刺五加中游离型和结合型异岑定皮的高效液相色谱法研究

刺五加中游离型和结合型异岑定皮的高效液相色谱法研究 刺五加中游离型和结合型异岑定皮的高效 液相色谱法研究 田3口服AF一53种村型药时曲线 ?3Dr鼎Mo?ce曲讲Itimeof3AF一5 ?aftero恺Idm口m_啪 1.橐己懈毗咯垸舅(PvP)2.聚乙烯蓖 麻油(cMP)3卵磷脂(比cI) 从药一时曲线可以看出LECI剂型出现2个峰 值,CMP与PVP剂型在高峰值后也出现有小的波 动.根据综合因素(制剂原料的致敏性,分离分析 的稳定性等)分析,确定以PVP作为配制AF一5 的制剂. S讨论 s.1抗焦虑药AF一5是亲脂性化合物,提取分离 时有一定难度.我们比较了圃相萃取,单一溶剂提 取(乙醚,环己烷,正己烷),混台溶剂提取(二 氯甲烷:正己烷,环己烷:正己烷,石油醚:正己 烷),最后确定含有一定比例石油醚的正己烷为最 优选择,AF一5及内标正二十一烷均能很好地溶 解,分离,且无杂质干扰,有较好的回收率.5.2 比较使用过的毛细管柱,发现含键合固定相5% 苯基的甲基聚硅氧烷的弱极性柱结果较好,其中 DB一5型号的0.25p.m的涂层柱,在分析测定AF 一 5时,柱效较高,杂质滞留率低. 5.3本文中所建立的血浆中抗焦虑药AF一5的分 析,特异性强,灵敏度高,用血量少,重现性 符合要求,方法简便易行.已应用于大鼠的血浆药 动学测定. 致谢:感谢预防医学科学院营养与食品卫生研究所赵云峰 教授及Finnigan公司韩杰先生在我们的工作中给予的帮助! 参考文献 -YANGJ一日h且n(橱峻山).CHENY(陈玉武)Stu.Keg 0Ilthe~mtltuentsofAq,a~-i,slnen~s(【,.)aI.Id? andstcnl弛elucidationofr?0口wndDshydrol~mu—xinol(国产 沉香化学成分的研究.?白术瞢群和去董白术番尊的分青和 结{勺)dPhermSinlea(药学学报).1986:21(7):516 (inChin~) (本文于2001年1月5曰謦硅回) 刺五加中游离型和结合型异丰岑皮定的高效液相色谱法研究 周国平钟瑞键匡佩琳龙新华 (江西省药品检验所南昌330o46) 捕耍目的:建立刺五加药材中异辫皮定含量测定方法方法:采用PhenomenexC..柱.乙蔚一005mol?L礴酸二氢钾 (22:78)为藏动相,流速0.9mL-rain,.检测波长344illr[i.靖果}游离型和结合型异榉皮定加样回收率分别为98.8%和 102.5%,RSD分别为2.3%和2.9%(?=5).结论}方法简便.结果准确可靠. 美?词刺五加游离塑和结合型异辫皮定高教液相色谱法 一目呈’?0口县?_8?占—I耘- 药物分析杂志 StudyonDeterminationofFreeandCombinedIsofraxidinin RadixAcanthopanacisSenticosibyHPLC ZHOUGuo—ping,ZHONGRui—jJan,KUANGPel—lingandLONGXin—hua :,jang,inm？’l,tittae C’,,n,ro1.Na,hang330046) AbstractObjec~ves:Amethodofdetermination0ffmeanbdcombinedisofraxidlninRadixAcanthopan acisSenticosi isdeveloped.Method:PhenomenexCcdtmanwasused,acetonitrile--0.05md’Lpotassiumdihydrogenpll08- phatesolution(22:78)asmobilephase(aflowrateof09m1-rain)anddetectedat34411111.Rtnadt:Them eal’l recoverieSoffreeandcombinedisofraxidlnwe988%aFl(11025%RSDre23%and2.9%(/7.:5)respec. ti~,elyCondition~.Themethodisrapid,simpleandiable KeywordsRadixAcanthopanacisSenticosi,freeandcombinedisofraxidin,HPLC 刺五加为五加科植物刺五加Acmtthopanacsenti. cE.qUS(Rupr.etMaxim.)}的干燥根及根茎, 具有益气健脾,补肾安神之功效.收载丁中国药典 2000年版一部,异榉皮定(Isofr~xidin)为其主要有 救成分？.刺五加药材中异榉皮定以游离型和结台 型的形式存在,而结台型主要为刺五加苷B等 本实验研究以异栲皮定为指标,测定其游离型和结 合型的含量,建立含量灏j定方法. 1仪器与试药 HP1100高效液相色谱系列:在线脱气机,四 元泵.1100色谱工作站.CQF—I一6超声波清洗 器. 乙腈为色谱纯:水为去离子水;其它试剂均为 分析纯. 刺五加样品l,2,3(市售)经本所乇汉章副 主任药师鉴定,样品4为中国药品生物制品榆定所 提供的对照药材.异榉皮定对照品由中药品生物 制品检定所提供. 2色谱条件 色谱柱为PhermmenexC1R柱(4-6mm×150mm, 5uri1),流动相:乙腈一0.05rnol?L磷酸二氢钾 (22:78),流速:09mL?min,,检测波长:344 nm;进样量:20.在本色谱条件下.色谱图见 图1结果表明,异枵皮定能与样品中其它成分获 得很好分离,可用于定量分析. 3方法学试验 3.1线性关系精密称取异卡岑皮定对照品10.0mg 置100mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇 匀;再分别精密吸取05,1,2,3,4.5mL置lO mL量瓶中,甲醇稀释至刻度,摇匀.分别精密吸 取各溶液20止,注人色谱仪,测定峰面积.以进 样量()为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制 DClC,mjn 田I色谱田 FigIHPLCehromatogr~ A对照品fmfem~eH啪)B游离型成分的样品(Free sample)c薛量游离型+结台型成分样品(tetsd[teeand ~omblnedsample) l异皮定(I~fraxidinJ 曲线,回归方程为: Y:3006+25r=09999 表明异榕皮定在01—1gg之间呈良好的线性. 3.2精密度和稳定性试验对同一浓度的样品溶 液和对照品溶液,连续进样5次,以异卡岑皮定的峰 面积计算,RSD分别为06%和09%.每2h进 样,样品峰面积基本不变,溶液在24h内稳定. 3.3重现性试验称取样品粉末约2g,精密称 定,共取5份,按样品测定项下方法提取,测定. 测得游离型异卡岑皮定和结合型异丰岑皮定的平均含量 分别为49,3和23.6?g,,RSD分别为16%和 3.1%(n=5). 3.4样品测定 3.4.1游离型异棒皮定样品溶液制备取本品粉 末(通过3号筛)约2g,精密称定,加甲醇5O mL,超声提取lh,滤过,滤渣用少量甲醇洗涤2 次,合并滤液和洗液,蒸干,残渣加水20mL加热 使溶解,定量转移至分液漏斗中,加氯仿提取4 次,每次20mL,合并氯仿液,蒸干,残渣加甲醇 溶解,转移至10mL量瓶中.加甲醇稀释至刻度, 摇匀,用0.5um滤膜滤过即得所需溶液. 3.4.2异{举皮定总量样品溶液制备按”3.41” 项下操作至”合并滤液和洗液”,将此液置圆底烧 瓶中,回收溶剂,残渣加2.5mol?L硫酸20mll, 置沸水浴中加热回流2h.稍冷,加氧仿20mll, 继续回流0.5h,将水解液转移至分液漏斗中,收 集氯仿液,酸液再用氯仿振摇提取3次(每次20 mL),合并氯仿液,继续按”3.4.1”项下操作,制 得所需溶液. 取lO?nlL对照品溶液和上述2种样品溶液 各20L进样,按外标一点法计算样品中游离型异 棒皮定的含量及异棒皮定总量,并由异栲皮定总量 减去游离型异棒皮定求得结合型异棒皮定含量,结 果见表1. 3.s加样回收试验精密称取已测知含量的样品 lg,精密加入异棒皮定对照品20g和40g.分 别按游离型异棒皮定和异棒皮定总量样品溶液制备 方法操作,并进行色谱分析.结果游离型异棒皮定 和结合型异棒皮定的平均回收率分别为98.8%和 102.5%,RSD分别为2.3%和29%(n=5). 裹1样品测定结果 Tmb1Resu~时DeterminationI/it=5l 蛩异幸筝皮定结台型异棒皮定 样品号里竺!时少量盐酸被氯仿提出实验表明水解2h即可 将结合型异棒皮定完全水解;同时考察了氯仿提取 l,6次的含量,测定结果表明提取4次后异棒皮 定基本提尽. 4.3本次实验仅对市售药材进行了测定,至于不 同产地,不同采收季节药材的含量测定有待进一步 研究. 参考文献 1W.43qG,ian？{王建晶).WANGHe—Pin8(王和平).SONG .fie(米杰),Determinationofl~fraxidininuMi且n啪Iliquid byTLCS(利眠口服液中异辜皮啶薄层扫描测定)Chin』B MedForm{中国实验方荆学杂志),1996,2(4):5 2XUGuo—J-一兀(徐国钧),XUL呻一shah(徐珞琚)HEH.?g一 蛐(何宏贤),d.ch仳【Materi~s(中国药材学1 Beiji~g(北京):cnScience且ndTer.h.ologyPresB(中国科技出 版社)I996301 3ChP(中国药典)200oVol1(一部):165 4CAOHong(曹红)啪Yu玎(刘云).?田-0f?’ efno击goniMuhifloriPlamBandfom”kindsof,qsted日epat,~t medlci~s(反相高技淮相色谱法测定制首乌厦其4种中成药中 太黄素吉量)’n』PharmAmd(药橱分析杂志),1998,I8 (6):372 (车文于2OOO年5月29日收弱)