维生素D3 的实验测定方案
维生素D3 的实验测定方案
改进地方:不经净化步骤,直接上机检测。
实验步骤;
1:称样5g,加入1g淀粉酶,加入45-50摄氏度的水50ml,混匀,于60摄氏度的培养箱内培养30min。
2:取1.000ug/ml的VD3标准品储备液5.00ml于瓶内,做回收率实验。
3:将1,2中样品加入100mlVC的乙醇溶液,加入25mlKOH的水溶液,混匀,于53摄氏度下恒温避光震荡45min,
4:用200ml石油醚萃取其中组份,分两次萃取,每次加100ml,合并石油醚液。水洗三次,上清液倒入250ml锥形瓶内待用。
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维生素D3 的实验测定
改进地方:不经净化步骤,直接上机检测。
实验步骤;
1:称样5g,加入1g淀粉酶,加入45-50摄氏度的水50ml,混匀,于60摄氏度的培养箱内培养30min。
2:取1.000ug/ml的VD3标准品储备液5.00ml于瓶内,做回收率实验。
3:将1,2中样品加入100mlVC的乙醇溶液,加入25mlKOH的水溶液,混匀,于53摄氏度下恒温避光震荡45min,
4:用200ml石油醚萃取其中组份,分两次萃取,每次加100ml,合并石油醚液。水洗三次,上清液倒入250ml锥形瓶内待用。
5:用25ml容量瓶分两次放入氮吹仪上,全部挥干,共50ml。
6:加入5.00ml甲醇,混匀,0.2um滤膜过滤,上机测试。进样量200ul。
所需用品:
250ml锥形瓶:18个
温度计:1个
勺子:3个
烧杯:1000ml:3个
恒温培养箱,恒温振荡器,混匀器各1个
5ml移液枪,
100ml量筒两个,25ml量筒一个
500ml分液漏斗:4个
50ml玻璃注射器:9个
10ml容量瓶:9个
钙片,多维片极细粉每种至少15g
淀粉酶
VC
KOH
石油醚
甲醇
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