黑熊染色体组型分析

黑熊染色体组型 () 四川农业大学学报 1997 年 151: 111—114、131 . . .JS ich u an A g r icU n iv 黑熊染色体组型分析 3 营帅素容杨黄勇富曾文先 ()四川农业大学动物科技学院雅安市 625014 ƒ 摘要用微量全血培养方法研究了黑熊染色体的形态和数目, 并对其染色体组型进行 () () 了初步分析。研究结果明, 正常黑熊核型为: ?[ ?2 = 74 10 + 8 +n M SM () () () 54 []。染色体较大, 间于 20 号与 21 号染色体之间, T X Y T T XX T T X Y 染色体较小, 间于 30 号与 31 号染色体之间。 () 关 键 词黑熊 染色体组型 核型45 ] 熊科45 ] C F PL 中图分类号953. 5; 343. 21Q Q 染色体是遗传物质的主要载体, 决定着生1. 材料和方法 物遗传性状的传递和表达。每一物种的染色体 1. 1 试验动物 四川养麝研究所黑熊场 的成年正常黑熊 2 头, 雌雄各 1 头。 都有各自特定的数目和形态, 对生物的染色体 组型进行分析研究, 可以了解生物的起源、系 1. 2 试验材料 黑熊外周血液。 1. 3 试验方法统演化及物种间的亲缘关系, 是进一步研究生 物遗传结构的基础。 黑熊是一种经济价值很1. 3. 1 外周血淋巴细胞培养 参照王子 1 淑 高的野生动物, 为 介绍的微量全血培养法, 略加改变。 了保护野生动物, 合理地开发利用, 国内正在 1. 3. 2 染色体标本制作 细胞培养结束对人工养熊进行开发性研究。目前对黑熊的一 后, 用预热到 38?, 0. 075的氯化钾溶液低 M 般形态学、饲养、繁殖、熊胆采集及胆汁产量等 渗处理 20 分钟, 再用新鲜配制的卡诺液固定方面的研究报道较多, 在遗传结构及其组成方 30 分钟, 连续固定 3 次, 最后一次用甲醇: 冰 () 面的研究未见报道。在国外侧重于对黑熊的传 醋酸 1: 3固定 30 分钟, 空气干燥法制片。 染病学、形态学、行为学、各类疾病及生长发育1. 3. 3 染色体标本处理 片龄 3 日内的标等方面的研究, 对其染色体组型及遗传结构方 本经 常规染色后镜检, 观察染色体 数 G iem sa 面的研究少见。为了满足我国人工养殖黑熊及 目、形态, 公母各计数 50 个细胞, 并选 10 个图 其合理利用的需要, 积累黑能种质资源方面的 象清晰分散均匀的中期分裂相进行显微 摄资料, 探讨黑熊种属间的亲缘关系, 为黑熊生 影。 态、遗传、繁殖等方面提供科学依据, 本文对四 川养麝研究所黑熊场的黑熊染色体组型进行 了初步分析。 2. 试验结果 2. 1 二倍体细胞染色体的数目和形态 (对 100 个中期分裂相进行观察计数 见表 1996- 10- 14 收稿。本文承蒙彭光丽副教授、蒋必光教授审阅, 谨此致谢。本文第二作者杨营工作单位四川养麝研究 所ƒ都 ( )江堰市625014 ) 1, 结果表明, 正常黑熊二倍体细胞染色体众, 长短基本一致的 10 个中期分裂相进行显直 数 可配成 37 对。 雌熊有 36 对常染色 = 74, n 微摄影, 放大、剪贴、配对, 对每条染色体逐一 体和 1 对性染色体 雄熊有 36 对常染色 , XX 测量, 计算其相对长度列入表 3, 并据此绘制 () 体和 1 对性染色体 。按照等 1964X YL evan () 黑熊染色体模式图 图 1。标准划分, 37 对染色体中有 5 对中着丝粒染 表 2 黑熊染色体臂指数及标准差色体, 4 对近中着丝粒染色体, 其臂指数见表 2, 其余皆为端着丝粒染色体, 染色体总臂数 编臂指数及编臂指数及 。 = 92N F 号标 准 差号标 准 差 1 6 1. 55?0. 21?0. 411. 89 表 1黑熊染色体数目观察结果 2 7 1. 542. 16?0. 55?1. 10 3 8 1. 60?0. 412. 16?0. 50 统计染色体数目 4 9 1. 43?0. 362. 35?0. 78别 性 1. 11?0. 15 10-36, , 5 > 7. 0 X Y < 74 74 > 74 细胞数 照第一届国际家养动物分带核型标准化 2 50 6 42 2 雌性( ) 会议提出的核型标准 1976, 制 , R ead in g 50 4 45 1 雄 性 将 36 对常染色体分为、、三组, 各组内按 A BC 100 10 87 3 合 计 相对长度递减依次分别标以 1- 36 的编号, 性 2. 2 染色体组型()染色体不编号, 以 、表示 见图 2、图 3。XY 通过镜检, 选择染色体分散良好, 清晰平 表 3 黑熊染色体相对长度及标准差 编 号相对长度及标准差编 号相对长度及标准差编 号相对长度及标准差 1 14 27 5. 29?0. 85?0. 55?0. 343. 552. 25 2 15 28 4. 32?1. 073. 51?0. 542. 14?0. 43 3 16 29 2. 03?0. 223. 43?0. 552. 01?0. 40 4 17 30 1. 86?0. 303. 33?0. 551. 97?0. 40 5 18 31 1. 51?0. 323. 25?0. 551. 80?0. 28 6 19 32 3. 08?0. 383. 06?0. 551. 70?0. 33 7 20 33 2. 85?0. 392. 92?0. 501. 61?0. 28 8 21 34 2. 60?0. 412. 75?0. 431. 50?0. 29 9 22 35 2. 25?0. 322. 62?0. 431. 38?0. 31 10 23 36 4. 60?0. 662. 55?0. 401. 18?0. 20 11 24 4. 18?0. 612. 51?0. 372. 83?0. 57X 12 25 1. 83?0. 404. 03?0. 602. 43?0. 38Y 3. 67?0. 582. 31?0. 3713 26 () 图 2 雌黑熊 ?染色体核型 () 组: 1- 5 号, 为中着丝粒染色体 , 1 大, 间于 20 号与 21 号染色体之间, 形态很稳A M 号最长;定;染色体较小, 间于 30 号与 31 号染色体 Y 组: 6 - , 呈棒状。3. 分析与讨论之间号, 为 近 中 着 丝 粒 染 色 体9 B () ;3. 1 黑熊染色体组型排列及鉴别: 至今还 SM 没有统一的野生动物核型标准(), 本文是参照国 组: 10-号, 为端着丝粒染色体 。 36 C T 、染色体属端着丝粒染色体。染色体较 际家养动物分带核型标准而进行核型分析的, XY X () 图 3 雄黑熊 ?染色体核型 74 10 因此, 黑熊染色体的分组是否标准还 有待进的黑熊, 其染色体组型为? [ ? 2n = () () () () () + 8 + 54 [, M SM T X Y T T XX T T 一步研究。染色体组型的排列主要是根据染色 与上述两个种比较, 较接近 Se len a rc to s th i2 体的长短和形态来确定, 配对时, 对于相对长 常染色体中, 双臂染色体数为 18 条, , b e tan u s度较大者, 如 1、2 号、6k 9 号、10k 17 号染色 端着丝粒染色体数为 54 条, 但双臂染色体中, 体较易鉴别, 相对长度较小而又较接近者难以 着丝粒位置与本试验结果有差异。 性染色体 配准。 由于本次实验所得染色体较短, 不便进 中, 染色体着丝粒位置不同。作者认为, 产生 X 这些差异的原因有三: 其一是染色体组型分析 行显带研究, 配对是否无误, 还有待进一步研 标准不同所致。其二是判断上的误差。其三不 究证实。 排除种间差异, 有可能黑熊属不只两个种, 本 3. 2 染色体数目文研究的黑熊不属于上述任何一个种, 只是与 由表 1 可知, 本文研究的黑熊二倍体染色 的亲缘关系较近。是否 Se len a rc to s th ib e tan u s 体众数为 74, 占所测细胞数的 87% ; 染色体数 如此还有待深入广泛地研究确定。 少于 74 者占 10% , 多于 74 者占 3% 。 作者认4. 参考文献 为, 染色体数不等于 74 有三种可能: 其一是染 ?王子淑编著 人体及动物细胞遗传学 色体数目变异所致; 其二是制片时染色体丢失 实验技术 四川大学出版社 1987 第一版 或重叠致使 2少于 74; 其三是染色体断裂导 n ?, . . . Fo rdCEe t a lP ro ceed in g o f th e2 致 2多于 74。n f ir st in te rn a t io n a l cen fe ren ce fo r th e stada rd i2 3. 3 黑熊种属探讨sa t io n o f b an ded k a ryo typ e s o f dom e st ic an i2 ( ) 据陈宜峰等 19863报道, 熊科的黑熊. 1980 92: 145- 162m a lH e red ita s ( ) () 属 狗熊属共有两个种: Se len a rc to sSe le2?陈宜峰等 哺乳动物染色体 科学出 版社 1986 ( ? [ ? 2 = 74 8 或, n a rc to s th ib e tan u sn M ()下转 131 页) () () () (+ 10 + 54 [ SM ST T X Y SM T XX SM ) ]及 ?[ ?2 =. , SM Se len a rc to s tjapo n icu sn () ( ) () (74 10 + + 62 [ M SM T X Y M T XX M ) ]。 本试验结果表明, 四川养麝研究所熊场M () , , m e tho din c lu d in g e st im a t io n o f lea st squ a re s m ean L SM o f each t rea tm en tan a ly sis o f () . , va r ian ce A N OV A an d sign if ican ce te st b e tw een L SM sF in a llyth e com p u te r p ro gu am .de sin g o f th e n ew m e tho d w a s in t ro du ced K E Y W O RD S DA TA IN S IN GL E FA C TO R EX P ER IM EN T W IT H RA N DOM IZED BL O C K D E S IGN ; M ISS IN G DA TA ; L EA ST SQ U A R E S M E T HOD ; ?COM PU T ER PRO GRAM . () 上接 114 页 STU D Y ON OI GIDRA M F OBL CAK EBA R Sh u a i Su ro n g Y an g Y in g H u an g Yo n gfu e t a l (, Co llege o f A n im a l Sc ien ce an d T ech no lo gyS ich u an )ƒ, , 625014A g r icu ltu ra l U n ive r sityY aan S ich u an C h in a () A b st rac t C h rom o som e s o f b lack b ea r Se len a rc to s th ib e tan u sw e re p rep a red f rom p e2 r ip h e ra l b loo d lym p ho cy te s. Id io g ram K a ryo typ e o f b lack b ea r w e re stu d ied. T h e n um b e r o f ƒ 74, 37 . 36 1 d ip lo id ch rom o som e s w a s p a irM a le s h ad p a ir o f u su a l ch rom o som e s an d p a ir o f , 36 1 sex ch rom o som e s X Y w h e rea s fem a le s h ad p a ir o f u su a l ch rom o som e s an d p a ir o f sex () . ?[ ? 2 = 10+ 8+ 54ch rom o som e s XXT h e k a ryo typ e o f b lack b ea r w a s n M SM T X Y T T ( ) [, = 92. . XX T T N F Sex ch rom o som e s X an d Y w a s t ip cen t rom e reT h e X w a s lo n ge r , 20 21 . 30 31 .th an Y an d it b e tw een th an d th ch rom o som e sT h e Y b e tw een th an d th ?K E Y W O RD S BL A C K B EA R ; ID IO GRAM ƒKA R YO T Y P E; U R S IDA E.