禽脑脊髓炎冻干活疫苗安全性、最小免疫剂量及免疫效力试验

第!"卷 第#$期 西北农林科技大学学报%自然科学版& ’()*!" +(*#$ $,,-年#$月 .(/0*(1+(0234562789:;583<=9>*(1?@09*A=BC(0*%+A2*789*DB*& E58*$,,- 禽脑脊髓炎冻干活疫苗安全性F最小 免疫剂量及免疫效力试验 G 焦铁军#H李河林#H张 浩#H李健强#H$ %#杨凌绿方生物工程有限公司H陕西 杨凌 I#$#,,J$西北农林科技大学 动物科技学院H陕西 杨凌 I#$#,,& K摘 要L 了"批自制禽脑脊髓炎冻干活疫苗的安全性和最小免疫剂量H并对疫苗进行了病毒含量测定 和攻毒保护试验M结果明H鸡接种疫苗后精神F食欲及发育均正常H疫苗安全性良好J接种病毒剂量为N,,DOEN, 时H可使免疫鸡产生可靠的免疫力H抵抗?D’’P株强毒的攻击H降低鸡群发病率H所以该疫苗的最小免疫剂量 QN,,DOEN,R羽M"批疫苗病毒含量均大于#,!*NDOEN,R羽份H攻毒后保护率均在SI*NT以上M K关键词L 禽脑脊髓炎J安全性J最小免疫剂量J免疫效力 K中图分类号L 7SN#*!"I*$,# K文献标识码L ? K文章编号L #-I#:U!SI%$,,-&#$:,,$N:," 禽脑脊髓炎%?>9A=D=85V3A)(WX5)9296H?D&是 由小P+?病毒科的禽脑脊髓炎病毒%?D’&引起的 主要危害幼禽中枢神经系统的一种病毒性传染 病K#LM该病在我国流行日趋严重H主要引起产蛋鸡产 蛋率一过性下降H#月龄以内的雏鸡感染后发生头 颈震颤H瘫痪和衰竭死亡H死亡率达#,TY$NTM由 于本病具有发病突然H难以预测持续期H可通过水平 接触和垂直传播等特点H所以对养禽业的危害非常 严重M控制该病的有效方法是对种鸡进行疫苗接种H 通过母源抗体使雏鸡获得保护K$:"LM目前H临床上使 用的疫苗主要有弱毒疫苗及灭活疫苗$种H其中弱 毒疫苗具有接种方便F经济F省力F免疫期较长等优 点H对控制?D的发生起重要作用M国内对禽脑脊髓 炎疫苗的研究大多集中在灭活疫苗上H关于弱毒疫 苗的研究报道较少H市场上弱毒疫苗供应全部依赖 进口M焦铁军等KNL在对引进?D’##"!疫苗毒株进 行系统鉴定研究后H试制了几批禽脑脊髓炎冻干活 疫苗H本试验进一步对该疫苗的安全性F最小免疫剂 量和免疫效力进行研究H以为该疫苗的生产与检验 技术参数的制定提供依据M # 材料与方法 #*# 材 料 #*#*# 疫 苗 自制?D##"!株冻干活疫苗H共" 批H批号分别为$,,,,UH$,,#,!H$,,#,U和$,,$,!M #*#*$ 病 毒 ?D’ ’P 株 强 毒HDOEN,为 #,I*$RWZH以,*,NWZR只的剂量脑内接种-Y#,周 龄7[C雏鸡H能引起S,T以上雏鸡发病M #*#*! 7[C鸡胚F鸡 7[C种蛋购自北京梅里亚 维通实验动物技术有限公司H部分孵化至 I日龄 %7[C鸡胚&用于实验H部分孵化至出壳%7[C鸡&H 饲喂于负压隔离器内M #*$ 禽脑脊髓炎病毒抗体的检测 ?D’抗体的检测采用DZO7?法M?D’酶标试 剂盒购自美国OED\\公司H血清DZO7?抗体滴度 低于#]!U-时判为阴性M #*! 自制?D冻干活疫苗的安全性试验 将S,只-YS周龄7[C鸡随机分为"组H分别用 于 $,,,,UH$,,#,!H$,,#,U和$,,$,!各批次疫苗的 安全性试验H每组分口服和刺种$个处理H每处理#, 只鸡M各批次疫苗均按瓶签注明羽份用生理盐水适 当稀释后H分别通过口服和刺种$种途径接种7[C 鸡H刺种组接种剂量为正常使用剂量的#,倍H口服 组中N只鸡接种剂量为正常使用剂量的#,倍H另N 只鸡接种剂量为正常使用剂量的#,,倍M接种后!Y "周内观察所有鸡的精神F食欲是否正常H有无局部 和全身反应H有无发病现象M #*" 自制?D冻干活疫苗最小免疫剂量检测 将!N只S周龄7[C鸡分为N组H每组I只H^ H _H‘和a组分别口服接种用生理盐水作#]$,,H G K收稿日期L $,,N:##:$N K作者简介L 焦铁军%#UISb&H男H陕西蒲城人H助理兽医师H主要从事畜禽生物制品研究MD:WA9)cd2d,,S#eXA3((*8(W*8= K通讯作者L 李健强%#U!Ub&H男H陕西渭南人H教授H博士生导师H主要从事兽医微生物学研究M 万方数据 !"!###$!"%###和!"%&##倍稀释’病毒含量分 别为%(()&$&###$%&##和%#*&+,-&#./01的%####2 批疫苗$#3%/0.只45组鸡接种相同剂量生理盐水 作对照6接种后7$!($!7和%!8分别翅下静脉采血$ 分离血清$用+0,9:试剂盒检测血清中抗体水平$ 并在第%!天采血后$所有鸡脑内攻击:+;;<强毒 株$!#*+,-&#.羽$观察%!8$统计发病鸡数并计算保 护率$确定疫苗最小免疫剂量6 !3& 自制:+冻干活疫苗的免疫效力试验 !3&3! :+;含量的测定 ’!19=>鸡胚检验6用灭 菌生理盐水将疫苗作!#倍系列稀释$取!#?($!#?&和 !#?@*个稀释度$分别卵黄囊内接种@A7日龄9=> 鸡胚 !#枚’#3%/0.枚1$另取 %#枚9=>鸡胚作对 照$继续孵化并观察至出雏后*8$弃去7%B前死胚$ 将特异性死胚和麻痹C运动失调的雏鸡判为感染$计 算+,-&#$对照鸡胚出雏率应在7#D以上$且无禽脑 脊髓炎症状6 ’%19=>雏鸡检验6用灭菌生理盐水将疫苗做 !#倍系列稀释$取!#?&$!#?@$!#?7*个稀释度$分别 脑内接种!日龄9=>雏鸡!#只’#3#&/0.只1$另取 &只鸡接种相同剂量生理盐水作对照$观察!&83雏 鸡运动失调C头部震颤判为感染$计算,-&#$对照鸡 应不发病6 !3&3% 攻毒保护试验 将批号为%####2的疫苗按 正常使用剂量分别口服接种%!$%@$&@日龄9=>鸡 各!#只$另取&只鸡口服生理盐水做对照$%!8时所 有鸡脑内接种禽脑脊髓炎强毒;<株$进行攻毒$剂 量为!#*+,-&#.只$观察!78$统计保护率6%##!#*$ %##!#2和%##%#*批疫苗均采用%)和&@日龄9=>鸡 进行试验$免疫$攻毒方法同前6 % 结果与分析 %3! 自制:+冻干活疫苗的安全性 所有试验鸡均未发生脑脊髓炎$刺种部位也未 见异常病变$精神食欲不受影响$发育正常’表!16说 明疫苗是安全的$可用于@周龄以上的鸡6 表! 自制:+冻干活疫苗的安全性 EFGHI! 9FJIKLMJ:+HNOIOFPPNQI 疫苗批号 0MK 鸡龄.周 RIISTFUI 接种途径 ,QMPVHFKIWMVKI 鸡数 XM3MJPBNPSIQY 观察结果 #9:;9:;#9:;9:;*XB]鸡胚易感性>#LB 试验]琼脂扩散试验>"ZMB和酶联免疫吸附试验 >#69L"B等Q#69L"与*X以及#L所测免疫抗体水 平有良好的相关性[HWD\K且比琼脂扩散试验更适用于 评价免疫抗体水平Q本研究最小免疫剂量测定试验 中采用的#69L"方法K能够准确地反映血清中的抗 体水平K从试验结果来看K免疫接种后AJ8前!组抗 体均为阳性K且抗体水平与接种病毒剂量正相关K攻 毒保护试验的结果也验证了这一点Q所以K确定该疫 苗的最小免疫剂量^;<<#9:;<=羽Q 国外有研究表明K病毒含量]攻毒保护率与抗体 水平之间具有相关关系[A?@ABC<=’D?E@FG$H’#BIFJ?A76#KLMJBNFA?IJ?ABAOBPQ?@FREB@JKJN6S6TBIB@FPRBAK?AM?PP@JO?KJFAFU?AFG?@I?OOJAB4H561IJ?ATJN’ .9".’!839:;/.36 405 >?@ABC<=6>FAKGF@FU?IJ?ABAOBPQ?@FREB@JKJN8?QJNKFGJO?@?OOFLAK4H561IJ?ATJN’.99*’03V0W8"/3;"0:6 4!5 焦铁军’张 浩’李河林’等6禽脑脊髓炎活疫苗的研究 XY%.种毒的繁殖及其生物学特性的鉴定4>5ZZ中国畜牧兽医学会6中国畜牧兽 医学会生物制品学分会第十次学术研讨会

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集6广东广州’3++!8.!*;."36 4"5 成子强’赵振华’日穆德玛6禽脑脊髓炎油乳剂灭活疫苗免疫效果及免疫机理的研究4H56中国农业科学’3++3’/!V/W8//!;//96 4:5 顾玉芳’赵振华’郝俊峰’等6禽脑脊髓炎免疫细胞类别和数量变化的分析4H56中国兽医杂志’.99!’3.V..W8/;"6 4*5 #Q?UGBAT)’D?AAFOC[1’[GFIBN$H61AKJ\FMEGBNPFANBNKF?IJ?ABAOBPQ?@FREB@JKJNIJGLNI?OOJABN]QBA?MRJAJNKBGBM\EMJUUBGBAK GFLKBN4H561LNK(BKH’.993’"9V..W83:3;3:!6 495 #R?GK^ H’[GJ_T>’t?=8%FLG@FKNFU1IJ?A2AOBPQ?@FREB@JKJN@JIBI?OOJABNR?MB\EFLGNB@IBN]BGBOQFNBA?AM BNKJR?KBMJAN?UBKE’RJAJRLR JRRLABMFNB?AMJRRLABPFKBAOE6DQBGBNL@KNMBRFANKG?KBMKQ?KKQB JAFOL@?KBMOQJOCBANNQF]BMAFNJ‘AFUFKQBGMJNOFRUFGKN’?AMKQBJGNPJGJK’?PPBKJKB?AMMBIB@FPRBAK]BGB KQBN?RB?NKQFNBJAOFAKGF@NJAKQBPBGJFMFU0]BBCNPFNKJAFOL@?KJFA6DQBGBNL@KNNQF]BMKQ?KKQBJRRLAB MFNBFU!++2^T!+OFL@MJAMLOBNF@JMJRRLAJKE’BUUBOKJIB@EPGFKBOKOQJOCBA?‘?JANKKQBOQ?@@BA‘BFUKQB IJGL@BAKIJGLN12(1)’?AMKQBRJAJRLRMFNBFUKQBI?OOJAB]?N@!++2^T!+6DQBIJGLNOFAKBAKFUB?OQ @FK]?N?\FIB.+/6!2^T!+PBG\JGMMFNB’/;0;]BBCF@MOQJOCBANJAFOL@?KBMFG?@@E]JKQ‘G?MBMMFNB]BGB OQ?@@BA‘BM?UKBG/]BBCNPFNKJAFOL@?KJFA’?AMKQBPGFKBOKJFAG?KB]?NRFGBKQ?A*:6!,6 AiBCu>D<81IJ?A2AOBPQ?@FREB@JKJN-N?UBKE-RJAJRLRJRRLABMFNB-JRRLABPFKBAOE EF 西北农林科技大学学报V自然科学版W 第/0卷 万方数据 禽脑脊髓炎冻干活疫苗安全性、最小免疫剂量及免疫效力试 验 作者： 焦铁军， 李河林， 张浩， 李健强， JIAO Tie-jun， LI He-lin， ZHANG Hao， LI Jian-qiang 作者单位： 焦铁军,李河林,张浩,JIAO Tie-jun,LI He-lin,ZHANG Hao(杨凌绿方生物工程有限公司 ,陕西,杨凌,712100)， 李健强,LI Jian-qiang(杨凌绿方生物工程有限公司,陕西,杨凌 ,712100;西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100) 刊名： 西北农林科技大学学报（自然科学版） 英文刊名： JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY 年，卷(期)： 2006,34(12) 参考文献(15条) 1.Calnek B W Control of avian encephalomyelitis:a historical account[外文期刊] 1998(04) 2.Calnek B W;Taylor P J;Sevoian M Studies on avian encephalomyelitis.Ⅴ.Development and application of an oral vaccine[外文期刊] 1961 3.卡尔尼克 B W;高福;苏敬良 禽病学 1999 4.王明俊 兽医生物制品学 1997 5.Nicholas R A;Goddard R D;Ream A J Improved potency test for live avian encephalomyelitis vaccines 1986(03) 6.Nicholas R A;Hopkins I G;Southern S J A comparison of titration methods for live avian encephalomyelitis virus vaccines 1986 7.Nicholas R A;Wood G W;Hopkins I G Detection of avian encephalomyelitis virus 1986(01) 8.Westbury H A;Sinkovic B The pathogenesis of infectious avian encephalomyelitis 1 The effect of the age of the chicken and the route of administration of the virus[外文期刊] 1978(02) 9.Westbury H A;Sinkovic B The pathogenesis of infectious avian encephalomyelitis 3 The relationship between viraemia,invasion of the brain by the virus,and the development of specific serum neutralising antibody[外文期刊] 1978(02) 10.Smart I J;Grix D C;Barr D A The application of the ELISA to the diagnosis and control of avian encephalomyelitis[外文期刊] 1986(09) 11.Shafren D R;Tannock G A;Groves P J Antibody responses to avian encephalomyelitis virus vaccines when administered by different routes[外文期刊] 1992(11) 12.顾玉芳;赵振华;郝俊峰 禽脑脊髓炎免疫细胞类别和数量变化的分析[期刊论文]-中国兽医杂志 1995(11) 13.成子强;赵振华;日穆德玛 禽脑脊髓炎油乳剂灭活疫苗免疫效果及免疫机理的研究[期刊论文]-中国农业科学 2002(03) 14.焦铁军;张浩;李河林 禽脑脊髓炎活疫苗的研究ⅠLF1种毒的繁殖及其生物学特性的鉴定 2005 15.殷震;刘景华;胡贵学 动物病毒学 1997 本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_xbnydxxb200612006.aspx