膝关节腔注射透明质酸钠对成人大骨节病血清透明质酸, CD44, 硫酸角质素含量的影响

膝关节腔注射透明质酸钠对成人大骨节病血清透明质酸, CD44, 硫酸角质素含量的影响 膝关节腔注射透明质酸钠对成人大骨节病血清透明质 酸, CD44, 硫酸角质素含量的影响 ? 4 8 5 2中 华 临 床 医 师 杂 志 ( 电 子 版 1 ) 1 0 2 年 8 月 第 5 卷 第 6 1 期 C h i n J C l i ni i c n a s ( E l t c e r ni o c E di t i n o ) , A u us g t 1 1 0 2 5 1 , , V l o 5 , . N o . 6 1篇论著? 短 膝 关 节 腔 注 射 透 明 质 酸 钠 对 成 人 大 骨 节 病 血 清 透 明 质 酸 、 D C 4 4 、 硫 酸 角 质 素 含 量 的 影 响 何昌谋 郭雄 【 摘 要 】 目 的 探 讨透明 质酸钠 治疗对 大骨节 病( D B K ) 患者血 清中透 明质酸 ( A H ) 、 D C 4 4 、 硫酸 角 质素( S K ) 含 量的影 响。 方法 分 别 检 测 关 节 腔 注 射 透 明 质 酸 钠 的 成 人 D B K 患 者 治 疗 前 、 治 疗 4 周 后, 以及健 康成人 血清中 的 A H 、 D C 4 4 、 S K 含量 。 结果 D B K 患者血 清 A H 、 D C 4 4 、 S K 含 量明显 高于 健 康成人, 且不 同性别 A H 、 D C 4 4 、 S K 含 量 无 差 异 。 在 经 过 关 节 腔 注 射 透 明 质 酸 钠 治 疗 后 , 血 清 中 三 指 标含量均 明显下 降, 其 中 A H 含 量 男 性 高 于 女 性 。 结 论 膝 关 节 腔 注 射 透 明 质 酸 钠 可 明 显 降 低 D B K 患者 血清中 的 A H 、 D C 4 4 、 S K 含 量。 血 清 A H 、 D C 4 4 、 S K 含量可 作为 D B K 疗效评 价指标 之一 。 【 关 键词】 大骨节 病; 透明 质酸 ; 抗 原 , D C 4 4 ; 硫酸角 质素 大骨节 病 ( n i h s a K 唱 k c e B e s a e s i d , D B K ) 是一 种原因 未明的 地方性 、 畸 形 性 骨 关 节 病 , 是 软 骨 疾 患 的 一 种 特 殊 类 型。 其 最 显 著 的特征就 是在炎 性因子 和基质 金属酶 、 聚 集蛋白 聚 糖 酶 的 作 用 下 , 软 骨 胶 原 破 坏、 蛋 白 多 糖 分 解 。 蛋 白 聚 糖 的 组 成 成 分 透 明 质酸( c i n o r u l a y h d i c a , A H ) 和硫酸 角质素 ( n a t a r e k e t a f l u s , S) K 以 及软 骨 细 胞 面 的 D C 4 4 是 保 持 软 骨 功 能 、 结 构 以 及 参 与 软 [ 1 ] [ 2 ] 骨 细胞外基 质代谢 的重要 物质 。 多种治 疗措施 治 疗 可 对 进 入 血 清 中 的 A H 、 D C 4 4 和 S K 等 细 胞 因 子 产 生 影 响 。 而 D B K 患 者关节腔 注射透 明质酸 钠是否 引起 D B K 患者 血清中 A H 、 D C 4 4 和 S K 含 量变化 缺乏实 验研究 。 一、 对象与 方法 畅 1 研究对 象 : 选 择成人 大骨节 病患病 率较高 的陕 西 省 永 寿 县 和 麟 游 县 作 为 研 究 病 区 , 同 时 将 陕 西 省 宝 鸡 扶 风 县 作 为 对 照 。 研究对 象均处 农村, 三地 区气候、 地理 环境等 自然条 件有一 定的相 似性。 依据我 国? 大 骨节病诊 断 标 准 ? ( B G 5 9 9 1 ) 3 0 0 6 唱 1 和 大骨节病 病例纳 入与排 除, 在 病区和 非病区 随机选 择 D B K 患 者和健 康人员 各 5 8 6 0 1 、 例, 因患 者失访、 服 用 其 他 治 疗 药 物 、 标本 溶血、 经费 等原因, 实 际纳入 统 计 结 果 各 为 3 6 例, 男 7 2 例, 女 6 3 例, 平 均 年 龄 分 别 为 9 3 ) 5 0 ? 畅 7 ( 畅 5 5 9 4 ? 岁、 ( 畅 4 5 2 0 ) 畅 7 岁。 畅 2 治疗和 调查方 法 : 对 每位患 者选取 其相对 病情较 重 的 一 个 膝 关 节 每 周 关 节 腔 内 注 射 透 明 质 酸 钠 1 支 ( 上 海 其 胜 生 物 制 剂有限公 司生产) , 每次 0 畅 2 l m , 连续 治疗 4 周。 对患 者治疗 前后进 行关节 疼痛 、 晨僵、 关 节压痛 等项目 调查。 畅 3 采样和 检测 : 在知情 同意的 前提下 , 分 别采取 了 D B K 患 者 治 疗 前 、 治 疗 后 ( 第 4 次 注 射 透 明 质 酸 钠 后 ) 以 及 健 康 组 血 液 。 采用竞 争放射 免疫分 析法检 测血清 中的 A H , 酶联免 疫吸附 实验检 测血清 中 D C 4 4 和 S K 含 量 。 畅 4 统 计学分 析: 用 S S P S 0 畅 3 1 进行 分析, 对同 时满足 正态性 和方差 齐性数 据进行 检 验或 检验, 不满 足的数 据之间 比较 采 用秩和检 验 。 二、 结果 D B K 患者血 清 A H 、 D C 4 4 和 S K 含量明 显高于 健 康 成 人 ( 1 0 ) , 畅 0 < 在 经 过 关 节 腔 注 射 透 明 质 酸 钠 治 疗 后 , 患 者 关 节 疼 痛 、 晨僵 、 关 节压痛 明显减 轻 , 其中疼 痛减轻 率为 6 % , 畅 4 9 屈膝 和晨僵 改善率 为 4 。 % 畅 1 8 7 % ~ 畅 2 6 血 清中三 指标 含 量 均 明 显 下 降 ( 1 0 ) , 畅 0 < 其中 D C 4 4 含 量降至 健康组 水平( 5 0 ) 。 畅 0 > 见表 1 。 表 D B K 组治疗 前后与 非病区 健康组 A H 、 D C 4 4 、 S K 含量 比较 ( g n / l m , ? ? ) 组 别 例 数 H A C D 4 4 K S a a a K B D 组 治 疗 前 6 3 4 8 5 0 7 2 7 2 ? 畅 5 3 畅 5 9 4 9 3 1 9 9 ? 畅 5 3 畅 7 1 3 7 3 2 5 0 ? 畅 0 2 畅 ? 贩 b b b 治 疗 后 6 3 3 5 7 7 3 2 7 4 ? 畅 9 0 畅 3 4 9 6 9 1 0 0 ? 畅 7 3 畅 4 1 6 5 6 1 6 1 ? 畅 0 9 畅 ? 抖 c c 非 病 区 健 康 组 6 3 5 6 5 3 6 0 ? 畅 2 2 畅 2 9 9 8 8 9 2 ? 畅 0 4 畅 2 7 4 8 1 ? 畅 8 4 8 0 畅 ? a b c 注 : 与 非 病 区 健 康 组 比 较 , 0 1 ; 0 畅 < 与 K B D 组 治 疗 前 比 较 , 0 1 ; 0 畅 < 与 K B D 组 治 疗 后 比 较 , 0 1 0 畅 < D O I 3 8 7 7 / 1 0 : . c m a . j 0 5 2 . 1 6 . i s s n 2 0 1 1 . 0 7 8 5 . 1 6 7 4 唱 . 基 金 项 目 : 国 家 自 然 科 学 基 金 ( 3 0 9 7 2 5 5 6 ) ; 国 家 “ 十 五 ” 科 技 重 点 科 技 攻 关 项 目 ( 2 0 0 6 A A 7 1 1 A 2 7 2 、 0 0 7 0 8 唱 B A I 0 7 A 1 2 ) ; 科 技 部 国 际 合 作 专 项 ( 2 0 0 6 D F A 3 3 6 1 0 ) ; 陕 西 省 “ 十 一 五 ” 地 方 病 防 治 计 划 、 陕 西 省 “ 1 3 1 1 5 ” 科 技 创 新 工 程 重 大 科 技 专 项 ( 2 0 0 9 Z D K G 7 9 ) 唱 作 者 单 位 : 7 1 0 0 6 1 陕 西 省 , 西 安 交 通 大 学 医 学 院 [ ( 何 昌 谋 ( 原 单 位 西 安 体 院 ) 、 郭 雄 ] 通 讯 作 者 : 郭 雄 , E m a i l : g u o x @ m a i l . x j t u . e d u . c n中 华 临 床 医 师 杂 志 ( 电 子 版 1 ) 1 0 2 年 8 月 第 5 卷 第 6 1 期 C hi n J C l i n i i c ns a ( E l n t o c e r i c E di t i n o ) , A us ug t 1 1 0 5 2 1 , , V l o 5 , . N o . 6 14 8 5 3表 D B K 组治 疗前后 与非病 区健康 组不同性 别 A H 、 D C 4 4 、 S K 含量比 较( g n / l m , ? ? ) 组 别 性 别 例 数 H A C D 4 4 K S K B D 组 治 疗 前 男 2 7 5 1 1 3 0 8 2 7 0 ? 畅 2 3 3 畅 5 8 1 3 8 9 2 0 9 ? 畅 8 9 3 畅 6 0 8 6 2 9 2 4 3 ? 畅 9 8 2 畅缮 ? 女 3 6 4 6 5 3 9 3 2 7 6 ? 畅 3 8 2 畅 6 0 8 4 7 1 1 9 5 ? 畅 5 3 6 畅 7 4 6 8 2 9 2 6 0 ? 畅 6 5 6 畅缮 ? a 治 疗 后 男 2 7 4 4 4 2 6 3 5 6 ? 畅 7 8 9 畅 3 5 7 2 6 9 ? 2 3 畅 9 3 7 畅 4 4 5 3 7 6 ? 4 4 畅 2 5 3 畅 # ?? 女 3 6 2 9 2 8 3 4 ? 4 0 畅 5 0 9 畅 3 4 2 1 1 0 ? 3 0 畅 3 8 9 畅 3 8 7 7 4 9 ? 4 1 畅 9 9 7 畅 侣?? b b 非 病 区 健 康 组 男 2 7 3 1 7 2 4 6 ? 9 7 畅 6 7 6 畅? 8 1 1 6 0 7 1 ? 畅 9 8 6 畅 3 0 8 0 6 9 8 8 ? 畅 0 3 9 畅 女 3 6 3 8 0 6 0 4 1 ? 畅 9 1 0 畅 2 8 2 5 1 3 ? 8 6 畅 3 4 5 畅 2 4 1 5 4 6 ? 6 9 畅 5 1 6 畅 ?? a b 注 : 与 K B D 组 治 疗 后 女 性 比 较 , 0 5 ; 0 畅 < 与 非 病 区 健 康 组 女 性 比 较 , 0 5 0 . < D B K 患者男 女血清 中 A H 、 D C 4 4 和 S K 含 量 无 差 异 ( 5 0 ) 。 畅 0 > 在 经 过 透 明 质 酸 钠 治 疗 后, A H 含 量 男 性 高 于 女 性, 而 D C 4 4 和 S K 无差异 。 非病 区健康 组男性血 清中 A H 和 S K 含 量均高 于女性 , 有 显著 性 差 异 ( 5 0 ) , 畅 0 < 而 不 同 性 别 D C 4 4 含 量 无 差异。 见 表 2 。 三、 讨论 D B K 临床表 现为受 累关节 的粗 大 变 形、 疼 痛 、 活 动 受 限 等。 近 年 来, 大 量 动 物 实 验 、 临 床 实 践 表 明, 透 明 质 酸 钠 是 治 疗 D B K 的一 种安全、 理 想和有效 的药物 。 本调 查显示 , 在 经过关 节 腔 注 射 透 明 质 酸 钠 治 疗 后 , 患 者 关 节 疼 痛、 晨 僵、 关 节 压 痛 明 [ 3 ] 显 减轻, 这与李 小迎等 研究结 果基本 相同。 关节腔 注射透 明质酸 钠可促 进内源 性透明 质酸的 合 成 , 刺 激 蛋 白 多 糖 合 成 和 分 泌 , 降 低 软 骨 降 解 酶 的 合 成 , 减 弱 纤 溶 酶 [ 4 ] 活 性, 抑 制软骨 细胞的 凋亡 , 以及 延缓免 疫损害 进程 , 促进 关节功能 的恢复 , 降 低血清 中细胞 因子的 含量。 A H 代谢直 接影响 蛋白聚 糖聚合 体和软 骨的正常 结构与 功能。 研究证 明 D B K 可疑有 害因素( 如雪 腐 镰 刀 菌 烯 醇 毒 素 ) 和 炎 症过程中 白细胞 产生的 氧自由 基干扰 软骨细 胞的 A H 代谢 , 导 致 A H 和 细胞外 基质的 过度降 解 , 最终 导 致 关 节 软 骨 受 损 , 其 6 ] [ 5 唱 9 ] [ 7 唱 变 化程度与 病情严 重性正 相关 。 对骨 关节 炎 患 者 血 清 中 A H 含 量 有 增 高、 降 低 和 不 变 的 多 种 不 同 报 道 。 本 调 查 显 示 D B K 血清 中 A H 含 量较健 康组明显 增高, 分析 原因可 ( 能有: 1 ) 关 节软骨及 周围组 织的炎 性介质 ( 如白 细胞介 素 1 、 肿瘤坏 死因 子 、 一氧 化氮等) , 使滑膜 B 型细胞 产生大 量低分 子量 A H , 而低 分 子 量 A H 活 动 度 相 对 较 高, 其 通 过 淋 巴 管 道 较 易 进 入 体 液 。 ( 2 ) 软 骨基质 受各种 分解酶 的影响 , 蛋 白聚糖 降解加 快 , A H 增 多 并 进 入 血 液 。 D B K 患 者 治 疗 前 A H 含 量 无 性 别 差 异, 提 示 软 骨 和滑膜损 伤高于 性别对 血清 A H 含量 影响。 在患者 治疗后 血 清 A H 又 呈 现 男 大 于 女 的 情 况 , 但 并 没 有 达 到 健 康 组 水 平, 可 能 说明透明 质酸钠 治疗对 软骨基 质蛋白 聚糖代 谢具有 影响作 用, 但治疗 效果有 限。 D C 4 4 是一 组分布 极为广 泛的细 胞表面跨 膜糖蛋 白 , 参与人 体多种 生理 和 病 理 过 程 , 如 细 胞 迁 移 、 免 疫 调 节、 创 伤 愈 合、 炎 症 以及器官 移植排 斥反应 等。 D C 4 4 胞 浆外段 可从细 胞表面 脱 落, 成 为 分 泌 型 D C 4 4 ( D C s 4 4 ) , 是 血 循 环 内 中 可 溶 性 的 主 要 来 源 , 其血 清中的 含量反 映 D C 4 4 的破 坏和降 解水平 。 D C 4 4 功能 的丢失 可破坏 软骨 细 胞 的 稳 定 性 以 及 引 起 A H 和 细 胞 的 解 链 , 从 而造成 胞外基 质和软 骨的降 解 。 研究 认为 D B K 患者 D C 4 4 代 谢 异常引 起的蛋 白聚糖丢 失可能 是 D B K 发 病中起 关键作 用的 [ 1 0 ] 因 素 。 现 有资料 多是对 D C 4 4 影响 A H 的 研究 , 而 A H 对 D C 4 4 是否也 能产生 影响作 用? 本调 查表明, 在 采用透 明质酸 钠治 疗 后, D B K 患 者血清 中 D C 4 4 含量下 降至正 常成人 水平 , 可能 提示关 节 蛋 白 聚 糖 降 解 或 关 节 软 骨 损 伤 的 减 轻 抑 或 软 骨 修 复 的 增 强。 D C 4 4 含 量在治 疗前后没 有性别 差异, 这点 与 A H 和 S K 不同 , 原 因有待 进一步 探讨 。 S K 构成 软骨蛋 白聚糖 单体 , 可抑 制细胞 内的转 录和巨 噬细胞分 泌的肿 瘤坏死 因子 , α 唱 有直 接清除 自由基 结构的 物 质 以 及 [ 1 1 ] 抗 氧化作用, 减 缓软骨 分解 。 D B K 患 者血清 S K 含量明 显高于 正常成 人, 治疗后 下降( 但比正 常成人仍 高) 。 说明 透 明 质 酸 钠 对软骨修 复有治 疗作用 。 正常 成人 S K 含 量男性 高于女 性与血 清中 A H 情况 相似, 可能和 不同性 别活动 量大小 不同有 关 。 总之, 本调 查显示, 采 用膝关 节腔注 射透明 质酸钠 可缓解 患 者 关 节 疼 痛 等 症 状, 明 显 降 低 D B K 患 者 血 清 中 的 A H 、 D C 4 4 、 S K 含 量 , 其含量 变化可 作为 D B K 疗效 评价指标 之一。 志 谢 : 感 谢 西 安 交 大 医 学 院 卫 洁 、 张 永 忠 及 西 安 交 大 一 附 院 李 文 荣 老 师 对 本 实 验 现 场 调 查 、 采 样 工 作 的 支 持 和 帮 助 参 考 文 献 [ 1 ] W a n g C T , L i n Y T , C h i a n g B L , e t a l . H i g h m o l e c u l a r w e i g h t h y a l u r o n i c a c i d d o w n 唱 e r g u l a t e s t h e g e n e e x p e r i o s s n o f a s s o c i a t e d o s t e o a t r h r i t i s c y t o k i n e s a n d e n z y m e s i n f i b r o b l a s t 唱 l i k e s y n o v i o c y t e s f o r m p a t i e n t s w i t h e a r l y o s t e o a r t h i r t i s . O s t e o a r t h r i t i s C a r t i l a g e 1 2 4 7 . 2 0 0 , 6 1 4 , 1 2 3 : 7 唱 [ 2 ] 曾 意 荣 , 樊 粤 光 , 吴 凡 , 等 . 膝 骨 关 节 炎 患 者 血 清 基 质 金 属 蛋 白 酶 3 、 肿 瘤 坏 死 因 子 、 α 白 细 胞 介 素 1 、 透 明 质 酸 、 脂 质 过 氧 化 物 含 量 及 超 氧 化 物 歧 化 酶 活 性 变 化 与 补 肾 活 血 中 药 的 干 预 . 中 国 组 织 工 程 研 究 与 临 床 康 复 5 4 3 9 . 2 0 , 0 8 1 2 , 5 4 3 : 6 唱 [ 3 ] 李 小 迎 , 郭 雄 , 王 立 新 , 等 . 成 人 大 骨 节 病 血 清 透 明 质 酸 、 肿 瘤 坏 死 因 子 、 α 血 管 内 皮 生 长 因 子 、 N O 和 硒 含 量 检 测 . 南 方 医 科 大 学 学 报 , 9 4 4 . 2 0 0 7 2 7 , 9 4 : 1 唱 [ 4 ] 吴 启 跃 , 黄 涛 , 张 钢 林 . 玻 璃 酸 钠 膝 关 节 腔 注 射 结 合 电 针 治 疗 创 伤 性 滑 膜 炎 2 8 0 例 . 福 建 中 医 药 4 1 . 2 0 , 1 0 4 1 , 4 0 : 唱