伤动物模型 , 是筛选保肝药所必需的 , 对 于研究肝病的发病机制和药物的作用原理亦很 重要 。 为方便读者根据不 同的实验 目的 , 选择 合适的动物模型 , 我们将近年来国内外常用的 几种急性实验性肝损伤动物模型介绍如下 。 模 型 建 立 方 法 一 、 四氯 化碳 性 肝损伤 给大 鼠以 原液 腹腔注射“ ’。 后 既可测定相关指标 , 比如 、 血清肝胆酸 、 苯胺经化酶等 。 其中 的升 高有明显的量效关系 , 该指标的变化敏感 、 稳 定 , 重复性好 , 而且对于中毒性肝损害有一定 的特异性 。 所以 可 以反映肝损 害的严重 程度 , 对于确定病 因 、 判 断 预 后有一定的帮 助 。 此模型比较常用 , 能准确反映肝细胞的功 能 、 代谢及形态学变化 , 重复性好 、 经济 。 但 同时还 损害动物的心 、 脾 、 肺 、 肾 、 脑 等器官 。 另外 , ‘ 蒸 气和 液 体 可 由呼吸 道 、 皮肤吸收 , 故对人体也有一定的毒性 , 操 作时应注意 。 二 、 一氨基半乳糖 一 , 性肝损伤 给大鼠以 一 一 或 加内毒素 ‘”一次性 腹腔注射 。用 一 扒 制备的大鼠肝损伤模型其 肝脏组织病理学改变和生物化学的变化均与人 类病毒性肝炎极为相似 , 也能发展为肝性脑病 其敏感性比小鼠强 , 只要给药剂量掌握恰当 , 其可逆性和重复性均较好 。 而且 一 肝毒 性的专一性较其他肝毒物为佳 , 对实验人员也 安全无毒 。 因此 , 一 肝损伤模型是目前 公认的比较好的研究病毒性肝炎的发病机制及 有效的治疗药物的实验动物模型 。 三 、 醋氨酚 , 性肝损 伤 给小鼠以 一次性腹腔 注射‘” , 后测定相关指标 。 发现 引起肝 细胞内还原性谷胧甘肤 含 量 呈 剂量 依赖性减少 , 丙二醛 含量 明显增加 。 用 制备的肝损伤模型不及 ‘ 和 一 肝损伤模型常用 。 四 、 免疫 复 合 物 性肝损伤 给兔 以 纯化的蛋清白蛋白 皮下注射 , 使 其 致敏后再给 以耳缘静脉缓慢注射此蛋白 , 选 后可出现肝 小叶非中心性的局 限性坏死 , 坏死可由累及数 十个肝细胞到整个肝小叶 , 严重时可 出现凝固 性肝坏死“ ’。 五 、 缺血性肝损伤 剪断大鼠肝左侧叶韧 带 , 结扎肝蒂 , 阻断血流灌注 。 后 即建立 起 大鼠活体肝缺血实验模型‘ ’。此操作方便 , 并可保存其它肝叶的进出血流 。 本模型比常用 的全器官缺血肝一 门阻 断 法有一定的优点 。 比 如 无门静脉系统奈血 , 不需附加门静脉减压 术 无侧支血管供 血 的 影响 。 肝门血流阻断 后 , 肝脏还有来 自肝幅韧带 、 肝胃韧带和肝十 二指肠中细小血管供血 。 本实验将 个肝叶的 韧带完全剪断后将其肝蒂结扎 , 避免了侧支血 管供血的影响 可对缺 血肝组织病理改变进行 动态观察 , 以更准确地评价肝细胞对缺血的耐 受能力 , 因仅 个肝叶缺血 , 虽该肝叶在体内 缺血坏死 , 但动物仍存活 另外 , 本模型复流 后动物无血压与酸碱平衡改变 。 六 、 缺血 再灌注性肝损伤 采 用 常规手 术方法游离家兔或大鼠肝左侧叶 、 左中央叶 、 右中央叶的血管及胆管 , 用血管钳一并夹闭 , 阻断肝血管和胆管 后复流 , 即取下血管 钳见肝颜色转红即为再灌注 也可间断阻断肝 血流 复流 , 共 次 , 最后一次复 朴 北京医科大学药理教研室 · 流 。 分别于不 同 时 间自肝左侧叶行肝活 检 , 测定 含 量 及观察血清相关指标变 化 。 结果表明间断肝血流阻断动物 术 后 存 活 率提高 , 肝损伤程度较轻 。 此模型用于临床肝 脏手术方法的实验研究 。 讨 论 肝细胞损伤是多种因素如毒物 、 、 、 的中间产物与大分子物质共 价结合 、 缺氧 、 脂质过氧化 、 细胞内钙稳态失 调和内毒素相互作用 的 结 果 , 而非单一的作 用 。 肝损 伤的机制可能是由于其在肝细 胞内经微粒体酶和细胞 色素 催化生成三 氯甲基 自由基 二 , 二自发地再丢失 一个氯 , 形成一种氧化能力很强的代谢中间产 物碳烯 , , 与 形成配体复 合物 , 使细胞色素 一婆 失去了正常 的混合功 能氧化酶的活性 , 细胞膜内饱和脂肪酸的比例 增加 , 膜流动性降低 , 稳定性也降低 , 从而破 坏了胞浆内的 , 稳态 , 使可逆性损伤转为不 可逆性损伤 。 大 剂量 ‘ 中 毒 时 , 内皮素 的释放可能与肝细 胞坏死的发 生 、 发展有关 。 一 引起的肝细胞损伤以 往认为其机制是 一 在细胞内与 结合 , 形成复合物致使 耗竭 , 和蛋白质合 成障碍 , 最终导致肝细胞坏死 。 近年的研究表 明 , 一 引起肝细胞内 , 十 增多 , 减 少 。 , 增多会抑制线粒体的呼吸功能 , 激活 磷脂酶 , 分解膜磷脂 , 破坏溶酶体膜 , 使蛋 白 水解酶释放 , 并使黄嚓吟脱氢酶转化为黄嚓吟 氧化酶 , 加速氧 自由基的产生 , 从而使肝细胞 损伤进一步加剧 。 而 , 十 是 合成 、 利用 的必需辅助因子 , 是 忆 忆 酶的重要组 成部分 。 因 此 丫 , 十 的 比例失调可能是 一 导致肝细胞不可逆损害的重要因素之 一‘” 。 有学者发现 , 一 与内毒素对肝脏 的损害有相互增强或协同作用 , 棍合使用非致 死剂量的 一 与内毒素可发生暴发性肝衰 竭 , 死亡率高达 。 而 引起的 肝损伤则因 剂量过大时 , 经 细胞色素 一 代谢形成的亲 电活 性产物增多 , 使肝细 胞内的 被耗竭 , 代谢产物便与肝细胞内大 分子物质如蛋白质等发生共价结合 , 引起肝细 胞膜脂质过氧化 , 最 终 导 致 肝 细 胞变性坏 死 ’, 。 免疫复合物引起的肝细胞局限性坏死是一 种继发于抗原 、 抗体结合后的反应 。 因为免疫 复合物有细胞毒作用 。 而肝 小 叶 内的血液丰 富 、 血流缓慢 , 表面积大 , 有利于抗原 、 抗体 的充分结合“ , 。 肝缺血引起的组织损伤在复流后加剧 , 目 前多数学者认为与氧 自由基有关 。 缺血使线粒 体呼吸链功能失调 , 氧被非四价还原 , 生成活 性氧 自由基 缺血还使嗓吟核昔酸分解为次黄 嗓吟 , 同时黄嗓吟脱氢酶转化为黄嗓吟氧化酶 。 再灌注时 , 次黄凛吟在黄嚓岭氧化酶的作用下 转化为尿酸并产生大量氧 自由基 。 引起细胞及 亚细胞膜结构和功能损害 。 参 考 文 献 孙步祥 , 周炯亮 。 四氯化碳中毒性肝损害诊断 指标探讨 职业医学 , ’ 张帆 , 王家验 , 袁顺玉 , 等 。 急性肝损伤与肝 脏水 、 电解质及能量代谢的 关 系 。 中华消化 杂志 , 。 , , , 卜 吐 , 。 , 。 吕诗涛 , 王成恩 , 曹绣虎 , 等 。 激素对缺血肝 细胞保护作用的研究 中 华 实 验 外 科 杂志 , 年 月 日收稿 , 年 月 日修 回