氢溴酸右美沙芬胃漂浮缓释片的研制

氢溴酸右美沙芬胃漂浮缓释片的研制 河北大学 硕士学位 氢溴酸右美沙芬胃漂浮缓释片的研制 姓名:李莉 申请学位级别:硕士 专业:药物分析学 指导教师:胡连栋 2011-06 摘 要 摘 要 胃漂浮给药系统是根据流体动力学平衡原理制备的，口服后可长时间漂浮在胃液之 上的一种特殊缓释制剂。该类制剂的密度一般小于胃内容物，因此口服后可以漂浮在胃 液上，从而延长药物在胃肠道中总的释放时间，增加药物在胃和小肠的吸收，提高治疗 窗小的药物的生物利用度，降低毒副作用。本文的研究目的是采用漂浮技术来制备氢溴 酸右美沙芬 DMB 缓释片，延长其在胃内滞留时间，以减少给药次数，增加患者的顺应 性。 本文采用了紫外分光光度法对 DMB 胃漂浮缓释片体外释药进行分析;应用高效液 相色谱法对 DMB 胃漂浮缓释片进行含量测定。对两种方法的方法学考察表明，以上方 法灵敏度和准确度高，重现性好，满足本研究中的分析要求;在漂浮性能的测定试验中， 我们分别采用 pH 1.2 ，3.0，5.0 的盐酸溶液为漂浮介质，并确立了以起漂时间和持漂时 间作为测定指标。处方前研究为药物的处方筛选和稳定性考察提供了可靠的分析依据。 在处方前研究的基础上，对影响片剂溶出度和漂浮性的处方因素和制备工艺进行了 考察，并通过正交设计进行了优化，最终确定了最优处方。实验结果表明以羟丙甲纤维 素 K4M 为水凝胶材料 25 mg ，碳酸氢钠为发泡剂 20 mg ，十六醇为助漂剂 18 mg ， 4% 乙基纤维素 EC 的乙醇溶液为粘合剂，乳糖和微晶纤维素 MCC 为填充剂，结合其它辅 料，利用湿法制粒工艺制备的 DMB 胃漂浮缓释片可在3 min 内起漂，持漂时间大于 24 h ;12 h 的释放率均可达到 85% 以上;其片重、脆碎度、硬度、药物含量测定值都在规 定范围内，均符合胃漂浮缓释片剂的要求。 采用零级模型、一级模型、Higuchi 模型、Hixson-Crowell 模型和 Ritger-Peppas 模 型对 DMB 胃漂浮缓释片的药物释放曲线进行了模型拟和，确定了该漂浮片的体外释放 符合一级动力学过程，释药机制是以扩散为主兼有骨架溶蚀。 对 DMB 胃漂浮缓释片进行了影响因素试验 光照、高温、高湿 ，加速试验和长期 试验，结果表明本品的外观、含量、释放度、漂浮性在以上条件下均比较稳定。 关键词 氢溴酸右美沙芬 缓释片 漂浮性 正交设计 体外释放度 I Abstract Abstract The ?oating drug delivery systems designed on the basis of hydrodynamically balanced system, which enable prolonged and continuous input of the drug to the upper parts of the gastrointestinal tract and improve the bioavailability of medications that are characterized by a narrow absorption window. A new strategy is proposed for the development of gastroretentive dosage forms for dextromethorphan hydrobromide DMB preferably once daily. The design of the delivery system was based on the sustained release formulation, with ?oating and swelling features in order to prolong the gastric retention time, reduce the dosage frequency and increase patient compliance. According to the literature, ultraviolet spectrotometry method was developed for determination the release of DMB during the study of in vitro release. High performance liquid chrmatograhy HPLC method was developed for assaying the content of DMB in the DMB sustained-release SR floating tablet. The analytical methods above were proved to be simple, reliable and sensitive. In the floating test, different concentrations of hydrochloric acid solution pH 1.2, 3.0, 5.0 were used as floating medium. The ?oating lag time and the total ?oating time were seleceted as determination index. These researches provide a reliable basis for the next formulation study and stability study. Basing on the preformulation study, influence of formulation and manufacture on the drug release and ?oating characteristics was investicated and an orthogonal experiment design method was used to select the optimized formulation. The optimized tablets were prepared by wet granulation method using hydroxypropyl methylcellulose HPMC K4M as hydrocolloid gelling agent 25 mg , sodium bicarbonate as gas-generating agent 20 mg , hexadecanol as ?oating assistant agent 18 mg , microcrystalline cellulose MCC and lactose as bulking agent, 4% ethanol solution of ethylcellulose w/v as binding agent. The prepared tablets could ?oat within 3min and maintain for more than 24 h. Drug release at 12 h was more than 85%.The data of physical parameters like weight, hardness, friability and drug content were all lie within the limits. The release mechanism of DMB was studied by comparing with Zero-order Model, First-order Model, Higuchi Model, Hixson-Crowell Model and Ritger-Peppas Model. Release data was in good linearization with the First-order Model and the prevailing release mechanism was diffusion with erosion as a supplementary release mechanism. II Abstract Stability studies of DMB on light, temperature and moisture were determined and accelerated test and long-term test was taken to estimate the stability of the floating tablet. The results showed that appearance, content, drug release, and flotation were all stable under these tests. Keywords Dextromethorphan hydrobromide Sustained release Floating Orthogonal experiment design In vitro release III 第 1 章 绪论 第 1 章 绪论 1.1 胃漂浮缓释制剂的发展背景 口服缓释给药系统在过去几十年里发挥了很大的治疗优势，与相应的普通制剂相比 [1] 较，其给药频率减少，能显著增加患者的顺应性 。这种给药方式虽然很好地控制了药 [2] 物从系统中的释放，药物的生物利用度有所提高 ，但制剂在胃肠道滞留时间太短，许 多药物未完全释放，就已经通过了吸收部位，一般不到 6 h，药物通过胃肠道上段后， 在结肠部位将被逐渐增多的细菌分解，只有极少量药物和代谢物被吸收。因此在胃部和 小肠上段停留时间越长，药物的释放量越大，被吸收药物量就越多[3,4] 。胃排空是影响药 物在胃肠道内滞留时间的主要因素，不可预知的胃排空会使药物吸收产生很大变异，而 [5] 且，过快的胃排空使药物在吸收区内释放不完全，影响药效 。为了减小胃排空因素的 [6] 影响，延长制剂的胃内滞留时间，Davis 等 于 1968 年最早提出了胃漂浮给药系统 Float- ing Drug Delivery System, FDDS 的概念，该系统能显著增加药物在胃肠部的吸收，提高 其生物利用度，具有明显的优势。目前，国内外研究者已经对胃漂浮缓释制剂进行了大 量的研究，国外已经有左旋多巴、安定、环丙沙星等十余个品种上市，国内也有硫酸庆 大霉素、盐酸地尔硫卓等先后上市，其中研究涉及的胃漂浮型缓释剂型包括胃漂浮缓释 [7] 片、胃漂浮缓释胶囊、胃漂浮缓释微球、胃漂浮型缓释微丸等 。 1.2 胃漂浮缓释制剂的特点及漂浮机理 胃漂浮缓释制剂的研究依据是流体动力学平衡原理，给药后，该系统可长时间漂浮 [8-10] 3 在胃液之上 ，是一种特殊的缓释制剂。其密度一般小于 1 g/cm ，或遇到胃液水化后 3 3 [11-14] 的密度小于 1 g/cm 胃内容物密度为 1.004,1.01 g/cm 。由于制剂的密度小于胃内 容物的密度，口服后可长时间漂浮在胃液上，减少胃排空作用的影响，从而延长药物在 胃和小肠上段总的释放时间和吸收时间，提高药物的生物利用度[15-17] 。 胃漂浮片是最常用的漂浮剂型，它一般是由药物、水凝胶骨架材料、起泡剂、助漂 剂和其它辅料制成的。其漂浮机理为:起泡剂与胃液中的酸性物质接触后生成 CO 气体， 2 使制剂的体积膨胀[18] ;助漂剂一般为蜡质材料，它密度小，而且具有疏水性[19] ，两者的 结合使用，能使制剂堆密度减小，缩短其在胃内的起漂时间。水凝胶材料与胃液接触后， 发生水合作用，在漂浮制剂周围形成一层凝胶屏障，随时间延长而不断增厚，维持制剂 1 河北大学理学硕士学位论文 骨架的密度小于胃液的密度，使制剂持漂时间延长[20,21] 。这些辅料的综合应用，使药物 长时间漂浮于胃液上，减少胃排空作用的影响，成为长时间驻留于胃中的药物储库[22,23] 。 图1-1 水凝胶材料的膨胀过程 Fig.1-1 Expansion of the hydrogel material 1.3 胃漂浮缓释制剂常用辅料 1.3.1 水凝胶材料 目前常用的水凝胶材料种类较多，其中纤维素类高分子材料有:羟丙甲纤维素、甲 基纤维素、乙基纤维素、羧甲基纤维素钠等。非纤维素类有:卡波姆、琼脂、海藻酸钠、 壳聚糖、果胶、虫胶等[24-27] 。其中文献报道最多的是以羟丙甲纤维素为水凝胶材料。 1.3.2 起泡材料 为了增加漂浮能力，制剂中常加入起泡材料。常用的起泡材料有碳酸盐或碳酸氢盐， 其中以碳酸钙和碳酸氢钠研究最多[28,29] 。有时单纯使用起泡材料，制剂的漂浮性受胃内 酸度变化影响较大，因此制剂中常按一定比例同时加入酸性物质，如枸橼酸、酒石酸等。 1.3.3 低密度疏水材料 为了缩短片剂的起漂时间，可加入低密度的疏水材料。这种材料的种类和用量对制 剂漂浮性能都有重要影响。常用的有单硬脂酸甘油酯、十六醇、十八醇、蜂蜡和硬脂酸 等。一般低密度疏水材料的密度越小，其助漂能力越强[30,31] 。 1.3.4 膨胀材料 膨胀材料接触胃液后可迅速膨胀，体积可膨胀至原来的几倍甚至几十倍，胃漂浮制 剂中加入这种材料后制剂体积快速膨胀，具有较大的漂浮力。有报道的膨胀材料有交联 2 第 1 章 绪论 聚乙烯吡咯烷酮 PVPP 、聚乙烯吡咯烷酮 PVP 、聚苯乙烯等[32] 。 1.3.5 泡沫材料 泡沫材料是一类外表疏松、多孔粉末状低密度物质，加入胃漂浮制剂可增加制剂漂 浮性能。其中报道过的有硅酸钙、聚丙烯等[32] 。 1.4 胃漂浮缓释制剂的适用性和局限性 [33,34] 与其它剂型相比，以下药物更适合制成胃漂浮制剂 : 1 从胃部吸收的许多酸性 药物，如诺氟沙星、地尔硫卓等; 2 因肠道pH 升高而溶解度降低的药物，如氯氮平、 多潘立酮等; 3 主要在胃或十二指肠中发挥作用的药物 治疗胃溃疡、胃癌及十二指肠 等疾病的药物 ，如复方硫酸庆大霉素、雷尼替丁等; 4 仅在胃或十二指肠吸收的药物， 如双嘧达莫、维生素 B2 等; 5 在肠道高 pH 环境中不稳定的药物，如桂利嗪等。 6 不 受胃酸和胃酶破坏的药物; 7 其它半衰期短、制成缓控式制剂尚不能满足临床要求的药 物。 胃漂浮缓释制剂同时也存在一定的局限性: 1 必须有一定量的胃液才能发挥其疗 效，在服药时和服药后需补充水以增加胃液体积; 2 容易受到人体生理因素，如食物、 体位、性别、年龄等的影响; 3 在酸性的胃液内溶解性差，不稳定或对胃粘膜刺激性大 的药物不能制成此剂型。 1.5 氢溴酸右美沙芬的介绍 氢溴酸右美沙芬又名右甲吗喃、美沙芬、普西兰，最早是由瑞士罗氏公司开发[35] 。 氢溴酸右美沙芬通常被认为是一种无麻醉性、无耐药性、高效、安全的中枢性镇咳药， 其作用与可待因相似或较强，治疗量对呼吸中枢无抑制作用，不产生依赖性和耐受性。 主要用于感冒、急性或慢性支气管炎、支气管哮喘、咽喉炎、肺结核以及其它上 呼吸道感染时的咳嗽，也可用于因吸入刺激性物质引起的干咳[36] 。近年来人们越来越 趋向于用其代替成瘾性较强的可待因治疗咳嗽。 1.5.1 氢溴酸右美沙芬的理化性质 1 化学名[37,38] 英文名:Ent-3-Methoxy-17-methyl-9a, 13a, 14a -morphinan hydrobromide monohydrate 中文名:右旋-3- 甲氧基- 17- 甲基- 9a ，13a，14a - 吗啡喃氢溴酸水化合物 结构式: 3 河北大学理学硕士学位论文 分子式:C H BrNO??H O 18 26 2 分子量:370.3 2 氢溴酸右美沙芬的理化常数[37,38] 外观:白色或类白色结晶性固体粉末，无臭或略有特异臭 溶解度:在乙醇中易溶，在氯仿中溶解，在水中略溶，在乙醚中不溶 酸碱度 0.1g/10mL :5.2-6.5 贮藏:密闭 1.5.2 氢溴酸右美沙芬的药理毒理研究 氢溴酸右美沙芬为吗啡类左吗喃甲基醚的右旋异构体，通过抑制延髓咳嗽中 枢，阻断迷走神经的兴奋而发挥中枢性镇咳作用，镇咳强度与可待因相等或略强[39] ， 其镇咳作用已经在很多动物实验 如荷兰猪、兔子、猫、狗 中得到了证实。其本身无 镇痛作用，不适合作为一种镇痛药单独使用，但适用于超前镇痛以配合阿片类镇 痛药发挥作用，在伤害性刺激给予之前用药，降低机体对疼痛的敏感性，并减少 术后其它镇痛药的需求量及副作用，是作为多方式 multi-modal 镇痛治疗的一部分 [40] 。 氢溴酸右美沙芬在治疗剂量下不会引起呼吸抑制，呼吸道黏膜纤毛的抑制，共济失 调，嗜睡等不良反应。长期应用未见耐受性和成瘾性。口服吸收好，15,30分钟起 [41] 效，在胃肠道迅速吸收，在2.5 h 内即可达到血药峰值 。作用可维持3,6小时。血浆 中的氢溴酸右美沙芬同β-葡萄糖醛酸结合，主要经肝脏代谢[42-44] ，其代谢过程及产物见 图1-2 ，其中右啡烷在血浆中的浓度最高，是主要的活性成分。其它两个代谢产物在 血浆中的浓度很低，药理作用较微甚至可不计。 4 第 1 章 绪论 图1-2 右美沙芬的代谢途径 Fig.1-2 Metabolic pathway of dextromethorphan 毒理学研究表明，在治疗剂量下右美沙芬很少出现毒性反应。当使用剂量达到 20 mg/kg 时，氢溴酸右美沙芬会出现轻微的副作用 如镇静作用、共济失调等 。 长期实验 证明:当连续六个月高剂量给药时，不会出现明显副作用[35] 。 1.5.3 氢溴酸右美沙芬的用药安全性 由于氢溴酸右美沙芬与其受体亲和力低，治疗剂量下很少会出现不良反应，长期使 用无成瘾性和耐受性。较大剂量使用仅有头痛、头晕、胃肠道紊乱等症状，但超大剂 量使用可发生兴奋、精神混乱、呼吸抑制和共济失调等副作用[45] 。因此只要在合理 的剂量范围内，氢溴酸右美沙芬还是没有危险的。 氢溴酸右美沙芬成人口服剂量为每4小时给药10,20 mg ，或者每6,8小时给药30 mg ，通常24小时内的给药剂量不超过120 mg ;6,12岁的儿童每次给药剂量为5-15 mg ， 4,8小时给药1次，24小时内的剂量不超过60 mg ;1,6岁的儿童每4小时给药剂量为2.5, 5 mg ，或者每6,8小时给药7.5 mg ，24小时内的给药剂量不超过30 mg[46] 。只要按照药 品说明书的剂量、次数服用，此药是相对较安全的。 1.6 立依据 目前市售的氢溴酸右美沙芬片剂一般都为速释片 剂量为 15 mg/片 ，对于胃漂浮缓 释片的研究至今未见报道。氢溴酸右美沙芬生物半衰期很短，该药口服后吸收迅速，其 普通片每日需口服 3,4 次，血药浓度波动较大，易引起口干、便秘、恶心等不良反应[47] 。 为延长药物在胃内滞留时间，减少患者服药次数，减轻因药物浓度迅速升高而引起的不 5 河北大学理学硕士学位论文 良反应，提高患者的顺应性，本文选用 HPMC 作为水合凝胶骨架材料 考察了不同 HPMC 的黏度 HPMC K4M，K15M，K100M ，结合助漂剂十六醇、起泡剂碳酸氢钠及其它辅 料，设计了氢溴酸右美沙芬胃漂浮缓释片。本剂型在胃液内漂浮过程中，药物从水凝胶 骨架中扩散或随着骨架的不断溶蚀逐渐释放，从而达到提高生物利用度、减少用药量、 降低用药频率的目的。通过我们的研究，研制出的剂型设计合理，性质稳定，吸收良好， 为该药物进一步开发新剂型提供了依据。 6 第 2 章 氢溴酸右美沙芬胃漂浮缓释片的处方前研究 第 2 章 氢溴酸右美沙芬胃漂浮缓释片的处方前研究 本章确立了 DMB 的体外分析方法，根据药物本身的性质、剂型和工艺的要求，确 立了释放度测定法、含量测定法和漂浮性测定法，为处方设计提供基础。 2.1 仪器和试药 2.1.1 试验仪器 FA1104N 电子分析天平 上海民桥精密科学仪器有限公司 ;752 型紫外-可见分光光 度计 上海恒平科学仪器有限公司 ;UV-2100 双光束紫外-可见分光光度计 北京瑞利分 析仪器公司 ;LC-3000 高效液相色谱仪 北京创新通恒科技有限公司 ;P3000 高压输液 泵 北京创新通恒科技有限公司 ;UV3000 可变波长紫外-可见分光检测器 北京创新通恒 科技有限公司 ;微量进样器 上海高鸽工贸有限公司 ;pHS-3C 型精密 pH 计 上海精密 科学仪器有限公司 ;SZ-93 型自动双重纯水蒸馏器 上海亚荣生化仪器厂 ;KQ3200B 型 超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司 ;ZRS-8G 智能溶出试验仪 天津海益达科技有 限公司 ;101-2A 型电热鼓风干燥箱 天津市泰斯特仪器有限公司 。 2.1.2 药品及试剂 氢溴酸右美沙芬对照品 中国药品生物制品检定所 ;氢溴酸右美沙芬原料 上海定康 药业有限公司 ;磷酸 天津市美琳工贸有限公司 ;三乙胺、乙腈 天津市科密欧化学试 剂有限公司 ;盐酸 天津市翔宇化工工贸有限责任公司 ;所用水均为三蒸水，其余均为 分析纯或药用规格。 2.2 释放度测定方法的建立 根据 《国家食品药品管理局国家药品》WS - X-365 -2003Z ，氢溴酸右美沙芬 1 缓释片质量标准对释放度的检查方法做了规定，参考此该方法对研制的氢溴酸右美沙芬 胃漂浮缓释片进行了释放度的检查，并进行了必要的方法学验证。 2.2.1 检测波长的选择 精密称取 DMB 对照品适量，加入 pH 1.2 的盐酸溶液 模拟人工胃液 制成适宜浓度 的DMB 对照品溶液，并配制不含原料药的辅料溶液，然后在 200 nm~760 nm 波长范围 内多次进行光谱的连续扫描。DMB 对照品溶液在278 nm 波长处有最大吸收，而辅料溶 7 河北大学理学硕士学位论文 液和空白盐酸溶液在此波长范围内几乎无吸收，对测定无干扰。故选择278 nm 作为DMB 的释放度测定波长。 2.2.2 介质的选择 我们参考胃漂浮缓释片释放度测定的相关文献[48,49] ，采用 pH 1.2 的盐酸溶液为释 放 介质，以考察氢溴酸右美沙芬胃漂浮缓释片的释放度。 2.2.3 标准曲线的绘制 精密称取干燥至恒重的 DMB 对照品 50.8 mg ，置 100 mL 量瓶中，加 pH 1.2 的 盐酸 溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，过滤，分别精密量取 0.5 mL、1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、 5 mL 、6 mL ，置 25 mL 量瓶中，稀释至刻度，摇匀，分别在 278 nm 波长处测定吸收度， 以吸收度对浓度作标准曲线，试验结果见表 2-1。 表2-1 线性关系试验结果 Tab.2-1 Absorbance value of different concentrations of DMB 浓度 μg/mL 10.16 20.32 40.64 60.96 81.28 101.60 121.92 吸收度 A 0.052 0.113 0.215 0.326 0.434 0.530 0.634 线性方程 A 0.0052C + 0.0033 相关系数 r 0.9996 由表 2-1 可知:DMB 在 10. 16,121.92 μg/mL 浓度范围内与其吸收度呈良好线 性关系 。 2.2.4 回收率试验 精密称取DMB对照品及相应处方量的辅料模拟胃漂浮缓释片片粉，加入pH 1.2的盐 酸溶液并超声至DMB完全溶解，滤过，分别制成64、80、96 μg/mL系列浓度的溶液，以 pH 1.2的盐酸溶液为空白对照，于278 nm处测定吸光度A 。照标准曲线方程求得DMB 的 浓度，将测得值与投入值比较计算回收率，结果见表2-2 。 表2-2 回收率试验结果 n 3 Tab.2-2 Recovery of DMB in dissolution medium n 3 投入量 测得量 回收率 平均回收率 RSD μg/mL μg/mL % % % 64.32 64.32 100.00 63.84 64.06 100.35 99.93 0.45 64.16 63.81 99.45 8 第 2 章 氢溴酸右美沙芬胃漂浮缓释片的处方前研究 表2-2 回收率试验结果 n 3 续 Tab.2-2 Recovery of DMB in dissolution medium n 3 continue 投入量 测得量 回收率 平 均回收率 RSD μg/mL μg/mL % % % 79.52 78.68 98.94 79.04 79.06 100.03 99.61 0.59 79.68 79.58 99.87 96.64 97.14 100.52 96.16 95.79 99.62 100.16 0.48 95.84 96.18 100.35 结果表明该法回收率高，符合方法学要求。 2.2.5 精密度试验 取 2.2.4 项下配制的高、中、低 3 种浓度的供试液各 1 份，测定吸光度值。一天内 重复测定 6 次，计算日内精密度;每天测定一次，连续 6 天，计算日间精密度。结果见 表 2-3 。本法的精密度良好。 表2-3 DMB 溶液的精密度试验 n 6 Tab.2-3 Intra- and inter-day precision of method for determination of DMB n 6 理论浓度 μg/mL 日内精密度测得浓度 μg/mL 日间精密度测得浓度 μg/mL Mean RSD % Mean RSD % 64.32 64.77 1.09 64.04 2.28 79.52 79.65 0.86 80.04 2.33 96.64 96.81 0.72 96.38 1.22 2.2.6 稳定性测定 取 2.2.4 项下配制的 80 μg/mL 浓度的供试液 1 份，照紫外-可见分光光度法，在 0， 2 ，4 ，6，8，12，24 h 测定吸光度，计算 RSD ，考察样品溶液在 25 ?下的稳定性。 结 果见表 2-4 ，样品溶液在 24 h 内符合稳定性要求。 表2-4 DMB 胃漂浮缓释片在释放介质中稳定性 n 3 Tab.2-4 Stability of DMB in dissolution medium n 3 时间 h 0 2 4 6 8 12 24 吸收度 A 0.414 0.416 0.419 0.419 0.409 0.415 0.420 RSD % 0.89 9 河北大学理学硕士学位论文 2.2.7 释放度测定法 按中国药典20 10年版二部附录XC溶出度测定法第三法 小杯法 装置，取DMB 胃漂 浮缓释片6片放入溶出杯中，释放介质为新鲜脱气的pH 1.2 的盐酸溶液。温度保持在 37.0 ? 0.5 ?，转速为50 r/min ，依法操作，分别于0.5、1、2 、3、4 、6、8、12 h 取样 5 mL 同 时补充等量同温介质 [50] 。用0.45 μm微孔滤膜过滤后，取续滤液以 pH 1.2 的盐酸溶 液作 空白，于278 nm处测定吸收度，计算药物浓度，并计算每片在各时间点的累积释放量。 2.3 胃漂浮缓释片含量测定方法的建立 2.3. 1 检测波长的选择 精密称取 DMB 适量，用流动相配置成适宜浓度的溶液，在 200,760 nm 波长处进 行扫描，DMB 在 278 nm 处有最大吸收;同法操作配置空白辅料溶液，278 nm 进行扫 描，空白辅料在此处无干扰，因此，将 278nm 做为氢溴酸右美沙芬胃漂浮缓释片含量检 查的检测波长。 2.3.2 色谱条件 色谱柱:Venusil XBP-C18 柱 4.6×250 mm，5 μm ;流动相:0.5%三乙胺溶液- 磷酸 调节 pH 至 3.5 -乙腈 75:25 ，v/v [51] ;检测波长:278 nm;流速:1.0 mL/min ;柱温:室 温;进样量:20 μL。 2.3.3 系统适用性试验 分别取 DMB 模拟片粉的样品溶液和空白辅料溶液，照 2.3.2 项的色谱条件，精密量 取 20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果 DMB 得到有效的分离，保留时间为 8.048 min，理论板数为 11195，拖尾因子为 1.26，主峰与杂质峰能够完全分离，分离度远大于 1.5，空白辅料不干扰 DMB 的色谱峰。 A 10 第 2 章 氢溴酸右美沙芬胃漂浮缓释片的处方前研究 B 图2-1 DMB 高效液相色谱图 A :DMB 处方样品;B:空白辅料 Fig.2-1 HPLC chromatograms of DMB A: the sample of DMB; B: negative sample 2.3.4 线性关系 精密称取干燥至恒重的 DMB 对照品 50.4 mg ，置 100 mL 量瓶中，加流动相溶解并 稀释至刻度，摇匀，精密量取 1.0、2.0 、3.0、4.0 、5.0、6.0、8.0 mL ，分别置 25 mL 量 瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。分别精密量取 20 μL 注入液相色谱仪，记录色谱图。 以峰面积A 对浓度 C μg/mL 作线性回归，结果见表 2-5 。 表2-5 DMB 含量测定线性关系测定结果 Tab.2-5 Linear scope of DMB for determination 浓度 μg/mL 20. 16 40.32 60.48 80.64 100.80 120.96 161.28 峰面积 A 123984 251362 368327 496217 621255 743266 994873 线性方程 A 6152.1C C 1611.3 相关系数 r 0.9998 结果表明:DMB 在 20. 16,161.28 μg/mL 浓度范围内，峰面积与浓度呈良好的线性 关系。 2.3.5 精密度 取 DMB 适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每 1 mL 中含DMB 100 μg 的 溶 液，摇匀，过滤。精密量取 20 μL 注入液相色谱仪，记录色谱峰面积。一天内重复测定 6 次，计算日内精密度，RSD 值为 1.62%;每天测定一次，连续 6 天，计算日间精密度， 求得 RSD 为 1.87%。即采用本法测定 DMB 胃漂浮缓释片的日内精密度和日间精密度均 较好。 2.3.6 回收率 分别精密称取DMB约80 mg 、100 mg和120 mg各3份，并按处方量加入各种辅 料， 置于100 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，超声使DMB完全溶解，摇匀，滤过，精密 量取续滤液1 mL，置10 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，依据上述液相条件测定，以 11 河北大学理学硕士学位论文 测得量与投入量比较，计算回收率，结果见表2-6 。 表2-6 DMB 含量测定回收率试验数据 Tab.2-6 Analytical recovery for determination of DMB 投入量 测得量 回收率 平均回收率 RSD μg/mL μg/mL % % % 80.96 80.33 99.22% 79.84 80.03 100.24% 99.69 0.51 82.08 81.75 99.60% 101.12 100.74 99.62% 100.64 101.85 101.20% 99.74 1.41 101.28 99.64 98.38% 120.48 121.79 101.09% 119.68 120.17 100.41% 100.32 0.82 121.28 120.62 99.46% 由上表可见，用该方法测定 DMB 含量，回收率良好。 2.3.7 溶液稳定性 取 “2.3.6 回收率”项下配制的 100 μg/mL 浓度的样品 1 份，在 25 ?条件下放 置 0、 1、2 、4 、6、8、12 h，于相应时间点分别精密量取 20 μL 注入液相色谱仪，量取峰面 积， 计算峰面积响应变化，结果见表 2-7 。 表2-7 DMB 胃漂浮缓释片溶液稳定性试验结果 Tab.2-7 Stability for determination of DMB 时间 h 0 1 2 4 6 8 12 峰面积 A 621552 623652 616246 605772 613849 597084 608587 平均面积 A 612392 RSD % 1.52 结果表明:峰面积变化 RSD 值为 1.52%，表明样品溶液在室温条件下 12 h 基本稳 定。 2.3.8 含量测定法 取 DMB 胃漂浮缓释片20 片，研细，精密称取细粉 约含 DMB 10 mg ，置 100 mL 量瓶中，加入流动相 70 mL，超声使药物完全溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，用 0.45 μm 微孔滤膜过滤，精密量取 20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图;另取 DMB 对照品 12 第 2 章 氢溴酸右美沙芬胃漂浮缓释片的处方前研究 适量，精密称定，加流动相溶解并稀释成每 1 mL 中含 100 μg 的溶液，摇匀，作为对照 品溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算并将计算结果乘以 1.051，即得。 2.4 胃漂浮缓释片漂浮性能的测定 按中国药典20 10 年版二部附录 XC 溶出度测定法第三法装置，转速 50 r/min ，温度 为 37.0 ? 0.5 ?，分别以新鲜脱气的 pH 1.2 的盐酸溶液 模拟胃的空腹状态 ，和 pH 分 [4] 别为 3.0、5.0 的盐酸溶液 模拟胃的饱腹状态 为漂浮介质 ，投入 DMB 胃漂浮缓释片6 片，立即计时，记录各片上浮到液面所需的时间 起漂时间 和再次下沉所需的时间 持漂 时间 ，取平均值[52] 。 2.5 小结 本章首先建立了操作简单、定量准确的紫外-可见分光光度法测定 DMB 胃漂浮缓释 片的释放度，确定以 278 nm 作为测定波长，pH 1.2 的盐酸溶液为释放介质，对其进行 了方法学验证，并对药物在不同放置时间的稳定性进行了考察，该药在 24 h 内保持稳定。 选取专属性强的高效液相法测定体外药物含量。分别进行了线性试验、精密度试验、 回收率试验、溶液稳定性试验等方法学考察，结果表明此方法重现性好，准确度高。 在漂浮性能的测定试验中，确定了以不同pH 的盐酸溶液为漂浮介质，并以起漂时 间和持漂时间作为漂浮性能的测定指标。 13 河北大学理学硕士学位论文 第 3 章 氢溴酸右美沙芬胃漂浮缓释片的处方工艺研究及其 本文在参考大量文献的基础上，以胃漂浮缓释片的释放度、漂浮性、物理性质 硬 度、脆碎度、药物含量、片重差异 等为评价指标，对影响胃漂浮缓释片的各个可能因 素进行预实验，并通过正交实验筛选出了最佳处方工艺。 3.1 仪器和试药 3.1.1 试验仪器 FA1104N 电子分析天平 上海民桥精密科学仪器有限公司 ;TDP 型单冲压片机 上 海天凡药机制造厂 ;PYC-A 型片剂硬度仪 上海黄海药检仪器厂 ;ZRS-8G 型智能药物 溶出仪 天津海益达科技有限公司 ;CS-2 脆碎度测试仪 天津市光学仪器厂 ;101-2A 型 电热鼓风干燥箱 天津市泰斯特仪器有限公司 ;药物稳定性检查仪 天津市鑫洲科技有限 公司 。 3.1.2 药品及试剂 氢溴酸右美沙芬对照品 中国药品生物制品检定所 ;氢溴酸右美沙芬原料 上海定康 药业有限公司 ;羟丙甲纤维素 HPMC ，规格分别为K4M ，K15M ，K100M ;上海卡乐 康包衣技术有限公司 ;碳酸氢钠 天津美琳工贸有限公司 ;十六醇 天津华东试剂厂 ; 微晶纤维素 MCC ，湖州展望药业有限公司 ;乙基纤维素 EC，规格100cps，上海卡乐 康公司 ;乳糖 淮南山河药用辅料有限公司 ;盐酸 天津市翔宇化工工贸有限责任公司 ; 硬脂酸镁 天津市天大化工实验厂 ;95% 乙醇 天津市华东试剂厂 ;其余均为分析纯或药 用规格。 3.2 DMB 胃漂浮缓释片的制备工艺 将各辅料分别过100 目筛，按处方量称取DMB及辅料，充分混合均匀，加入适量粘 合剂制软材后，用24 目筛制粒，于40?干燥约6 h ，用20 目筛整粒，采用外加法加入适量 硬脂酸镁，充分混匀后，压片，每片含30 mg DMB 。 14 第 3 章 氢溴酸右美沙芬胃漂浮缓释片的处方工艺研究及其评价 3.3 工艺流程图 DMB 及其它 内加辅料 快速混匀器 95%乙醇 混合物 乙基纤维素 粘合剂 24 目筛制粒 湿颗粒 烘箱 40?干 燥 6 h 干颗粒 硬脂酸镁 20 目筛整粒 压片 检验合格 包装 成品 3.4 制备因素对胃漂浮缓释片的影响 3.4.1 制备工艺的影响 片剂的制备工艺一般有三种:湿法制粒压片，干法制粒压片和粉末直接压片[53] 。为 考察制备工艺对 DMB 胃漂浮缓释片的影响，结合实验室条件，我们分别采用湿法制粒 15 河北大学理学硕士学位论文 压片和粉末直接压片两种不同工艺，并测定其释放度和漂浮性，漂浮性结果见表 3-1， 释放曲线见图 3-1。 表3-1 制备工艺对漂浮性的影响 n 6 Tab.3-1 Eeffet of preparation method on the floation of DMB-SR floating tablet n 6 制备工艺 湿法制粒压片 粉末直接压片 起漂时间 s 76.75 ? 3.01 62.36 ? 5.69 持漂时间 h 24 24 100 e s 90 a e l 80 e r g 70 u r 60 d % 50 湿法制粒压片 e 40 粉末直接压片 v i t 30 a l u 20 m u 10 C 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Time h 图3-1 制备工艺对释放度的影响 n 6 Fig.3-1 Eeffet of preparation method on the rlease of DMB-SR floating tablet n 6 由以上实验数据可知，粉末直接压片和湿法制粒压片制得的片剂释放度相差不大。 其起漂时间均在 3 min 以内，持漂时间大于 24 h 。但考虑到实际生产中，粉末直接压片 容易使粉尘飞扬及粉末在器壁上的粘着，造成污染环境和原料的损失，且由于粒度、密 度的差异而引起的分离现象，不利于大规模的生产，故选择湿法制粒压片作为制备工艺。 3.4.2 片剂硬度的影响 在 DMB 胃漂浮缓释片的研制过程中，我们发现改变压力直接影响片剂的外观，漂 浮性能与释药性能。为考察片剂硬度对漂浮片的影响，我们选择同一处方，在保证片剂 2 2 2 光洁成型的基础上，分别采用不同压力 7 kg/cm 、9 kg/cm 、10 kg/cm 分别压制胃漂浮 缓释片，并测定其释放度和漂浮性，漂浮性结果见表 3-2 ，释放曲线见图 3-2 。 16 第 3 章 氢溴酸右美沙芬胃漂浮缓释片的处方工艺研究及其评价 表3-2 片剂硬度对漂浮性的影响 n 6 Tab.3-2 Eeffet of compression force on the floation of DMB-SR floating tablet n 6 2 2 2 压力 7 kg/cm 9 kg/cm 10 kg/cm 起漂时间 s 47.70 ? 4.73 76.75 ? 3.01 154.76 ? 27.05 持漂时间 h 15 24 24 100 e s 90 a e l 80 e r g 70 u r 60 d 7kg/cm2 50 2 % 9kg/cm e 40 2 v 10kg/cm i t 30 a l u 20 m u 10 C 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Time h 图3-2 片剂硬度对释放度的影响 n 6 Fig.3-2 Eeffet of compression force on the rlease of DMB-SR floating tablet n 6 从释放曲线看出，所选择的硬度对释放度的影响不明显，当硬度较大时药物的释放 速率有所减慢。随压力的增大，起漂时间明显延长。这是由于压力大时，片剂密度增加， 片子的孔隙率低，胃液不易进入内部，产生 CO2 的量相对较少，起漂时间延长。控制所 2 制备片剂的硬度，使硬度值在 9 kg/cm 左右时，既能保证片剂的释放度较好，又能使片 剂快速起漂。 3.5 处方因素对胃漂浮缓释片的影响 3.5.1 HPMC 种类的影响 凝胶材料 HPMC 与胃液接触，胃液渗入凝胶材料内部发生水化作用，在片 剂周围 形成一层稠厚的凝胶屏障。在胃漂浮缓释制剂的制备中，理想的凝胶材料应具亲水性和 合适的水化速率，达到制剂起漂时间短、持续漂浮时间长、释放速率合适的要求[27] 。本 文分别采用规格为 K4M、K15M、K100M 的羟丙甲纤维素作为胃 漂浮缓释片的凝胶材 17 河北大学理学硕士学位论文 料，用量均按 25 mg/片，加入 DMB 和其它辅料，照 “3.2 DMB 胃漂浮缓释片的制备工 艺”压片，考察不同规格 HPMC 对释放度和漂浮性的影响，漂浮性见表 3-3，释放曲线 如图 3-3 。 表3-3 不同规格的HPMC对漂浮性的影响 n 6 Tab.3-3 Eeffet of viscosity of HPMC on the floation of DMB-SR floating tablet n 6 HPMC种类 HPMC K4M HPMC K15M HPMC K100M 起漂时间 s 76.75 ? 3.01 99.13 ? 2.45 107.74 ? 4.56 持漂时间 h 24 24 24 100 e s 90 a e l 80 e r g 70 u r 60 d % 50 HPMC K4M e 40 HPMC K15M v i t 30 HPMC K100M a l u 20 m u 10 C 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Time h 图3-3 不同规格的HPMC对释放度的影响 n 6 Fig.3-3 Eeffet of viscosity of HPMC on the rlease of DMB-SR floating tablet n 6 由图3-3 中所示的结果可见，三种规格的HPMC均能起到缓释作用，但以HPMC K4M、HPMC K15M为凝胶材料时的释药速率明显快于以HPMC K100M为凝胶材料的片 剂。这是因为凝胶材料的分子量越大，凝胶层黏度增加，药物在其中的扩散系数减小， 且HPMC 的溶蚀速度也随黏度的增加而减小，药物的释放减慢。 由不同规格的HPMC对漂浮性的影响结果可看出:三种黏度的HPMC都可使胃漂浮 片的持漂时间大于24 h，但起漂时间随黏度的增加而延长，用HPMC K4M时起漂时间最 短，这是因为小分子材料水化速率快，形成凝胶屏障的速度也快，因此能很快起漂。 综合对DMB 胃漂浮缓释片漂浮性和释放度两种因素的影响，本实验选择了HPMC K4M作为水凝胶材料。 18 第 3 章 氢溴酸右美沙芬胃漂浮缓释片的处方工艺研究及其评价 3.5.2 HPMC K4M 用量的影响 其它辅料和制备方法不变，制备每片 HPMC K4M 的用量分别为 10，25 和 40 mg 的DMB 胃漂浮缓释片，并按上述方法考察不同用量的HPMC K4M 对释放度和漂浮性 的影响，漂浮性见表 3-4 ，释放曲线如图 3-4 。 表3-4 不同用量的HPMC K4M对漂浮性的影响 n 6 Tab.3-4 Eeffet of amount of HPMC K4M on the floation of DMB-SR floating tablet n 6