抗人球蛋白试验93839

抗人球蛋白试验93839 抗人球蛋白试验，又称Coombs’试验，是诊断自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的重要依据。 【参考值】正常人直接与间接试验均为阴性，Coombs’试验阴性有时并不能排除AIHA。 【临床意义】 直接试验是检查被检红细胞上有无不完全抗体，间接试验是检查血清中游离的不完全抗体。直接Coombs’试验较间接试验对AIHA更有诊断价值。用特异性单价抗血清可将AIHA分为三型:IgG,C3阳性，占67,;单独IgG性，占20,;单独C3性，占13,; 阳性结果 本试验阳性结果主要见于下列几种情况: 1.自身免疫性贫血，(IgG)型引起的溶血性贫血，本试验直接反应常呈强阳性，间接反应大多阴性，但亦可阳性。 2.药物诱发的免疫性溶血性贫血?α-甲基多巴型:直接及间接反应均阳性。?青霉素型:直接反应阳性，间接反应阴性，以上二型如以正常红细胞先与有关药物于37?培育后再加病人血清、间接反应均为阳性。?福阿亭型:(奎宁等药物)抗体通常为IgM，偶有IgG型者，直接反应为阳性，间接反应阴性，但如用IgG抗血清做试剂则结果大部分均为阴性，但如培育时加入新鲜正常人血清(供应补体)则结果为阳性。 3.冷凝集素综合征直接反应阳性，间接反应阴性(试验需在37?下进行)由于本病红细胞膜附着的是补体C4和C3而不是IgG或IgM，如果用抗IgG或抗IgM抗血清做试验时，则结果阴性，如以抗补体的抗血清做试验则直接反应阳性。 4.新生儿同种免疫溶血病，因Rh血型不合所致溶血病，直接及间接反应均强阳性，持续数周、换血输血后数天内可变为阴性，由于“ABO”血型不合引起的溶血病，结果常为阴性或弱阳性。 5.红细胞血型不合引起的输血反应，ABO或Rh血型不合输血，供者的红细胞被受者的血型抗体致敏，在供者被致敏的红细胞完全破坏以前，直接反应阳性，Rh阴性者如过去不曾接受过Rh阳性者的血或曾妊娠胎儿为Rh阳性者，间接反应阳性，如无上述接触，第一次输血后(Rh阳性的血)，数天之内间接反应也会变为阳性。 6.其它在传染性单核细胞增多症、SLE、恶性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、癌肿、铅中毒、结节性动脉周围炎、EVan氏综合征等，病人直接反应亦可阳性，阵发性寒冷性血红蛋白尿症患者中，急性发作后用抗补体血清做试验直接反应常为阳性。 【要求】 用肝素或EDTA抗凝血做直接Coombs’试验，血清做间接Coombs’试验。 抗人球蛋白试验 项目意义抗人球蛋白试验(anti human globulin test) 又: 称Coombs试验。 [临床意义] 1(正常人抗人球蛋白试验直接、间接试验均呈阴 性。 2(温抗体型自身免疫性溶血性贫血、新生儿同种 免疫溶血病常呈直接试验阳性反应。 3(自身免疫性溶血性贫血大多属于温抗体型(主 要为IgG)。但也有小部分属于冷抗体型(主要为IgM)。 故必要时应于4?条件下进行试验以检出其冷抗体，否 则会导致假阴性反应。 4(由于病人不完全抗体的性质不同,含量不一，以 及所用抗血清效价的影响，本试验的检出阳性率也不 致,故除用多价的抗人球蛋白血清进行试验外,必要时 需加用单价抗血清,以提出检出阳性率。 5. 间接抗人球蛋白试验主要检测病人血清中是否 有不完全抗体,常用于Rh或ABO型新生儿同种免疫溶 血病的母体血清中不完全抗体的检测验。因其敏感性 差，很少用于AI-HA的诊断。 6. 本试验阳性还可见于系统性红斑狼疮、类风湿 性关节炎、淋巴瘤、恶性肿瘤、甲基多巴及青霉素型 药物诱发性免疫性溶血性贫血等。 7. 本试验较易发生假性阴性反应。如:?试剂不 适宜;?自身抗体的解离常数高;?红细胞上所吸咐 的抗体浓度过低;?发病早期即已大量应用肾上腺皮 质激素。 1( 原理:温抗体溶血的自身抗体为IgG在AIHA的患者中，此抗体能与面附有相应抗原的红细胞结合，使红细胞致敏而不发生凝集，待加入抗人球蛋白血清(AHGS)后，则与红细胞上粘附的IgG相结合，使红细胞串并在一起而发生凝集，此即为直接抗人球蛋白试验(,,,)。患者血清中存在游离的自身抗体，则可用Rno(D)阳性的,型红细胞加以吸附，再用已吸附有自身抗体的红细胞与AHGS作用而发生凝集反应，此即为间接抗人球蛋白试验(，,,)。 2( 试剂:抗人球蛋白(IgG;IgM;IgA;C3,IgG1;IgG2;IgG3;IgG4美国产)。 3( 操作: 3(1 在80×60mm平板玻片，用油漆均分成12个小格。 3(2 将各种抗人球和C3分别作倍比稀释(2;4;8-----)后;依次吸取10ul于格内，做好标记。 3(3 每孔加入洗涤后5,被检RBC悬液10ul。 3(4 混匀放密闭保湿盒内，37度保温30分钟;(每隔10秒混匀一次)于镜下作效价和分值测定。 4. 结果: (，,):2分 反应液中有3,5个小凝块(4个RBC以上紧密聚集)。 (，) :4分 反应液中有6,10个小凝块游离RBC约3,4。 (，，):6分 反应液中有11,30个中等大小凝块游离RBC约1,2。 (，，，):8分反应液中有充满凝块游离RBC约1,4。 (，，，，):10分 反应液RBC呈结实而大的凝块游离RBC极少。 5. 正常参考值:阴性。 ,. : ,(,患者血标本必须新鲜，血球洗涤要干净不带有血浆蛋白，一般生理盐水理为血清量的,,,,倍以上。 ,(,每次试验应作阴阳对照。 ,(,对研究温抗体型AIHA而言，应选择单抗特异类(抗IgG、IgC、3d、C3c等)的,,,,，不仅诊断所需，且可将温型抗体,，,,进一步分型。 ,(,血液用,,,,抗凝为佳且应立即试验，以防标本放置过程中有非特异性的补体结合，致出现假阳性。 ,( 临床意义: ,(,温抗体型导致的AIHA,DAT,强阳性，IAT多为阴性，但亦可阳性。 ,(,药物诱发的，HA，根据类型不同:多巴类,,,与，,,均为阳性;青霉素类,,,阳性，，,,阴性;奎宁类因其抗体多为IgM型，,,,多为阴性;如改用抗人全血球蛋白则,,,可为阳性。 ,(,冷凝集素综合征:用抗人全血清的抗人球与,,度洗涤过的患者红细胞用试验，,,,亦可阳性，如用单抗IgG或IgM的特异抗血清用试验，,,,则为阴性。,,度作，,,结果阴性，温度下降则，,,阳性。 ,(,,,,:患者在溶血发作时，,,,强阳性，发作后转阴性;，,,常为阴性。 ,(,新生儿同种免溶贫:本病是孕妇的血型抗体通过胎盘进入胎作的血液，对胎儿红细胞的抗原起破坏作用而致的溶血病。故母亲与胎儿的Rh血型、,,,型或其它血型不合时均可发生。因Rh抗体引起溶血的病例，全抗或单抗IgG或IgM呈阳性，且持续数周，经换血与输后阴性转。因,,,血型不合引起溶血的病例，,,,多为阴性或弱阳性。