BAFF在B细胞恶性血液肿瘤中的表达及意义

BAFF在B细胞恶性血液肿瘤中的表达及意义 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师或指导小组的指导下,由本人独立完成。 本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所 有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表 与学位论文主要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试 验、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。 否则,承担相应的法律责任。 研究生签名:虱协皂导师签章 多日 河北医科大学 研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了 文中特别加以标注等内容外,文中不包含其他人已发表或撰写的研究 成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。 导师签章: 研究生签名:了从袁乏 年否月多日目 录 中文摘要? 英文摘要? 研究论文在细胞恶性血液肿瘤中的表达及意义 前言 日昌??‘ 材料与? 结果:?一 附图 附表讨论结论参考文献综述细胞激活因子在细胞恶性血液病中的研究进展 致谢 个人简历中文摘要 在细胞恶性血液肿瘤中的表达及意义 摘 要 目的:检测细胞激活因子 师 在细胞恶性血液肿瘤,主要包括急性淋巴细胞白血病,、慢性淋巴细胞白血病 ,、多发性骨髓瘤 ,、淋巴 瘤患者血浆中的浓度;比较疾病治疗前后血浆可溶性 蛋白浓度的变化;分析与细胞恶性肿瘤临床肿瘤负荷间的相关 性。 方法: 研究对象:例患者,例患者,例患者,例 淋巴瘤患者及名健康者作为正常对照组。其中患者例,男 例,女例,年龄范围?岁,中位年龄岁,初治者例,复发 者例,缓解者例。患者例,男例,女 例,年龄范围 ~岁,中位年龄岁,初治者例,治疗后例。患者例, 男例,女例,年龄范围~岁,中位年龄岁,初治者 例, 治疗后未缓解者例,治疗后缓解者例。淋巴瘤患者例,男例, 女例,年龄范围 ~岁,中位年龄岁,初治者例,治疗后 例。正常对照组例,均取自常规体检正常的人群,男例,女例, 年龄范围 ~岁,中位年龄岁。 研究方法:用. 法检 测各实验对象血浆可溶性的表达,收集患者基本临床资料进行分析。 结果: 血浆可溶性在各组中的表达 . 初治组血浆含量高于正常对照组,两组之间比较差异有统 计学意义.士. .士.,.;复发组血 浆含量高于正常对照组,两组之间比较差异有统计学意义 .士.坶. .,.;缓解组血浆 含量高于正常对照组,两组之间比较差异无统计学意义..中文摘要 . .,.;初治组血浆含量低于复发组, ..。 两组之间比较差异无统计学意义.. .;缓解组血浆含量低于初治组,两组之间比较差异有 ..,.;缓解组 统计学意义.. 血浆含量低于复发组,两组之间比较差异有统计学意义 .. ..,.。 . 初治组血浆含量高于正常对照组,两组之间比较差异有统 . 计学意义.. .,.;治疗后未 缓解组血浆含量高于正常对照组,两组之间比较差异有统计学意义 .. . .,.;治疗后缓解组血浆 含量高于正常对照组,两组之间比较差异无统计学意义 . . . .,.;治疗后未缓解组血浆 含量低于初治组,两组之间比较差异无统计学意义 ..,.;治疗后缓解组血浆 .士. . 含量低于初治组,两组之间比较差异有统计学意义. ..,.;治疗后缓解组血浆含量低于治 疗后未缓解组,两组之间比较差异有统计学意义.. ..,.。 .淋巴瘤初治组血浆含量高于正常对照组,两组之间比较差异有 . 统计学意义.. %,.;淋巴瘤治疗 后组血浆含量高于正常对照组,两组之间比较差异有统计学意义 . .. .,.;淋巴瘤治疗后组血浆 含量低于初治组,两组之间比较差异有统计学意义 .士. ..,.。 . 初治组血浆含量高于正常对照组,两组之间比较差异无统 . .,.;治疗后组 计学意义.. 血浆含量高于正常对照组,两组之间比较差异无统计学意义 . .. .,.;治疗后组血浆 含量低于初治组,两组之间比较差异有统计学意义.. ..,.。 、、淋巴瘤、各组血浆含量与血清含量间的 中文摘要 相关系数分别为一.,一.,.,.,均无统计学意义。 、、淋巴瘤、各组血浆含量与血清.含量间 的相关系数分别为.,.,.,.,其中及组血浆 与血清.成正相关,余无统计学意义。 患者血浆含量与骨髓中浆细胞所占百分比相关系数为., 有统计学意义。 患者血浆含量与血清的相关系数为.,无统计学意义。 结论: 血浆含量在初治或复发、、淋巴瘤组中均高表达,这提 示可能参与上述细胞恶性血液肿瘤的发病过程,并在其中发挥 作用。 血浆含量在治疗后缓解的、及治疗后的组均明显 下降,说明在上述细胞恶性血液肿瘤的不同阶段发生动态变化, 有希望用作、、治疗疗效及复发的监测指标。 血浆含量在初治组无明显高表达,治疗后仍高于正常对照 组,推测在细胞恶性血液疾病中可能主要是通过作用于非成熟 淋巴细胞发挥作用的。 、、淋巴瘤、者血浆含量与均无相关性,除 组及组外,血浆含量与.均无相关性,患者血 浆含量与骨髓浆细胞所占百分比成正相关关系,与无关。我们 的实验数据显示,目前尚不能将视为判断上述疾病肿瘤负荷及预后 的独立指标。 关键词:;细胞;恶性血液肿瘤;英文摘要 . ”‘ ?:, ? ,, , . , . : , , , ., , , , . , , ,, ., , ,, ? . , , , ,? . , , . . , :... .士.,., 英文摘要.士 .. .,., . . . . 士 . ,加., . .. . . ,尸.,.. .. ,., .. ..,.,. . . .. .,., .. ..,.,. 士 . . .士 .,加., .士 .. ..,., . . ..,.,? . . .士 .,., . .. .. ., . ,? . .. 士 .,.,?. 士 .英文摘要 . . .士 .,. ,. . .士. .,., . .,., .士... ? 士.. .士.,., , ,, : 一.,一.,.,.尸.. 一 :.,.尸.. ,.,. 一 :. ?.. , 。 .尸..,,.. .. :, ., ., . ?,. ,, , ? , 英文摘要 . ,,, .一 ..:; ;:研究论文 在细胞恶性血液肿瘤中的表达及意义 .?上圣 翮 置细胞激活因子 ,还被 称为 ,是肿瘤坏死因子 年被发现和克隆。在正常生理条 超家族成员,于 件下,在细胞的存活、增殖、细胞的抗体产生及抗体类型转换中有重要作用, 有个受体,分别为 ,、 和?,这个受 体均含有与配体相结合的半胱氨酸富集区,却不含死亡区域的功能区,因 此,与结合后,均不能诱导细胞凋亡,但是可通过激活..等促 进细胞生长、分化和成剽?。分子的存在形式有两种,分别为膜结 合型及可溶性型。在调节多种自身免疫性疾病及细胞恶性血液肿瘤的 发病中,占有重要地位,因而,近几年来对及其受体的研究 很受重视。 细胞恶性血液肿瘤主要包括急性淋巴细胞白血病 ,、多发性骨髓瘤 ,、淋巴瘤 、慢性淋巴细白血病 ,。 为淋巴细胞系前体细胞克隆性增生的恶性血液疾病,约占急性白血病的 %,中约%.%为前.。目前的发病机制尚不十分明 确。也属于细胞系的恶性肿瘤,约占造血系统肿瘤的%,我国 发病率约为/万,低于欧美国家的/万,但是近年来发病率有 上升趋势。淋巴瘤是原发于淋巴结或淋巴组织的恶性肿瘤,有淋巴细胞和 或组织细胞的大量增生,近年发病率有上升趋势。根据病理组织学的不 同,淋巴瘤可分为霍奇金淋巴瘤 ,和非霍奇金淋巴 %左右, 瘤 ,大类,在我国淋巴瘤中占 而大约占%,一般认为主要来源于细胞,大多数的 来源于细胞。其病因及发病机制尚待进一步阐明。是淋巴细胞系 中某些免疫功能不全的淋巴细胞恶性增殖性疾病,%以上为细胞研究论文 型,其血液形态学表现包括外周血中淋巴细胞计数的绝对增多,细胞形态 如正常小淋巴细胞,骨髓中淋巴细胞亦明显增多,国内以%为诊断标 准,而国外则以%作为诊断,而原始淋巴细胞%,幼稚淋巴细 胞%【,这说明患者是以成熟淋巴细胞增多为特征的。随着部分 靶向治疗药物如甲磺酸伊马替尼格列卫、.,靶向治疗 药物硼替佐米万珂,靶向治疗.药物阿仑单抗,以及利妥昔单抗美 罗华在细胞性疾病中的应用,治疗上取得了不小的进步,但长期生存 率仍较低,其治疗前景有赖于阐明宿主药物遗传学因素、从分子水平上揭 示发病机制。 本研究旨在采用方法检测细胞恶性血液肿瘤血浆的 表达水平,并与标志肿瘤负荷的实验室指标进行相关性分析,以期待 成为细胞恶性血液肿瘤诊断、评价疗效、判断预后的新指标,亦 将成为有前景的治疗新靶标。 材料和方法 材料 .仪器 仪器名称与型号 产地 一?低温冰箱 日本公司 德国公司 台式离心机 酶标仪 北京六一厂 哈尔滨东联公司. 恒温水浴箱. .试剂 名称 产地 人家族的细胞活化 上海郎顿生物技术有限公司 因子试剂盒 .研究对象: 包括例患者,例患者,例患者,例淋巴 瘤患者及名健康者作为正常对照组 ,。实验组标本研究论文 均取自河北医大二院血液内科年月至月期间住院或门诊患者, 其中患者共例,男例,女例,年龄范围乱岁,中位年 龄为岁,初治者例,复发者例,缓解者例。患者共 例,男例,女例,年龄范围~岁,中位年龄为岁,初治者 例,治疗后未缓解者例,治疗后缓解者例。淋巴瘤患者共例, 男例,女例,年龄范围 岁,中位年龄为岁,初治者 例,治疗后例。患者共例,男例,女例,年龄范围~ 岁,中位年龄为岁,初治者例,治疗后例。所有、、 和淋巴瘤的诊断及疗效标准均参照张之南主编的《血液病诊断及疗效 标准》,且所有进入实验组的患者均排除了感染性疾病、免疫风湿性疾 病、糖尿病等。正常对照组例,均取自常规体检正常的人群,男例, 女例,年龄范围~岁,中位年龄岁。上述标本均为外周血。 研究方法 .分组设计 将研究对象分为、、淋巴瘤、组及正常对照组。 组又分为初治组、复发组及缓解组,组又分为初治组、治疗后未缓解 组、治疗后缓解组,淋巴瘤组及组又分别分为初治组及治疗后组。 应用法测定各研究对象血浆蛋白的表达量。 .实验方法 .. 、、淋巴瘤、组及正常对照组血清含量的测定。 ...标本搜集 各组研究对象均采取静脉血毫升,采皿后立即置于抗凝管中, 放置小时后,收集上层清澈的血浆置于高压蒸汽灭菌后的管中,于 一?低温冰箱中保存备用。 ...实验步骤 操作按试剂盒说明书进行。试剂盒从。取出后,开启前先在室温下平衡 分钟,实验中具体操作步骤如下: 加样:空白孔中不加任何样品及试剂,在酶标包被板上的标准孔中加 入稀释好的标准品,在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 ,然后再加待测样品。轻轻晃动混匀,?温育分钟。 洗板:甩尽板内液体,每孑满稀释后的洗涤液,振荡秒,甩去研究论文 洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复洗涤次,拍干。 每孔加入酶标试剂山,空白孔除外。轻轻晃动混匀,。温育 分钟。 洗板:甩尽板内液体,每孔加满稀释后的洗涤液,振荡秒,甩去 洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复洗涤次,拍干。 每孔先加入显色剂,,再加入显色剂,轻轻振荡混匀, ?避光显色分钟。 取出酶标板,每孔加终止液山,轻轻混匀秒,终止反应此时孔 中颜色立即由蓝色变为黄色。 测定:以空白孔调零,在波长下测量各孔的吸光度值值。 测定应在加终止液后分钟内进行。 以值为纵坐标,以标准样品浓度为横坐标,绘制标准曲线,根据 细胞培养液上清液的值在标准曲线上查出细胞因子的浓度。 .统计学分析 对所有数据使用骈髑.软件统计进行分析,各实验数据均进行正 态性及方差齐性检验,服从正态性及方差齐性的,两组间进行比较用检 验,多组间比较用单因素方差分析进行检验,不符合正态性或方差齐性条 件的进行秩和检验,检验水准取.,.为差异非常显著,. 为差异显著,.无显著差异。定义结果时,符合正态性分布的数据 用均数?标准差;士表示,不符合正态分布的则以中位数表示。 进行两变量的相关性分析时,符合双变量正态性分布的计算相关 系数,不符合双变量正态分布的则计算相关系数,检验水准取 .。 结 果 ‘ 分析临床资料 例初治患者中有例进行血清一的检测,其中./ 的有例,./的例有例,例复发患者血清一的检 测示均./,例缓解者均./。例初治患者中有 例进行血清的检测,其中/的例,/的例,例研究论文 复发患者中有例进行血清的检测其中例帆,例 /,例缓解者中有例进行血清的检测,例均饥。 例初治患者中型例,型例,型例,轻链型 例,轻链型例,期组例,期组例,浆细胞白血病例, 血清.冬./的有例,./的有例,例中有例进行 血清的检测,其中/的有例,/的有例,例初 治患者骨髓浆细胞所占百分比为..,例初治/患者 中有例进行血清的检测,其平均含量为./。例治疗后未缓 解的患者中型例,型例,轻链型例,例未分类, 期组例,期组例,期组例。例中有例进行血 清一测定,其中例./,例./,例中有例进 行血清的检测,其中/的有例,/的有例。 例治疗后未缓解的患者中有例进行骨髓细胞形态学检查,其骨髓 浆细胞所占百分比的中位数为.,例初治后未缓解的患者中有 例进行血清的检测,其含量的中位数为.‖。例缓解的 患者中型例,型例,型例,九轻链型例,?期组 例,期组例,血清. 例./,例./,例中 有例进行血清的检测,其中/的有例,/的有 例。例缓解的患者骨髓浆细胞所占百分比平均为.., 例缓解组患者中有例进行血清的检测,其含量的中位数为. ‖。例初治淋巴瘤患者中血清.例叠./, ./, 例均进行血清的检测,其中例立/,/的有例。 例治疗后淋巴瘤患者中血清.含量有例?./,例 ./,例进行血清的检测,其中例/,例/。 例初治患者中有例进行血清.的检测,例./, 例.,例进行血清的检测,其中例均/。例治 疗后患者中有例进行血清.的检测,其中例./, 例./,例中有例进行血清的检测,其中例/, 例/。 血清水平在各实验组中的比较’ . 初治组血浆含量高于正常对照组,两组之间比较差异有统研究论文 ..,.;复发组血 计学意义.. 浆含量高于正常对照组,两组之间比较差异有统计学意义 . .. .,.;缓解组血浆 含量高于正常对照组,两组之间比较差异无统计学意义.. . 初治组血浆含量低于复发组, .,. ... 两组之间比较差异无统计学意义.. .;缓解组血浆含量低于初治组,两组之间比较差异有 统计学意义.士. ..,.;缓解组 血浆含量低于复发组,两组之间比较差异有统计学意义. . ..,.。结果见附表、附表、附表。 . 初治组血浆含量高于正常对照组,两组之间比较差异有统 计学意义.. ..,.;治疗后未 缓解组血浆含量高于正常对照组,两组之间比较差异有统计学意义 治疗后缓解组血浆 .:. ..,. 含量高于正常对照组,两组之间比较差异无统计学意义 .. ..,.;治疗后未缓解组血浆 含量低于初治组,两组之间比较差异无统计学意义 .. ..,.。治疗后缓解组血浆 含量低于治疗后未缓解组,两组之间比较差异无统计学意义 . . ..,.。结果见附表、附表、 附表。 .淋巴瘤初治组血浆含量高于正常对照组,两组之间比较差异有 . 统计学意义.. .,.淋巴瘤治疗 后组血浆含量高于正常对照组,两组之间比较差异有统计学意义 .:. .士.,.;淋巴瘤治疗后组血浆 . 含量低于初治组,两组之间比较差异有统计学意义 . ..,.。结果见附表、附表。 . 初治组血浆含量高于正常对照组,两组之间比较差异无统 . .,.;治疗后组 计学意义.. 血浆含量高于正常对照组,两组之间比较差异无统计学意义 . . 治疗后组血浆 . .,.研究论文 含量低于初治组,两组之间比较差异有统计学意义.. .:.,.。结果见附表、附表。 各组血浆水平与血清的相关性分析 .对组血浆水平与血清含量进行相关性分析,发现二 者无相关关系严一.,.。结果见附图。 .对组血浆水平与血清含量进行相关性分析,发现二 者无相关关系严一.,.。结果见附图。 .对淋巴瘤组血浆水平与血清含量进行相关性分析,发现 二者呈正相相关严.,.。结果见附图。 .对组血浆水平与血清含量进行相关性分析,发现二 者无相关关系瑚.,.。结果见附图。 各组血浆水平与血清.的相关性分析 .对组血清水平与血清.含量进行相关性分析,发现二 者呈正相相关瑚.,.。结果见附图。 .对组血浆水平与血清.含量进行相关性分析,发现 二者无相关关系忙.,.。结果见附图。 .对淋巴瘤组血浆水平与血清.含量进行相关性分析,发 现二者无相关关系严.,.。结果见附图。 .对组血浆水平与血清.含量进行相关性分析,发现 二者成正相关产.,.。结果见附图。 对组血浆水平与含量进行相关性分析,结果显示二者无 相关关系产.,.。结果见附图。 对组血浆水平与骨髓中浆细胞所占的百分比进行相关 性分析,发现二者成正相关严.,.。结果见附图。研究论文 附 图 . . 臣.? . . . 乏 ? .研究论文 . . . . 暨 口? 盏. . . .. ‰ 尝 ? .研究论文 臣 臣 《 ? . . . . . . 臣 皇 ? . . . . . . 一研究论文 . . . 臣. 瑟. . . . . ‘ 乏 ?. 一研究论文 ‘ 尝 ? . 丘 笔 ?.研究论文 附 表 ?:.: ?: 宰. 捍. 研究论文 旦鱼皇三里狸堡璺望 堡垒里里望垒生兰二垫堡垒生生二三圭堂望型竺 . . ..宰 .士. 拳尸. . ,,? / :.:. .: 掌尸. 捍. ?, ?/ 奉. ??.研究论文 宰. 撑. ?, ;士 幸 幸 :?: 枣. 撑. ????????????????????????????????????????????????..............??? ??........................................./.. ? 木. 撑.研究论文 , / :.:宰尸. 群.?士/ . . .土. .士 .事 木. . 研究论文 讨 论 淋巴细胞激活因子,属于肿瘤坏死因子超家族的新成员【】, 、 于年被发现和克隆,又被称为 ? ,一 , , 】,在淋巴细胞的生长、分化和发育中起重要作用,能以 胞外可溶性及膜结合型两种形式发挥作用。 作为一种蛋白配体, 通过与其受体结合发挥作用,目前发现的受体有细胞成熟抗原. ,、穿膜蛋白复合物 和细胞活化因子受体 ..。如果机体缺乏 ,可导致免疫功能低下,相反,如果过量表达,又可以导致 自身反应性细胞的大量出现。 肿瘤的发生是在癌基因激活、抑癌基因功能失活或下降等因素的影响 下导致的自身细胞的克隆性增殖,而某些细胞因子能够促进或延缓这一过 程。细胞恶性血液肿瘤的发生亦是如此,近年来的研究发现肿瘤坏死因 子家族成员具有促进淋巴细胞生长与增殖的作用,是正常幼稚 及成熟淋巴细胞存活所必须的,而成熟浆细胞的生长也离不开 的作用。那么细胞恶性血液肿瘤的发生发展与的关系势必成为 研究的热点。我们就细胞恶性血液肿瘤患者血清表达水平进行 研究,并与部分临床指标进行相关性分析,宗旨是看能否对细胞恶性 血液肿瘤的诊断、治疗及疗效的评价提供新的思路。 在急性淋巴细胞白血病中的表达 为淋巴细胞系前体细胞克隆性增生的恶性血液疾病,占急性白 血病的%左右,主要发病于儿童及青年。按细胞免疫表型可将 分为前体.触工和前体.,前体.免疫表型为系,前体 .免疫表型为系,其中前体.约占的%.%。我们 的研究结果表明患者血浆可溶性高表达,治疗显效后血浆可 溶性表达下降,结合已经研究证实的的生物学功能可以初步 推断,在的疾病过程中发挥作用,具体作用机制尚不清楚。研究论文 这在国内外均鲜见报道,其可信性尚需大量的实验研究进一步证实。目前 的治疗仍以联合化疗为主,成人的治疗效果非常不理想,虽然 近年来部分患者通过应用甲磺酸伊马替尼格列卫等药物,使得/ 融合基因阳性患者的治疗效果有一定的进步,但长期预后仍然不佳。 这迫使我们必须积极寻找新的治疗途径、研发新药物,改善患者预后。而 对的研究给我们提供这样一种启示:在继续深入研究本身的 同时,或许以为靶分子,以基因作为治疗.的靶标, 能够达到靶向治疗此疾病的目的。 在中的表达 浆细胞来源于前细胞,能够促进骨髓中细胞的生长发育和长 期成活,故对浆细胞也有同样的作用,而是浆细胞恶性疾病,因而我 们通过检测患者血浆中可溶性蛋白的表达水平,以探讨在 患者体内的表达及其临床意义。就在发生发展中的作用, 等进行的实验发现细胞表达,经检测病人血清中可 溶生的浓度比同龄正常人高倍。等人则以的方法分析 例患者及 例正常对照者血浆中的平均含量分别为 /, /,差异具有明显地统计学意义。近年来国内也有人对 病人表达的情况进行了研究,如鞠少卿【】等的研究结果结果显示 病人组中超过%的蛋白、超过%的. 以及超过 %的 表达量高于正常对照组,他们的研究对象包括 例 患者及例同龄正常人。汪萍【】等研究发现患者血清浓度升 高,同时发现患者淋巴细胞膜表面的也是高表达的。年罗泽 宇【】等应用实时荧光定量的方法检测患者骨髓单个核细胞中 ,同步应用技术检测患者血浆的含量,结果 显示 及均明显升高。我们的研究的结果显示患者 中,/莎初治者、侈治疗后未缓解者血浆含量均明显高于正常对 照组,这与前人的研究结果一致。在本实验中例治疗后缓解者含量 与对照比较差异则无统计学意义。根据结果推断在的发病过程 中起作用。研究发现通过与其受体结合才能发挥作用,那么 发挥作用的机制如何呢】等报道通过促使抗凋亡蛋白 .表达增加,从而抑制细胞凋亡,促进其存活与增殖实现的,这研究论文 一过程的实现又有赖于受体、诱导的..,/ 信号途径。而】等的实验结果显示可以通过., /途径促进细胞与骨髓基质细胞的粘附,进而增的旁分 泌,量的增加又促使骨髓基质细胞与细胞的粘附,如此形成恶 性循环,促使疾病加重。可以预言随着在中作用机制研究的不 断加深,必将为对进行靶向治疗提供新的思路,以改善患者联合 化疗疗效及预后不佳的现状。 在淋巴瘤中的表达 近年来细胞恶性肿瘤的发病率逐渐上升,淋巴瘤也是一类严重威 胁人类生命健康的细胞恶性疾病,其发病率亦呈现出上升的趋势,但 发病机制还不明确,伴随着对认识的深入,人们也开始探索 与淋巴瘤的关系问题。等【】研究发现不同亚型淋巴瘤患者,未经 治疗前其血清可溶性含量较正常对照者是明显升高的。以滤泡型非 霍奇金淋巴瘤 ,患者为研究对象,】等用 的实验方法检测患者及正常人血清含量发现,比正常 人血清高三倍。国内季美华【】等的研究结果显示,正常对照组的 显著低于.患者,其中、期患者 明 显低于?、?期,且、期和、?期化疗前明显高于化疗后。 化疗前细胞性慢性淋巴细胞白血病/淋巴细胞淋巴瘤 /,?/患者、套细 胞淋巴瘤 ,和边缘带淋巴瘤 均显著低于弥漫大细胞性淋巴瘤 ,患者的 ,者,差异有统计学意义,但在他们 的实验中患者 与的比较差异无统计学意义。应 用美罗华治疗预后不佳的期患者血清明显增高,这一结果由 等【 】报道的。由于我们的实验研究对象有限,未按具体亚型及分期 分类进行统计,我们的实验结果显示淋巴瘤初治组及治疗后未缓解组血浆 均高于对照组,治疗后,即使未达到缓解状态,其血浆含量 的下降亦有统计学意义。这与已有的研究结果相符。淋巴瘤患者血浆 是升高的。目前此类疾病的治疗方法主要是使用大剂量的化疗药 物,不但疗效不够理想,而且会对机体产生较大的毒副作用,因而,研发研究 论文 新型靶向治疗该类疾病的药物显得尤为重要。有研究报道【】,是通 过?以及.出作用于受体,从而在淋巴瘤中发挥作用的。美 罗华在临床的应用也给我们治疗该类疾病提供了一些启示:可以将某些特 定的分子视为靶位点,以其特定的抗体及作用机制为研究点,从而为靶向 治疗疾病药物的研发提供新思路。对认识的越来越深入,使我们设 想将作为治疗细胞性恶性淋巴瘤的新靶点,具体是否可行尚待 验证。 在中的表达 】等在其进行的体外实验中发现,.患者以大量成熟小淋 巴细胞的累积为特点,这些细胞处于细胞周期的期,造成这种累积的 原因不是淋巴细胞的快速增殖,而是凋亡的不足。】等人应用 . .。.的方法研究发现患 者高表达. 。等的研究结果显示?患者的血清 水平相对于正常人来说是升高的。与等的研究结果相悖的是, 等【】对例患者的研究表明,仅有.%的散发性患者 高表达,就总体而言,健康对照组的水平较患者高。 的实验结果还显示在同等条件下,%的家族性患者 水平则是升高的。我们的研究结果显示初治组及经治疗但未达到缓解状态 的患者,其血浆含量均较正常对照者高,但差异均无统计学 意义。结合已有的研究结果,即有可溶性型及膜结合型两种形式, 且患者 是高表达的,我们推测患者的可能 以膜结合型增高为主。而治疗后患者虽未能到达缓解的状态,但血 浆表达水平较未治疗者显著下降,说明化疗药物可降低患者 血浆可溶性的表达。直至今日,的治疗同其他的恶性血液肿 瘤一样,以化疗药物为主,随着氟达拉滨、美罗华等药物在临床的应用, 的治疗疗效较前有了不小的进步,但是仍然存在耐药性、治疗效果 不理想等等的问题,这就使的我们面临寻求新的治疗方法,以期解决上述 】等研究报道,是通过激活经典的.途径 问题。 促使 细胞的存活的,这一途径的实现还有赖于蛋白激酶?,并 设想通过瞰拮抗剂来治疗。治疗效果不佳的细胞性慢性淋巴细 胞白血病或许是由于.细胞避免了由药物所诱导的凋亡,而】研究论文 的实验正好证实了与细胞逃避药物诱导的凋亡有关系。上述 研究给我们提供新的思路,将作为靶分子进行研究,并进行相关药 物的研发,或许能够达到靶向治疗.的效果。 广泛分布于动物的细胞质当中,是糖代谢中的主要酶类,肝脏 中的含量最高,其次是骨骼肌、心脏、红细胞及肾脏。正常血清中 含有,但血清活性比多数组织活性低,当恶性肿瘤发生时,由于恶 性细胞的代谢旺盛,致使血清水平较正常明显升高,故而,可 以作为肿瘤细胞负荷的一项重要指标【。 .是一种在体内很多细胞但不包括成熟红细胞和胎盘滋养细 胞,特别是淋巴细胞和肿瘤细胞膜上组织相容性抗原 ,的轻链蛋白成分,随更新降解释放入血液中。因此 .也可作为肿瘤负荷的指标。 因为对血清.、检测方便、加之费用低,临床工作中患者 亦易于接受,故在我们的实验中选择此两项实验室指标与血浆水平 进行相关性分析,以探索能否单独或联合用血浆作为细胞恶性 血液肿瘤疾病状态及治疗疗效的评价指标。 我们的研究表明患者血浆可溶性与血清含量无关, 与.相关。根据我们的研究结果推断目前尚不能联合应用血浆可溶 性与血清作为评价患者疾病状态及治疗疗效的新指标。 影响的预后因素很多,】等早在年就提出用浆细胞 指数和.来判断预后,至年期间又陆续有人】提 出不同的指标作为预后因素,如、.、等等。的血液学 表现包括骨髓中浆细胞的增多,可见数量不等的原始及幼稚浆细胞,另外 一个特点就是蛋白单克隆增高,以增高最为多见。鉴于此, 临床上常将骨髓中浆细胞比例及外周血蛋白作为诊断、判断疾病 状态、评价治疗疗效及预后的重要指标。我们的研究结果显示患者 血浆可溶性含量与血清、.及蛋白均无相关关系,而 与骨髓中浆细胞所占的比例成正相关。 与淋巴瘤预后或复发相关的生化指标主要有、.、反应 蛋白及红细胞沉降率等。】等报道淋巴瘤患者血清含量与 成正相关。我们实验中对淋巴瘤患者血浆与临床易得到的生研究论文 化指标、.进行相关性分析,结果显示与、. 均无关。 有文献报道,慢性淋巴细胞白血病的预后因素包括血清.、 、细胞/分子遗传学异常、、.、免疫球蛋白重链可变区 突变等等,我们的研究结果显示患者血浆含量与血清. 呈正相关,而与血清则无关。 我们的实验中对血浆含量与临床指标进行相关性分析时,与其 它文献比较,阴性结果较多,分析其可能的原因有以下几种情况:.由于 研究的病例有限,病例组没能按相关的具体亚型分类进行血浆与血 清.、相关性的研究,使得出的结论有一定的局限性。.条件 的限制,部分实验组血液标本与送检生化指标血液标本采集时间的不同步 性,亦有可能导致实验数据误差的扩大出现阴性结果。.实验中标本收集 的时间跨度较大,虽然血浆含量的检测相对集中,且试剂为同一厂 家、同一批次的,但临床生化指标的检测所用试剂难以保证为同一批次的, 初步分析这也是造成出现阴性结果的因素之一。.限于实验条件,在标本 的收集、分离及储存、处理过程中虽然坚持无菌操作的原则,但是各步处 理过程中还是不能完全避免标本被污染的可能性。 结 论 、、淋巴瘤患者血浆可溶性蛋白含量异常表达,说明 在上述细胞恶性血液肿瘤的发病中可能占有一定地位,检测血浆 蛋白表达水平可能对上述疾病的疾病状态、预后、药物治疗有一定 的作用,具体机制还有待进一步研究。 患者血浆可溶性蛋白含量与正常人无明显差异,但尚不足以 否定在中的作用,有可能蛋白主要以膜结合型形式存 在并发挥作用的。 关于血浆可溶性蛋白含量与相关疾病预后指标间的相关性研究, 除及组蛋白与.、组与骨髓中浆细胞所占比例 成正相关外,其余均无相关关系,出现阴性结果的原因还有待进一步进行 实验证实。研究论文 参考文献 , ,.? . ? , ,: 张之南,沈悌.血液病诊断与疗效标准.第版,北京,科学出 版社,: ~,~,,?, , , .: ., , :.? , :,. ,:. , , , 印 ., , :. , , , . ,,:, , ..,, : ., , , . ,: 汪萍,沈立松,张冬青.及其受体在多发性骨髓瘤中的表达.检 验医学,,: 罗泽宇,申建凯,张广森.细胞活化因子/增殖诱导配体在多发性骨 髓瘤中的表达特点和临床意义.临床血液学杂志,,: . , , , ? 研究论文 ,:, . , , , . ,,: .., , : ?: .,, 季美华,张冬雷,张桂华,等.细胞恶性肿瘤患者细胞刺激因子 异常表达及其临床意义.中华肿瘤防治杂志,,: . , , , ,,: ? . .? , , , ?/ .,, : ., , , ~ ?. : . , , ? :: .,, . , , , ?,,: . , , , ? ,,, :. , ,, ., ,:~ 研究论文., , ., ,: ., ,’ , . . .,,: 董丽华,申建凯,张广森.多发性骨髓瘤患者徐青白细胞介素.含量 与临床骨病关系的研究.临床血液学杂志,,:~ 王忠京.多发性骨髓瘤患者血清.微球蛋白和.反应蛋白水平与病 程和预后的关系.临床内科杂志,,:~, , .~ . ,,:, , , ... .. :., : 综 述 综述 细胞激活因子在细胞恶性血液病中的研究进展 细胞激活因子 ,它是于 年被发现和克隆的,为肿瘤坏死因子 超家 族成员【】,又称为 ,. ., , , ,在 淋巴细胞的生长、分化和发育过程中,起重要作用【。目前国外 对在自身免疫性疾病女、、、、等及细胞恶 性血液疾病如、、等中均有研究,而国内对其的研究 主要是在自身免疫性疾病,在恶性血液病中的研究较少。国内外鲜见有关 在中表达情况的报道。现主要就的结构及组织分布特点、 受体、生物学功能及其在细胞恶性血液病中的相关研究进展做一综述。 的结构及组织分布特点 . 的结构特点细胞激活因子基因定位于染色体., 长约.,巨噬细胞和嗜中性粒细胞是分泌产生的主要细 胞,树突状细胞和活化的细胞也可以分泌很少量的。属于 型单链糖蛋白,由个氨基酸残基组成的,分子量约为,属于胞 内区的部分不含有信号肽,位于末端,胞外区则位于末端,其中跨膜 区占据.位氨基酸,胞外区占据.位氨基酸,其发挥功能的主要 区域位于.位氨基酸,.位氨基酸残基区域含有与受体结合的 结构域。胞外区部分的片段可发生水解,形成可溶性功能片段 ,这一变化需依附弗林蛋白酶的参与。的单体由两个折叠 片层组成,这两个折叠片层是相互平行的,而每个折叠片层又含有条 折叠股,如此形成的单体呈锲形样的“三明治结构。通常情况下, 发挥生物学作用时大都形成同源三聚体的形式。 . 的组织分布特点】和】等采用与 在人体表达最丰富的 杂交技术分析的表达分布,发现 部位是外周血单核细胞、淋巴结、脾脏和骨髓,弱表达的组织主要有胎盘、 综 述 胸腺、胰腺、心和肺。 的受体 作为一种配体蛋白,发挥生物学作用时必须与受体结合。目前已发现的受体 有个: 、 及 ,也称为. 。是型膜蛋白,大小包含个氨基酸,特异表达在成熟的 细胞表面,其胞外端含有保守区,由个半胱氨酸组成。多数 蛋白定位于胞内高尔基体内。基因定位于在染色体, ’ 全长.。 属于型膜蛋白,由个氨基酸组成,主要表达在细胞和活化的细胞。通过途径传 导信号,激活转录因子.、.和.发挥作用。其胞外 有个富含半胱氨酸的重复区,分别为.和.,胞 外富含的半胱氨酸保守区和这个保守区同源性很高,但所含的富 全长 含半胱氨酸的重复区与其它受体超家族成员不同。 约.。 的第三个受体.,是】等在对细胞系的研 个氨基酸组成的?型穿膜蛋白,主要表 究中发现的。.是一种由 达于脾脏细胞,除此之外,静息细胞和静。息细胞也有表达。 受体大多数由多个半胱氨酸富集区组成,而每个由个半胱氨 酸残基和个二硫键组成,但是在.胞外或配体受体结合区仅含有 全长约 个,其在受体家族中所含最少。人. .。 及其受体的生物学功能 】等应用小鼠的动物模型首先证明是细胞存活的必需因 子。】等发现,在体外细胞数量的增多与应用重组的可溶性 有关。骨髓内不成熟细胞和阶段细胞的发育和成熟与是无关, 这是由】等应用基因敲除和导入基因的方法研究发现的,边缘 带和阶段的细胞是依赖性的,在该项实验中同时证明了在缺乏 辅助的情况下,细胞不能发育为边缘带和成熟细胞。】等以综 述 体外实验发现细胞数量之所以得到提高,是因为能够通过提高 所刺激的细胞数量,降低凋亡。但在体内增殖细胞是否依赖 尚未得到证实。 在体外,应用抗抗体来检测对标准细胞活化功能,研 究结果显示对其具有共刺激效应,能诱导活化的细胞分泌、 、等。在体内,它可以介导外周不成熟细胞的存活并且可以促 使不成熟细胞分化为成熟细胞。另有研究报道细胞正常发育、脾 脏生发中心形成、记忆性细胞形成及抗体亲和力成熟均离不开 的正常表达。】等用生物素对进行标记,检测发现,只 与淋巴细胞结合,不与细胞、单核细胞、粒细胞等细胞结合。与 的研究结果不同的是,】等研究表明在细胞介导的反应 中也发挥了重要作用。的生物学活性主要是通过与其相应受体相互 作用而实现的。的、和.受体均含有与配体相 结合的半胱氨酸富集区,但不含死亡区域的功能区,因而它们与 结合后,都不能诱导细胞凋亡,却可通过激活.等促进细胞生长、 分化和成熟【。在调节自身免疫反应和自身免疫性疾病、细胞恶 性肿瘤的发病过程中起重要作用。 在细胞恶性血液疾病中的研究现状 . 与慢性淋巴细胞白血病 。 等最早发现部分.患者异常表达和 ,推测其可能是由细胞自分泌表 达的。等进一步证实了.细胞之所以能够逃避药物所诱导的 凋亡,是因为受到和的保护作用。】等在其研究中 证实转基因小鼠中与.有关的细胞的数量是增加的。 】等研究发现.患者的血浆中可溶性低表达, 则高于健康人。而细胞内、均高表达。及的 在.及健康人的细胞中都有表达,只是. 的表达水平相比健康人是明显升高的。等的研究结果与】 等的研究结果一致。】等通过对例患者的研究发现,就总 体而言,健康对照组的水平较患者高,本实验中还发现在同 等条件下,大约%的家族性患者水平是升高的,仅有.%