质谱树状图相似度过滤技术进行淫羊藿单体和药

质谱树状图相似度过滤技术进行淫羊藿单体和药 质谱树状图相似度过滤技术进行淫羊藿单体和药 质谱树状图相似度过滤技术进行淫羊藿单体和药 中药体内成分及其代谢产物的分析和鉴定研究有助于揭示中药的药效物质基础,阐明中药的代谢特点。由于中药成分结构的多样性、生物基质的复杂性和体内成分及代谢产物微量的特点,如何深入、高效地分析和鉴定中药体内成分及其代谢产物,特别是微量成分和代谢产物是中药领域急需解决的瓶颈问题。本论文运用高效液相色谱-高分辨质谱,多级质谱技术(HPLC-HRMS/MSn)和质谱树状图相似度过滤(MTSF)技术,研究和建立了一种中药体内成分和代谢产物发现和鉴定的新策略。通过使用全扫描模式获得化合物的一级高分辨质谱图,作为质谱树状图的树干,数据依赖扫描模式获得化合物的多级质谱图,形成树枝,构建检测到的化合物的质谱树状图,并将已知结构的化合物的质谱树状图作为模板导入自建的质谱树状图数据库。然后将生物样品中检测到的化合物的质谱树状图与自建质谱树状图库中的化合物的质谱树状图进行相似度比较,根据相似度结果,发现潜在代谢产物。经过研究明,相似度匹配得分的阈值高于200分时,可以过滤掉大约80%的干扰,获得一定可信度的体内成分和代谢产物信息。通过运用这个新的策略,在淫羊藿主要活性成分朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷和宝藿苷?5个黄酮单体和淫羊藿药材提取物给药后的大鼠的生物样品中,共发现和鉴定了115个代谢产物。并推测了淫羊藿黄酮的代谢途径。与广泛使用的中性丢失过滤(NLF)、产物离子过滤(PIF)和质量亏损过滤(MDF)技术相比,MTSF技术在代谢产物发现方面优于NLF和PIF技术,而与MDF技术互补;并且MTSF技术还能够用于结构鉴定,提高了代谢产物结构鉴定的效率。因此MTSF技术是从复杂生物基质中快速全面发现和鉴定中药体内成分和代谢产物的有利手段。 中文摘要5-6ABSTRACT6-7第一章 色谱高分辨质谱联用技术应用于中药体内代谢产物研究的进展综述7-261 概述72 高分辨质谱特点7-11 2.1 飞行时间(TOF)质谱8 2.2 静电场轨道阱(Orbitrap)质谱8-9 2.3 傅里叶变换离子回旋共振(FTICR)质谱9-113 高分辨质谱在代 谢产物鉴定中的应用11-21 3.1 低分辨质谱的应用情况12 3.2 高分辨质谱分析策略12-13 3.3 采集后数据挖掘技术(Post-acquisition data mining techniques)及其应用13-18 3.4 高分辨质谱的应用实例18-214 21 参考文献 21-26第二章 HPLC-HRMS/MS~n技术分析淫羊藿主要成分和代谢产物的方法建立26-691 实验仪器和材料26-27 1.1 仪器设备26 1.2 实验材料26-27 1.3 实验动物272 实验方法27-30 2.1 淫羊藿给药液的制备27-28 2.2 生物样品采集28-29 2.3 样品前处理方法29-30 2.4 分析条件303 实验结果和讨论30-68 3.1 生物样品前处理方法的考察30-37 3.2 分析条件的优化37-40 3.3 HPLC-HRMS/MS~n分析大鼠灌胃黄酮单体后的生物样本40-46 3.4 HPLC-HRMS/MS~n分析大鼠灌胃巫山淫羊藿药材提取物后的生物样本46-68 参考文献 68-69第三章 质谱树状图相似度过滤(MTSF)技术进行代谢产物发现和鉴定新策略的研究和应用69-1221 MTSF技术进行代谢产物发现和鉴定的基本思路和技术路线69-72 1.1 基本思路69-70 1.2 技术路线70-722 MTSF技术进行代谢产物发现和鉴定的策略及在淫羊藿黄酮单体代谢产物研究中的应用72-85 2.1 数据采集72 2.2 质谱树状图的生成72 2.3 库的建立72-73 2.4 相似度比较73-74 2.5 代谢产物发现和鉴定74-853 巫山淫羊藿提取物体内成分和代谢产物分析85-86 3.1 巫山淫羊藿提取物的分析85 3.2 巫山淫羊藿提取物体内成分和代谢产物挖掘过程和结果85-864 MTSF技术和MDF、NLF、PIF等技术的比较86-118 4.1 MTSF技术与NLF和PIF技术的比较86-91 4.2 MTSF技术与MDF技术的比较91-94 4.3 94-1185 总结118-119 参考文献 119-122英文缩略词表122-123英文缩略词表(续表)123-124致谢124-125个人简历125-126