猪链球菌的分离鉴定与药物治疗

猪链球菌的分离鉴定与药物治疗 猪链球菌病是一种常见传染病, 目前,本病呈明显上升趋势.猪链球菌 病发病急,病程短,死亡率高,临床上 以哺乳仔猪和刚断奶仔猪发病率,死 亡率高,大猪发病率较少.该病除可以 引起败血症,脑膜炎外,还可以致关节 炎,淋巴脓肿,皮炎等病症.给养猪业 造成巨大的经济损失.由于猪链球菌 有较多的血清型,用疫苗防治不能取 得满意的效果.用青霉素等常规抗革 兰氏阳性球菌抗生素治疗效果不显 着.从而造成较大的损失.治疗效果不 理想主要是由于目前引起猪发病的猪 链球菌对青霉素产生了耐药性.这种 现象在其他细菌性动物疫病的治疗过 程中也常常出现.由于耐药性的产生, 使许多抗生素在临床上失效,造成治疗 失败,导致疾病的暴发流行及死亡和医 疗费用的增加.有鉴于此,本人收集各 种猪链球菌病病原的基础上通过药敏 试验测定他们的药物敏感性,筛选出对 目前发病菌株敏感的药物,以期指导用 药,从而有效控制猪链球菌病. 1材料 1.1标本采集 采集怀孕母猪关节脓肿部脓汁和 测定猪心血. 猪链球菌的分离鉴定 与药物治疗 江有明'何海健 (1.浙江省常山县天马畜牧兽医站,浙江常山324200; 2.金华职业技术学院生物工程学院) 中图分类号:$858.28文献标识码:A文章编号:1008—0414(2006)06(上)一0o39—03 摘要猪链球菌病是猪的一种常见传染病.由于链球茵有多个血清型, 给临床防治带来一定困难.为了临床上能够有效控制和治疗猪链球菌病,本人对 猪链球菌病进行了病原分离及药物试验.结果,猪链球菌分离株对先锋九号,氟 苯尼考,先锋五号3种抗生素敏感,对卡那霉素,复方新霉素,环丙沙星,链霉素4 种抗生素耐药.采取饲养环境和栏舍带猪消毒,饲料添加敏感药物,发病猪隔离 和治疗等.可有效控制本病发生. 关键词猪链球菌病原分离药敏试验综合防治 1_2试剂及仪器 普通血平板,链球菌快速鉴定试 条RapidIDStrep购自生物梅里埃公 司;药敏纸片由杭州天和微生物试剂 有限公司提供;ATP细菌鉴定仪为生物 梅里埃公司产品. 2 2.1细菌的分离培养 将病料标本分离划线接种于血平 收稿日期:2006702—28 作者简介:江有明(1971,4-),男,汉族,浙江常山人,助理兽医师,主要从事动物诊疗,兽药管 理工作 头,其中25头发病猪治疗方法同上.未 发病猪l6头不治疗作对照. 2结果 试验结果见1,表2. 3结论与分析 3.1预防组 从预防注射和对照注射两组结果 显示,预防注射57头,无l头发病,对照 组56头,发病34头,发病率60.7%.发病 的34头猪,用猪白细胞干扰素(冻干 型)治疗治疗24头,治愈24头,治愈率达 100%;余10头未治疗,结果全部死亡. 死亡率为17.86%.经过用药物预防和 治疗大大提高了乳猪的成活,减少乳 猪的发病和死亡. 3-2治疗组 整窝发病和一窝中部分发病乳猪 共62头,治愈59头,治愈率达95.16%, 其临床治疗疗效显着.而另部分未发 病乳猪共l6头,全部给予预防注射,无 一 发病死亡. 3.3小结 通过以上试验结果分析,用2一l0 日龄乳猪专用猪白细胞干扰素(冻千 型)预防乳猪,可降低乳猪的发病率 60.7%.用2~10龄乳猪专用猪白细胞干 扰素(冻干型)治疗乳猪疾病可达到治 愈率96.5%(83/86)的临床效果,预防 后的乳猪均未发病.建议2—10日龄乳猪 无病用四川世红生物技术有限公司生 产的2~10龄专用猪白细胞干扰素(冻干 型)预防,有病用其治疗,都能显着提高 乳猪的成活率,降低乳猪发病和死亡, 增加养殖户和业主的经济效益. 板上37?培养24h. 2.2细菌鉴定 2.2.1形态学检查:挑取血平板上可疑 菌落增菌,各菌株革兰氏染色后镜检. 镜检后疑似链球菌株再进行纯培养 l8—24h. 2.2.2触酶试验:用接种环取一环3%过 氧化氢溶液于纯净的载玻片上,再用 接种环或接种针蘸取待检菌落涂于过 氧化氢溶液中,若立即出现气泡者为 过氧化氢试验阳性. 2.2.3RapidIDSTREP试条的链球菌 快速鉴定:革兰氏染色和触酶试验初 步鉴定的疑似菌种接种于RapidID STREP,37?培养4h后分别加入VPA, VPB,FB和NIN试剂,立即在ATB细菌鉴 定仪上读取结果. 2.2.4药敏试验:所有猪链球菌株制成 lxl0/mL菌悬液,用灭菌棉签均匀涂布 于血平板上,采用K—B纸片法进行药敏 试验,用消毒眼科小镊子正确贴放药 敏纸片,每块平板帖6片. 3结果 3.1细菌鉴定 3.1.1该病料中经革兰氏染色后分离出 疑似菌落66%,血平板上疑似菌落较 小,凸起,灰白色,较干燥,光滑,边缘整 齐,周围有透明溶血环.镜检为呈单个, 成双或短链状排列的革兰氏阳性球菌. 3.1.2触酶试验结果(见表1),所采集病 uVESTocKANDPoULFRY|NDUsFRYNo.199 料中,以革兰氏阳性球菌为主. 表l触酶试验结果 菌种结果 l革兰氏阳性菌一 2革兰氏阳性菌一 3革兰氏阳性菌一 4革兰氏阴性菌+ 5革兰氏阳性菌一 注:+有气泡呈阳性,一无气泡呈阴性;其中 细菌l,2,3,6孕母猪脓肿液,4,5为测定 舍猪心血.3为杆菌不需做以下实验.经纯 培养后的细菌触酶试验结果和表2一样 3.1.3ATB鉴定结果(见表2),可以看出 此病原微生物是猪链球菌病原. 3.2药敏试验结果(见表3),可以看出 猪链球菌菌株对先锋九号等3种抗生 素敏感,对痢菌净等5种抗生素中敏,对 卡那霉素等4种抗生素耐药. 4讨论与结论 4.1本次仅从临床病猪中分离到一株 猪链球菌,结合以前多次从各种类似 猪链球病的临床病例的病灶中分离到 过类似球菌,特别是从胸膜炎,腹膜炎 病例中分离出本菌,表明链球菌的污 染在本场仍然比较严重,并对生产形 成了一定的威胁.对本病采取相应的 防治措施加以控制十分必要. 4.2本场是2002年底投入生产运行的1 个新猪场,而且采用离地饲养和平养方 式,卫生条件相对来说比较好,但链球菌 病的发生仍如此严重,对老猪场来说则 可想而知.因此,在我省养猪生产中应该 把本病的防治列入常规的防疫日程. 4.3对本场发病情况的分析,初步认为 主要原因如下:(1)因本场这类病例总体 来说并不严重,所以一直未曾采用疫苗 免疫注射,任何猪群都暴露在本病威胁 的危险之中,一旦受到侵袭,极易出现临 床病例;(2)虽然本场对猪舍地面,栏舍 采用烧碱和氯制剂交替使用消毒,但平 时带猪消毒一直采用有机氯制剂,比较 单一,猪只体表污染的病原菌得不到有 效清除,因此感染不断发生,也在常理之 中;(3)本场虽然按照"全进全出"的生产 工艺,建造并有这方面的,但因是新 建场,生产尚未正常运作,由于种种原 因,生产操作中还不能按照全进全出要 求进行,各批仔猪之间相互交叉接触污 染的情况不能避免.因此,一旦出现本 病,一时难以有效控制;(4)临床上常有 猪链球病急性发病的病例报导,本场由 于一直来采取了较规范而严格的防疫卫 生消毒措施,所以本次未见急性感染发 病病例,多为慢性或局灶性病例;(5)从 药敏试验结果看,本场株菌对先锋九号, 先锋五号和氟苯尼考敏感,对链霉素,卡 那霉素和新霉素耐药,对阿米卡星,恩诺 沙星,环丙沙星和克林霉中敏.由于先锋 五号是人用药,不能用于猪,说明本菌较 易产生耐药性,在临床用药时应该定期 作细菌分离及药敏试验,针对性地选用 药物,以提高疗效. 4.4猪链球菌病有较多血清型,不同 猪场发生猪链球菌病的血清型可能不 一 样,引起病猪的临床症状和病理变化 也不完全一样,对药物的敏感性也可能 不一样.即使同一个血清型,在不同猪 场或在同一个猪场不同时期,猪只的不 同阶段,其对药物敏感性也可能不一 样.因此,在进行药物防治前,必须进行 表2ATB鉴定结果 抗生素抑菌圈直径(mm)抗生素抑菌圈直径(mm) 药敏试验,选择高敏药物和适当的剂 量,以提高治疗效果,防止不良反应,切 不能照搬. 5综合防治 5.1及时隔离病猪和可疑猪,病死猪 深埋或高温无害化处理.整个猪舍用1: 100的百毒杀消毒,每天1-2次,连用1 周,今后应定期更换消毒药物. 5.2对病猪用氟苯尼考注射1个疗程: 每头猪注射3,4mL,连用3d.再用3%o 的高猛酸钾喷雾,每天1S. 5.3仔猪断奶后可在日粮中添加药物 进行预防,如每吨饲料中加强力霉素 150g和阿莫西林200g或每吨饲料中加 四环素125g,连续饲喂14d,可有效预 防本病的发生. 5.4猪场应实行多点式饲养,坚持全 进全出制度.防止各类猪只交叉感染, 特别要注意母猪对仔猪的感染. 5.5加强饲养管理,搞好猪舍内外的 环境卫生,猪舍要保持清洁干燥,通风 良好,猪群的饲养密度要适中,猪舍每 周用百毒杀或菌毒敌等高效消毒剂进 行喷雾消毒. 5.6仔猪断脐,剪牙,断尾,打耳号等 要严格用碘酊消毒,当发生外伤时要及 时按外科方法进行处理,防止从伤口感 染细菌引发本病. 5.7猪场严禁饲养猫,犬和其它动物, 彻底消灭鼠类和吸血昆虫,控制传递媒 介传播病原体.可有效防止本病的发生 和流行. 5.8应激因素对猪链球菌病的发生有 非常重大的作用,本病常在环境气候, 饲料等突然改变或运输混群后发生.因 此加强管理,创造有利于猪健康生长的 环境卫生条件至关重要. 参考文献 [1]褚美芬,倪柏锋.浙江某猪场暴发?型猪 链球菌感染及病原诊断和药敏实验.微生物 学杂志,2004,9(24):5 [2]沈健,孙建中,尤玉民,等.一起人——猪 链球菌感染性综合症暴发流行病学调查.中 华流行病学杂志.2001.22(2):154—155 [3]牛桂玲,徐淑华.猪链球菌病的诊断和防 治.中国兽医杂志,200,37(12) [4]肖兴.湖南省猪链球菌病病原的耐药性 调查.湖南畜牧兽医.2004(1) [5]万遂如.当前猪链球菌病的流行特点与 防治对策.吉林畜牧兽医杂志,2004,5(48)